Obiettivi: Diversi microrganismi appartenenti al genere
Nocardia spp. possono causare infezioni eterogenee
nell’uomo quali: malattie respiratorie, ascessi cerebrali,
lesioni meningee, infezioni cutanee, articolari e oculari e
le specie più frequentemente isolate sono N. asteroides e
N. brasiliensis. La prognosi è favorevole, tranne nei casi di
nocardiosi disseminata nei pazienti immunocompromessi.
La diagnosi di laboratorio tradizionale a volte non
è semplice e in genere si basa sull’osservazione
microscopica del campione e sull’esame colturale. Lo
scopo del lavoro è stato quello di utilizzare metodiche
molecolari, quale la PCR real time, per arrivare a una
diagnosi di laboratorio più veloce e specifica.
Materiali e metodi: Il DNA proveniente da diversi
campioni, biopsie o tamponi cutanei prelevati da
pazienti con sospetta Nocardiosi, e’ stato sottoposto ad
amplificazione tramite PCR real time (light-Cycler Roche).
La PCR amplificava un segmento di 228 bp lungo il
gene rrs specifico per Nocardia spp; nei casi dubbi
o dove è richiesta l’identificazione di specie, e’ stato
possibile sequenziare l’amplicone con metodo capillare.
La positività è stata valutata tramite l’analisi della curva
di melting (Tm=91 °C) o tramite gel di agarosio. I risultati
sono stati confrontati con il metodo colturale. Come
controllo positivo è stato utilizzato e un ceppo di collezione
di N. seriolae (ATCC 43993).
Risultati: La procedura utilizzata è risultata più veloce (4
ore) e sensibile rispetto al metodo colturale tradizionale,
il limite di rilevamento della PCR è risultato essere pari a
(500 copie DNA/PCR).
Conclusioni: La procedura descritta potrebbe dare dei
benefici nella diagnosi di laboratorio per Nocardia spp.
In particolare nei casi di campioni negativi alla coltura e
positivi al microscopio per forme alcool resistenti.
1. Brown-Elliott BA, Brown JM, Conville PS, et al. Clinical
and laboratory features of the nocardia spp. based
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intergenic spacer region-capillary gel electrophoresis
typing method for identification and subtyping of Nocardia
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