Caracterización molecular de los mecanismos de resistencia a inhibidores de Polo-like kinasa 1 en cáncer colorrectal. Papel de simvastatina como modulador de la resistencia

Abstract

Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de Lectura: 05-04-2022Los inhibidores de Polo-like Kinasa 1 (PLK1) tienen un alto potencial como agentes antitumorales ya que van dirigidos al proceso de mitosis celular, aunque en ensayos clínicos la aparición de resistencias contra estos fármacos ha supuesto un reto para su aplicación en la práctica clínica. La caracterización de estas vías de resistencia adaptativas es el objetivo de esta investigación así como el descubrimiento de nuevas terapias combinadas que consigan revertir esta resistencia. Se emplearon 4 líneas de cáncer colorrectal (HT29, RKO, SW837 y HCT116) para generar la resistencia al inhibidor de PLK1 BI2536 mediante la exposición continuada al fármaco. Las líneas resistentes HT29R, RKOR, SW837R y HCT116R fueron validadas in vitro a través de ensayos de concentración inhibitoria del 50% del crecimiento (IG50), e in vivo mediante la evaluación del ratio T/C. Para evaluar el papel de las mutaciones como mecanismo de adquisición de resistencia, se secuenciaron los exones 1 y 2 del gen PLK1 en las cuatro líneas celulares resistentes, encontrando la presencia de la mutación R136G en la línea RKOR. En el resto de líneas (HT29R, SW837R y HCT116R) la vía de señalización de AXL a través del factor de transcripción TWIST1 fue identificada como uno de los mecanismos involucrados en estas tres líneas resistentes, induciendo la transición epitelio-mesénquima (TEM) y el aumento de expresión de MDR1. Las estatinas han demostrado un gran potencial en la quimio-sensibilización en muchos tipos de tumores así como la modulación de AXL, por ello evaluamos el impacto de simvastatina como agente re-sensibilizante in vitro, obteniendo como resultado el bloqueo del mecanismo de resistencia común activado en las tres líneas. El tratamiento combinado de BI2536 y simvastatina fue testado tanto en ensayos in vitro obteniendo una re-sensibilización al inhibidor de PLK1 en las tres líneas resistentes, como in vivo, observando una reducción del ratio T/C por debajo del punto de corte establecido. Los resultados de esta investigación demuestran que la inhibición de la vía del mevalonato contribuyó a la re-sensibilización de líneas de cáncer colorrectal resistentes a BI2536 in vitro e in vivo, planteándose como una nueva estrategia terapéutica para el manejo clínico de los inhibidores de PLK