郷, 康広

Kyoto University Research Information Repository

Title5-5 ヒト特異的機能遺伝子およびヒト特異的偽遺伝子の探索(X.共同利用研究 2.研究成果)Author(s)郷, 康広Citation霊長類研究所年報 (2005), 35: 101-101Issue Date2005-08-31URL http://hdl.handle.net/2433/166141RightType Departmental Bulletin PaperTextversionpublisherKyoto Universityから.再現性の高いニホンザル精子の精液採取法と凍結保存技術の確立に関する研究を行っている.これまでの研究で.屯気刺激による精液採取法は確立したが,昨年度に引き続いての凍結保存法の開発は,シーズン初めの霊長研の分析装置の故障により,今年度は実施できなかった.しかしながらこれまでの予備的な突放の結果から,ニホンザルにおける相子の至適凍結条件は,代表研究者が以前.チンパンジーで得た至適条件とはかなり異なり,希釈液と保存容器については,それぞれ修正mとプラスチック製ストローが,また凍害防止剤については DMSO よりもグリセリンが好適で,その濃度は2.5%が最適であった.また冷媒には,液体窒素ガスを用いて急速に凍結するほうが適当と思われた.今後,分析装置の再導入を待って.確認の実験を行いたい.5-3テナガザル類のY飴色体解析用分子マーカーの作封田口尚弘 (高知大･黒潮圏海洋科学･海洋健康医科学)染色体顕微切断法を使って,テナガザルの微小 Y染色体を標的としたプロー ブの作A,およびクロー ニングを施行した.テナガザルY染色体から頗微切断で得られたDNA断片をPCRで増幅し,得られた産物の由来部位をFISH法で確認した.プロー ブ化したPCR産物はテナガザルの微小Y染色体全体に分子雑種形成したので,プロー ブ作製の成功を確認できた.次にこのプロー ブのTAクローニングを行い,2つのクロー ンからシークエンスを得ることができた.両者はほぼ同じ塩基配列であった.データベースでその塩基配列を検索したところ.チンパンジー Y染色体で報告されているクロー ンと類似性を得た.また,ヒトのY染色体上のDAZ(無精子症欠失部)遺伝子中の反復配列と高度の類似性を示した.さらに,FISH解析で,こIのプローブの存在部位の種間比較を行った.アカゲザルY染色体ではシグナルは得られなかったものの,チンパジーとヒトのY染色体ではユークロマチン部分にシグナルが得られた.従って.このプロー ブは類人猿,ヒトのY染色体のマーカーとして有用であることが分かった.514霊長類培衣細胞株の樹立明Bi宏文 (国立感姓症研究所･筑波霊長類センター)本研究では.報告者が以前確立したHVS不死化法に基づく霊長類機能細胞の不死化技術を応用して,多様な霊長類由来細胞株の樹立を試みた.その結果,今年度は新たに旧世界ザルとしてブタオザル (3株),蘇世界ザルとしてコモンマ-モセット(2株),アカテクマリン (1株),コモンリスザル (1抹),ヨザル (l株)の樹立に成功した.昨年度までに独自に樹立したものと合わせて,これまでに9種類26細胞株が樹立されている.今後はアフリカミドリザル,ヨザル,コモンリスザル,テナガザル,フサオマキザル等の不死化細胞株の樹立を進めるとともに,それぞれの樹立細胞株についての特性解析を行う予定である.本研究成果により.サル類による動物モデル研究･開発等トランスレー ショナルリサーチにおいて.細胞レベルの解析が可能となる.このことは動物実晩を極力避けるべきとする国際的傾向とも合敦するものであり非常に有意義であると考えられた.5-5ヒト特異的機能遺伝子およびヒト特異的偽迫伝子の探索郷康広 (総合研究大学院大 ･先準科学)本研究は,種の個別性 ･特異性の迫伝的基盤を明らかにするために,ヒトおよび旧世界ザルの各臓器において種特異的に発現している.もしくは発現していない (偽遺伝子化も含む)迫伝子を探索することを目的とした.昨年度,方睦を確立するために行った実験の結凪ヒト上皮細胞でマウス上皮細胞と比較した結果.発現が有意に低下している51個の候補迫伝子(多くのRNA遺伝子を含む)を同定した.本年度は.その結果を受け,系統的によりヒトに近いマカク属を対象とし,より広範におよぶ解析をするために,各種臓器 (肝臓 ･膵臓 ･牌臓 ･精巣 ･胎盤)の収典につとめた.また,遺伝子発現の個体差を考慮し,各臓器に対して,4個体以上からのサンプルの収集を行い,RNA抽出･CDNA合成まで行った.すでに方法は確立されているので,次年度以降,引き続きのサンプル収典を行うとともに.実験･解析をすすめ,ヒト化に至る過程で発現が冗進 ･抑制された候補迫伝子を絞り込み,その生物学的･進化的な意味付けを行う.5-6霊長類染色体の 3次元核内配置と核型進化 ･系統進化に関する研究田辺秀之,宝来聴 (総合研究大学院大 ･先導研 ･生命体)本研究は,霊長類各種における核型分析データを参照しながら,間期核における染色体テリトリー の 3-101-

5-5 ヒト特異的機能遺伝子およびヒト特異的偽遺伝子の探索(X.共同利用研究 2.研究成果)

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