金沢大学理学部カイコガ精子には二型ある。いずれも精巣で作られた後、貯精嚢にて射精まで待機するが、無核精子、有核精子束のいずれも動かない。無核精子の運動性獲得因子は、雄生殖輸管の末端に位する前立腺に局在することが、まず突き止められた。次いで、この因子が、前立腺から分泌されるセリンプロテアーゼ型エンドペプチダーゼ、イニシャトリンであることが確認された。この酵素は、アルギニンのC側で、ペプチド鎖を切断する。SDS-PAGEによって、分子量は30kDaと測定された。それから分離されたイニシャトリン標本より抗体を作製した。交尾前の活性上昇は、mRNAの翻訳によって生ずる酵素分子の増加に他ならない。この酵素を、雌交尾嚢に作らせた精包から、BAEEを基質としてassayを行い、HPLCで精製した。極めて不安定で4種のisoformが得られた。その中の2種は29KDa、他の2種は26KDaで、何れもBAEEase活性を表すが、無核精子の賦活能は弱く、30KDa-イニシャトリンの部分解物ではないかと考えられる。29KDaの分子量を持つI型のシーケンスをN末から20のアミノ酸について、GENETYXによる検索を行った。この酵素は、8種の哺乳類のエンドペプチダーゼとの高い相同性を示した。次に、出発材料として雄前立腺を用い、アフィニティカラムを備えたFPLCで精製した。2つのピークが得られ、それぞれ、30KDaと29KDaであった。このKDa-イニシャトリンは、少量で無核精子を賦活した。ヤママユガでも、イニシャトリン類似のエンドペプチダーゼが見出され、無核精子を活性化し、カイコガとは相互互換性も見出された。直し目の有核精子の運動性獲得機構も、カイコガおよびヤママユガ等、鱗し目の無核精子と同一であった。The silkmoth, Bombyx mori(Bombycidae) produces two types of spermatozoa, apyrene spermatozoa and eupyrene spermatozoa that fertilize eggs. In the vesicula seminalis of male moth, these spermatozoa are immotile. We found that the apyrene sperm-activating factor (AAF) is secreted from the glandula prostatica of the male reproductive tract, and that AAF is initiatorin, an endopeptidase of serine-protease type that splits proteins at the arginine residues on the C-side. Molecular weight of this enzyme was determined as 30KDa with SDS-PAGE.Antiserum was prepared from a band of this PAGE corresponding to initiatorin. Immunological analysis demonstrated that the rise in this enzyme activity at the emergence results in an increase in the enzyme molecules produced by translation of mRNA.Initiatorin was purified using HPLC from the spermatophore formed in the female bursa copulatrix. The enzyme activity was tested with BAEE as a preferred substrate of initiatorin. This protease is very heat-labile. After purification four isoforms, two 29KDa and two 26KDa were obtained. Although they have high specific activities of BAEEase (200-fold purified), their abilities inducing sperm motility is relatively not strong. They may partially degraded products of the true 30KDa-initiatorin found in the glandula prostatica. Twenty amino acids of a purified 29KDa preparation, initiatorin I was sequenced from the N-terminal. Examination with GENETYX showed that this had high homologies with eight endopeptidases of various mammalian tissues. The 30-KDa initiatorin preparation purified from the glandula prostatica showed a high motility-inducing activity. In a wild silkmoth, Antheraea yamamai(Saturniidae), initiatorin-like endopeptidase was also found. This enzyme activated Antheraea-sperm as well as Bombyx-sperm. The identical mechanism of acquisition of sperm motility was also found in the orthopteran insects.研究課題/領域番号:03455026, 研究期間(年度):1991 – 1993出典：研究課題「蚕蛾精子の運動性獲得機構の解明,蚕蛾人工受精への挑戦」課題番号03455026（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-03455026/034550261993kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作
