Gheibi, Dr. Nematollah

pourfarzad, farnaz

Qazvin University of Medical Sciences Repository

 1    دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی قزوین  دانشکده ی پیراپزشکی  گروه بیوتکنولوژی پزشکی  پایان نامه جهت اخذ کارشناسی ارشد رشته ی بیوتکنولوژی پزشکی   عنوان:،  یسلول یبر بقا پوزومیمحصور شده در ل دیاس کیاثر پاراکومار یبررس in یها طیدر مح p-53و   caspase-3 یژن ها انیو ب یکیخواص مکان vitro  یسلول یرده  یرو A-375  سرطان مالنوما   استاد راهنما: جناب آقای دکتر نعمت اهلل غیبی  استاد مشاور:   جناب آقای دکتر علیرضا فراست نگارنده ی پایان نامه:  فرناز پورفرزاد  1401شهریور  2   چکیده. باشدمی  مطلوببیولوژیکی خواص و دارای فنولی فراوان در طبیعت اسید یک ترکیب پلی پاراکوماریک . پیش زمینهاین مطالعه  نانوحامل، در  از  این ترکیب  افزایش دسترسی زیستی و حاللیت  لیپوزومی استفاده جهت  و شد های های شده در لیپوزوم بر روی بقای سلولی، آپوپتوز، ویژگیاسید محصور اسید آزاد و پاراکوماریک اثرات پاراکوماریک  .گرفت  مورد مقایسه A-375ی سلولی بر روی ردهp-53 و  3-های کاسپازنانومکانیکال و بیان ژن های حاوی پاراکوماریک اسید با روش تبخیر فیلم نازک تهیه شدند. صحت بارگذاری با لیپوزوم . مواد و روش هاشد. سنجیده  DLS و  SEMها با استفاده از شیمیایی لیپوزوم -های ظاهری و فیزیکیو ویژگی FT-IRاستفاده از جهت  MTT آزمون از محاسبه شد. 8/6و  pH4/7 درصد رهایش با استفاده از تکنیک غشای دیالیزی در دو . شداستفاده  A-375 هایمیزان سمیت پاراکوماریک اسید آزاد و محصور شده در لیپوزوم بر روی سلول  بررسینکروز سلولی و   آپوپتوز و  از    تغییراتدرصد  بااستفاده  فلوسایتومتری و میکروسکوپ آزمون نانومکانیکال  های  آر بررسی شد. سیبا استفاده از ریل تایم پی p-53 و 3-های کاسپازمیزان بیان ژن  شد.نیروی اتمی ارزیابیبا میانگین  اه و تشکیل لیپوزوم  درصد 25/71با کارایی  مطلوب ترکیب  بارگذاری DLSو  IR-FT ،SEM .نتایج. رهایش پاراکوماریک اسید آهسته و به صورت دادندرا نشان ولت میلی  -3/14نانومتر و پتانسیل زتای  6/109اندازه  ها مانی و بقای سلولکاهش زنده . هر دو ترکیب باعث بود 4/7بیشتر از  8/6اسیدی   pHکنترل شده و درصد آن درکرد. نیروی  . نتایج میکروسکوپ نیروی اتمی نتایج فلوسایتومتری را تاییدشدندالقای نکروز و آپوپتوز ثانویه  باگروه  در  نیز  االستیک  مدول  و  بیانچسبندگی  افزایش  بیشترین  داشت.  افزایش  تیمار  کمترین   3  هاژن   های  در - یشترین میزان بیان کاسپاز ب در گروه کنترل یک و هامیزان بیان ژن میکروموالر مشاهده شد. 15و  5یعنی  هاغلظت   تر بود.اسید لیپوزومه در القای نتایج فوق موفقپاراکوماریک  محاسبه شد. 83/7و  46/8اثر تیمار در  p-53و  3لیپوزوم  ندنتایج نشان داد  نتیجه گیری. برایپاراکوماریک ها حاملکه  القای رهایش  هستند اسیدهای مناسبی  با  و - و کاسپاز  p-53 هایی ترکیب ، در القای آپوپتوز و نکروز سلولی و افزایش بیان ژنمداوم، آهسته و کنترل شده  ورد بررسی قرار بگیرند. سرطانی مکمل متوانند به عنوان یک عامل ضد می و کنندآزاد عمل می نوع تر ازموفق 3p- – 3-کاسپاز – A-375 –لیپوزوم  -نانوحامل –ترکیبات پلی فنولی  –پاراکوماریک اسید  کلمات کلیدی.53    3  Effects of liposomal para-coumaric acid on cell viability, apoptosis, mechanical properties and expression of caspase-3 and p-53 genes in A-375 melanoma cell line  Abstract: Objective(s): para-coumaric acid (p-CA) is a polyphenolic compound with desirable biological benefits. In this study, we used liposome nanocarriers to increase its bio-availability and stability. We also compared the effects of free p-CA and p-CA loaded liposomes on cell viability, apoptosis, nanomechanical properties and caspase-3 and p-53 gene expression in melanoma A-375 cell line.  Material and method: liposome preparation was done through thin film hydration method. the accuracy of encapsulation, morphology and physio-chemical properties of liposomes were analyzed via FT-IR, SEM and DLS. The release percentage of liposomes were measured via dialysis technique in two pH of 7.4 and 6.8. cytotoxic effects of free and liposomal p-CA were evaluated via MTT and flowcytometry assays. nanomechanical changes of treated cells were investigated via AFM. qRT-PCR was carried out to analyze the caspase-3 and p-53 gene expression changes. Results: p-CA was correctly loaded and prepared liposomes proper mean particle size and zeta-potential of 109.6nm and -14.3mv, based on FT-IR, SEM and DLS results. Their release pattern of was sustained, controlled and slow with higher percentage in acidic pH of 6.8. both compounds decreased the A-375 cell viability through induction of late apoptosis and necrosis based on MTT and flowcytometry results. AFM confirmed previous results as both compounds increased young’s modules and adhesion force parameters. P-53 and caspase-3 genes had higher expression rate with more regular pattern in liposomal p-CA treated group compared to free p-CA treated group.  Conclusion: liposomes could act as suitable nanocarriers for p-CA, cause the sustained and controlled release of it and exert higher cytotoxic effects compared to free p-CA.  p-CA encapsulated liposomes could be used as a complementary anti-cancer agent in future studies. Keywords: para-coumaric acid – polyphenolic compounds – nanocarriers- liposome – melanoma A-375 – caspase-3 – p-53   4   In the name of God   Qazvin University of Medical Sciences Faculty of Para-medical Sciences Department of Medical Biotechnology  Thesis of receiving degree in medical biotechnology    Title:  Effects of liposomal para-coumaric acid on cell viability, apoptosis, mechanical properties and expression of caspase-3 and p-53 genes in A-375 melanoma cell line  Supervisor: Dr. Nematollah Gheibi  Written by: Farnaz Pourfarzad   September 

بررسی اثر پاراکوماریک اسید محصور شده در لیپوزوم بر بقای سلولی ، خواص مکانیکی و بیان ژن های caspase-3  و p-53 در محیط های in vitro  روی رده ی سلولی A-375 سرطان ملانوما

http://eprints.qums.ac.ir/11955/1/farnaz%20pourfarzad%20thesis.pdf

بررسی اثر پاراکوماریک اسید محصور شده در لیپوزوم بر بقای سلولی ، خواص مکانیکی و بیان ژن های caspase-3 و p-53 در محیط های in vitro روی رده ی سلولی A-375 سرطان ملانوما

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Qazvin University of Medical Sciences Repository