Alarcón de la Lastra, C.

Martín , M. J.

Motilva, V.

Ars Pharmaceutica (Internet)

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ESTUDIO HISTOHORFOHJrIRICO E HISTOQUIMICO DE LAS MODIFICACIONES INDUCIDAS POR QUERCETINA SOBRE MUCOSA GASTRICA DE RATA EN UN MODELO DE ULCERACION PROVOCADO POR ETANOL ABSOLUTO C. Alarc6n de la Lastra, M.J. Martin, V. Motilva Laboratorio de Farmacognosia y Farmacodinamia Facultad de Farmacia, Universidad de Sevilla, Espafia INTRQDUCCION En el presente trabajo se ha realizado un estudio histomorfológico e histoquimico del dafto inducido por etanol absoluto (Robert, 1979) en la mucosa gástrica de ratas sometidas a un tratamiento previo con Quercetina (200 mg/kg). Asi mismo, se han determinado las modificaciones inducidas glicoproteico de las secreciones glandulares. en el contenido Los resultados obtenidos se compararon con Carbenoxolona (80 mg/kg) y con dos grupos control: - Control 1, solución salina fisiológica - Control 2, solución salina fisiológica + etanol absoluto MATERIAL y HJrl'ODOS Utilizamos el modelo descrito por Bulbena y cols. (1986). Los cortes fueron teftidos con Hematoxilina/Eosina, PAS y Azul Alcian (AA) (pH 0. 5). Los estudios morfométricos se llevaron a cabo valorándose tanto en áreas necróticas como en zonas no necrosadas de la mucosa. El microscopio, Olympus BH, se conectó a un analizador de imágenes CCD Camera Mintron y con un lápiz electrónico se 482 delimitaron las áreas de las figuras proyectadas desde el microcopio sobre la pantalla, evaluándose tanto la extensión del dafto en la glándula, como la superficie ocupada por el contenido de la secreción mucoide. -Extensión del .dafto en la glándula gástrica. Para determinar la extensión y el grado del daño producido por el etanol absoluto se midieron los siguientes parámetros en las serieff de cortes teñidos con Hematoxilina/Eosina, seleccionándose áreas necrosadas de la mucosa: Longitud total de mucosa examinada (mm) / rata. Porcentaje total de mucosa lesionada Porcentaje de mucosa lesionada, cuantificado siguiente escala'propuesta por Lacy ( 1982): según la 0- Células superficiales intactas, de aspecto, localización y densidad normal . Glándulas profundas y estrechas con células mucosas del cuello, parietales, principales y endocrinas intactas. 1- Células mucosas superficiales vacuoladas, con núcleos picnóticos. Exfoliación de algunas células superficiales. Células del interior glandular no dañadas. 2- Daño extenso de las células superficiales. Células de la foveola glándular exfoliadas o alteradas. Resto de,la glándula sin dañar . 3- Daño evidente en la pared gástrica. Numerosas células exfoliadas y capas necróticas. Pérdida de la capa foveolar, células parietales con frecuencia en superficie. 483 Contenido en glicoproteinas totales y sulfatadas Las tinciones con PAS y Azul Alcián en las series de cortes correspondientes nos proporcionaron una medida del contenido de glicoproteinas presentes en la superficie glandular. Estos estudios histoquimicos se llevaron a cabo en cinco campos distintos, para cada rata, y solo se valoraron aquellos en que se observaba la glándula gástrica en su totalidad, por lo que las áreas seleccionadas correspondían a zonas no necrosadas de la mucosa. RRSULTADQS y DISCUSIÓN En todos los grupos tratados se observó una significativa reducción en el porcentaje de mucosa lesionada, (p<O.Ol) , en relación a los animales que recibieron exclusivamente el agente ulcógeno, ya que en éstos, el dafio se muestra evidente en toda la superficie mucosal analizada ( 100%) . Histológicamente se aprecia una lesión celular extensa en el tercio superior de la mucosa gástrica (zona foveolar) , (77. 88+7.6%), profundizando hasta zonas del cuello glandular con exfoliación de c élulas epiteliales mucosecretoras, por lo que es frecuente observar células oxinticas en superficie . Trás la administración de Quercetina este dafio fué considerablemente menor ( 18. 16±1 1. 9%), siendo del mismo rango que el del fármaco de referencia ( 19. 42±6. 60%) , Tabla I. El porcentaje de mucosa dafiada con grado 1 fué relativamente elevado en todos los grupos tratados con los fármacos en estudio (28. 17± 1. 5% - 34. 66±3. 90%) . Sin embargo en el grupo control 2, se 484 alcanzaron valores muy bajos, (5.43+3.8%) . La apariencia microscópica de estos estómagos muestra pérdida de células epiteliales superficiales permaneciendo el resto del área foveolar sin alterar. La administración intragástrica de etanol absoluto tiende a aumentar tanto el área PAS+ (glicoproteinas neutras) como la proporción de moco gástrico teñido con Azul Alcián, (glicoproteínas sulfatadas) . El tratamiento con ambos fármacos, asi mismo, incrementó el material mucoso PAS+ y AA+ en las glándulas gástricas, obteniéndose valores significativamente más altos con respecto al control 1 si bién la administración de Quercetina 200 mg/kg produjo un leve aumento el los valores glicoproteícos respecto al grupo control 2, (Tabla I I) .  Como las glicoproteinas neutras son las mas abundantes y posiblemente las que tienen una función más destacada en la mucosa gástrica es lógico suponer que su reposición cuantitativa representa una vuelta a la normalidad de la mucosa y por lo tanto la recuperación de la capacidad defensiva frente a la agresión provocada por el etanol absoluto. El incremento observado en los valores de glicoproteinas podria estar asociado, asi mismo, a procesos regenerativos de la mucosa (Kohsokabe , 1982; Nakamura, 1982) Y su reducc ión está relacionada con una disminución de la resistencia de la barrera mucosal. 485 BIBLIQGRAFIA BULBENA O., ESCOLAR G., ESPLUGUES J. V ., MARTI -CABRERA M., ESPLUGUES J.; Efectos del acexamato de zinc sobre la sintesis de moco gástrico en la úlcera por estres, estudio comparativo con otros fármacos"; Rev. Farmacol. Clin. Exp. 3, 105-109, 1986. KOHSOKABE S., UMEHARA S., ITO H., HAYASHI T.; "Histochemical studies on the experimental gastric ulcers induced in rats by serosa-searing (S-S) method, changes of mucosubstances in S-S ulcer"; En: Advances Exp. Ulcer, IVth International Coference for Experimental Ulcer (ICEU) , Umehara S., Ito H. (Eds.) , Tokyo; pp 395-404, 1982. LACY E.R., ITO S.; "Ethanol induced insult to the superficial rat gastric epithelium. 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ROBERT A.; "Cytoprotection by prostaglandins"; Gastroenterology 77, 761-767, 1979. 486 Longitud mucosa eX!lJ1linada/rata (1I1Il) Longitud total lesionada (lI;) Longitud danada (lI;) 2 3 Control 1 4. 94±O. 21 O C:Qntro 1 2 4.80±O.5 100±O.O 5.43±3.8 16. 69±7. 1 Ca rlJe'lOX. 80 4.83±Ó.4 63.21±B.1 34. 66±3. 9 9.82±5.4 120 ni; n ** (JUer�c8t i na 200 4.99±O.6 54.71±13.7 28.17±5.1 8. 37±5. 3 ilO min ** ** p<.O.Ol Tabla l. Evaluación histornorfornétrica del dano rnucosal inducido por etanol absoluto. Control 1 (sin tratar), Contr0l 2 (tratado con etanol abs.), Carbenoxolona (80 mg/kg) y Quercetina (2.00 rng/kg). 487 77 .B8±7.6 19.42±6.6 18.16±11.9 Tabla 11. Contenido mucoproteico glandular. Control 1 (sin tratar), Control 2 (tratado con etanol absoluto) Carbenoxolona (80 mg/kg) y Quercetina (20 0 mg/kg). Long. mucosa Area PAS+ Area Azul Al eian+ examinada/rata (1JIIl� ) * (1JIIl' .) * (rrm) Control 1 1.82±0.3 278. 78±31. 50 28. 52!-,." Corlt ro 1 2 1.68±0.4 316.84±16.9 40.99±3.8 (a) (b) Carbenoxolona 80 1.79±O.9 518.05±57.5 41.36 ±7.7 ·120 min (c)(e) (b)(cj) Quercetina 200 1.76±0.9 467. 85±29. 4 49.76±5.0 :20 mi n (e)(d) (bJ(d) � Cada valor representa el área PAS+ o Azul Alei án+, �m2, para 10 �m de superficie mueosal examinada (a) no s i gn i f i cat i vo respecto al grupo Contr-ol 1 (b) p<O.05 respecto al grupo Control (e) p<O.01 respecto al grupo Contro l (d) no significativo respecto al grupo Control 2 ('e) p<O.05 respecto al grupo Control 2 488 

Estudio histomorfométrico e histoquímico de las modificaciones inducidas por quercetina sobre mucosa gástrica de rata en un modelo de ulceración provocado por etanol absoluto

Martín, M. J.

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Estudio histomorfométrico e histoquímico de las modificaciones inducidas por quercetina sobre mucosa gástrica de rata en un modelo de ulceración provocado por etanol absoluto

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