As metaloproteinases de matriz (MMPs) compreendem uma família de aproximadamente 20 enzimasproteolíticas com papel essencial na remodelação e reparo tecidual. A metaloproteinase de matriz MMP-9 é uma das MMPs mais abundantes em diversas doenças pulmonares, incluindo a doença pulmonarobstrutiva crônica (DPOC). Foi descrito um polimorfismo na região promotora do gene da MMP-9, -1562C/T, sendo o alelo T associado com níveis de expressão mais altos do que o alelo C. O presenteestudo teve por objetivo investigar a associação entre o polimorfismo -1562C/T da MMP-9 e o desenvolvimentoda DPOC. Foram estudados 89 pacientes com DPOC e 96 indivíduos normais. O polimorfismofoi analisado por PCR seguido da clivagem com a enzima de restrição SphI. A freqüência do alelo T foide 9,0% no grupo de pacientes e 8,3% no grupo controle, não sendo observada diferença estatisticamentesignificativa entre os dois grupos (p=0,82). Estes resultados sugerem que o polimorfismo -1562C/T não éum fator de risco genético para o desenvolvimento de DPOC na amostra estudada.Palavras-chave: doença pulmonar obstrutiva crônica; metaloproteinases de matriz; polimorfismo genético;fator de risc

Basso da Silva, Luciano

Nicoli Silvello, Daiane

Schirmer, Helena

Simon, Daniel

Zimermann Teixeira, Paulo José

Portuguese

Universidade Luterana do Brasil: Periódicos ULBRA

49Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
Polimorfismo genético da metaloproteinase de
matriz MMP-9 e doença pulmonar obstrutiva crônica
DAIANE NICOLI SILVELLO1
HELENA SCHIRMER2
PAULO JOSÉ ZIMERMANN TEIXEIRA3
LUCIANO BASSO DA SILVA4
DANIEL SIMON5
RESUMO
As metaloproteinases de matriz (MMPs) compreendem uma família de aproximadamente 20 enzimas
proteolíticas com papel essencial na remodelação e reparo tecidual. A metaloproteinase de matriz MMP-
9 é uma das MMPs mais abundantes em diversas doenças pulmonares, incluindo a doença pulmonar
obstrutiva crônica (DPOC). Foi descrito um polimorfismo na região promotora do gene da MMP-9, -
1562C/T, sendo o alelo T associado com níveis de expressão mais altos do que o alelo C. O presente
estudo teve por objetivo investigar a associação entre o polimorfismo -1562C/T da MMP-9 e o desenvol-
vimento da DPOC. Foram estudados 89 pacientes com DPOC e 96 indivíduos normais. O polimorfismo
foi analisado por PCR seguido da clivagem com a enzima de restrição SphI. A freqüência do alelo T foi
de 9,0% no grupo de pacientes e 8,3% no grupo controle, não sendo observada diferença estatisticamente
significativa entre os dois grupos (p=0,82). Estes resultados sugerem que o polimorfismo -1562C/T não é
um fator de risco genético para o desenvolvimento de DPOC na amostra estudada.
1Acadêmica do Curso de Biologia/ULBRA – Bolsista
PROICT/ULBRA
2Aluna do Programa de Pós-Graduação em Diagnóstico
Genético e Molecular/ULBRA e Professora do Curso de
Biomedicina/FEEVALE
3Professor do Curso de Fisioterapia/FEEVALE
4Professor do Curso de Biologia/FEEVALE
5Professor - Orientador do Curso de Biologia/ULBRA e do
Programa de Pós-Graduação em Diagnóstico Genético e
Molecular/ULBRA (daniel.simon@ulbra.br)
50 Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
Palavras-chave: doença pulmonar obstrutiva crônica; metaloproteinases de matriz; polimorfismo ge-
nético; fator de risco
ABSTRACT
The matrix metalloproteinases (MMPs) comprised a family of over 20 proteolytic enzymes which plays
an essential role in the tissue remodeling and repair. The MMP-9 (gelatinase B) is an MMP that is present
in low quantities in the healthy adult lung, but much more abundant in several lung diseases, including
chronic obstructive pulmonary disease (COPD), participating of the tissue remodeling and the inflammatory
response. A polymorphism in the MMP-9 promoter region was described, –1562C/T, being that carriers
of the T allele have higher MMP-9 transcriptional activity than carriers of the C allele. The aim of the
present study was to study the association between the -1562C/T polymorphism and the development of
COPD. We studied 185 Brazilian Caucasian subjects, of which 89 had COPD and 96 were normal non-
smokers (control group). The polymorphism was analyzed by PCR followed by restriction digestion with
SphI. The frequency of the T allele was 9.0% in the COPD group and 8.3% in the control group. This
difference was not statistically significant (p=0.82). These results suggest that the MMP-9 polymorphism
does not act as a genetic factor for the development of COPD in the Brazilian Caucasian sample studied.
Key words: chronic obstructive pulmonary disease; matrix metalloproteinase; genetic polymorphism;
risk factor
SADFORS, 2002). As metaloproteinases de matriz
(MMPs) compreendem uma família funcional e es-
trutural de aproximadamente 20 enzimas
proteolíticas com papel essencial na remodelação e
reparo tecidual. A metaloproteinase de matriz MMP-
9 (gelatinase B) é uma das MMPs mais abundantes
em diversas doenças pulmonares, incluindo DPOC,
participando do remodelamento tecidual e da res-
posta inflamatória.
Alteração da expressão das MMPs pela fuma-
ça do cigarro, direta ou  indiretamente, podem
conduzir a destruição pulmonar, característica da
DPOC, sobretudo com enfisema pulmonar. Ní-
veis aumentados de MMP-9 foram encontrados
em pacientes com DPOC (ATKINSON &
SENIOR, 2003). Foi descrito um polimorfismo na
INTRODUÇÃO
A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC)
é caracterizada por uma obstrução progressiva e
irreversível das vias respiratórias, destruição do
parênquima pulmonar e perda da elasticidade do
pulmão (PETER & BARNES, 2000). A DPOC é
uma das principais causas de mortalidade e
morbilidade no mundo, com enorme impacto só-
cio-econômico, sendo o resultado de uma interação
complexa entre fatores genéticos e ambientais. O
principal fator ambiental é o hábito crônico de fu-
mar, e, portanto, evitável. Entre os componentes ge-
néticos a deficiência de alfa-1-antitripsina é o úni-
co fator de risco bem estabelecido, indicando a im-
portância do sistema proteases-antiproteases no de-
senvolvimento da DPOC (FOSS, PERE &
51Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
região promotora do gene da MMP-9, -1562C/T,
sendo o alelo T associado com altos níveis de
expressão de MMP-9 (ZHANG et al., 1999). Este
polimorfismo foi associado com o desenvolvimen-
to de enfisema pulmonar em fumantes japoneses
(MINEMATSU et al., 2001).
O presente trabalho teve por objetivo estudar
a associação do polimorfismo -1562C/T do gene
da MMP-9 com a doença pulmonar obstrutiva crô-
nica. Desta forma, foram estabelecidas as
metodologias para genotipagem do polimorfismo
-1562C/T e determinadas as freqüências alélicas
e genotípicas deste polimorfismo em uma amos-
tra de indivíduos normais e pacientes com DPOC
da população brasileira.
MATERIAL E MÉTODOS
Indivíduos Estudados
Foram estudados 89 pacientes com doença pul-
monar obstrutiva crônica (DPOC) provenientes
do projeto “Programa de Reabilitação Pulmonar”
do Centro Universitário FEEVALE e 96 indivídu-
os normais, não fumantes, doadores do banco de
sangue, que constituíram o grupo controle. Os gru-
pos foram pareados por sexo e idade. O projeto foi
aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da
FEEVALE e consentimento informado foi obtido
de todos os indivíduos participantes do estudo.
Extração de DNA
DNA de alto peso molecular foi extraído dos
pacientes com DOPC a partir de esfregaço de
mucosa bucal utilizando o método descrito por
BOOM et al. (1990). O DNA do grupo contro-
le foi extraído a partir de sangue total utilizan-
do o método descrito por LAHIRI &
NURNBERGER (1991).
Determinação dos Genótipos
O polimorfismo -1562C/T foi genotipado atra-
vés da amplificação das amostras pela reação em
cadeia da polimerase seguida de clivagem com
enzima de restrição SphI, metodologia conheci-
da como PCR-RFLP. As condições de amplifi-
cação e primers foram descritos por MORGAN
et al. (2003). O fragmento amplificado possui
436 pares de bases (pb), e quando o alelo T está
presente a clivagem gera fragmentos de 242 pb
e 194 pb.
Análise dos Produtos
Amplificados
Após a clivagem os fragmentos foram anali-
sados por eletroforese em gel de poliacrilamida
10%. O tamanho dos fragmentos foi analisado
e estimado por comparação com a migração das
bandas de DNA do marcador de peso molecular
50 pb.
Análise Estatística
As freqüências alélicas foram determinadas
através da contagem direta dos alelos. As fre-
qüências genotípicas foram testadas quanto ao
equilíbrio de Hardy-Weinberg através do teste
de qui-quadrado.
52 Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
RESULTADOS E
DISCUSSÃO
No presente trabalho foram determinadas
as freqüências alélicas do polimorfismo –
1562C/T do gene MMP-9 em uma amostra de
indivíduos caucasóides do sul do Brasil. Fo-
ram estudados 89 indivíduos do grupo de pa-
cientes com DPOC e 96 indivíduos do grupo
controle. A freqüência do alelo T no grupo
de pacientes foi de 9,0% e no grupo controle
foi de 8,3% (Tabela 1). Esta diferença não foi
estatisticamente significativa (p=0,82). Des-
ta forma, os resultados não indicam a exis-
tência de associação entre o polimorfismo e a
doença. As freqüências observadas estão em
equilíbrio de Hardy-Weinberg em todos os
subgrupos estudados.
Pacientes* Controles
C 162 (91,0) 176 (91,7)
Alelos T 16 (9,0) 16 (8,3)
CC 74 (83,1) 80 (83,3)
Genótipos CT 14 (15,8) 16 (16,7)
TT 1 (1,1) -
Tabela 1 - Freqüências alélicas e genotípicas do polimorfismo -1562C/T do gene da MMP-9 no grupo de
pacientes (n=89) e grupo controle (n=96).
*Valores entre parênteses são porcentagens.
Os mecanismos que estão na base da doença
pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) e o desen-
volvimento da limitação respiratória ainda não
estão totalmente esclarecidos. Eles envolvem uma
série de fatores ambientais e genéticos que pro-
movem o recrutamento de células inflamatórias e
originam uma resposta alterada das células estru-
turais do pulmão, na qual se destaca o desequilíbrio
do balanço proteases-antiproteases. A MMP-9 está
presente em pequenas quantidades em um pul-
mão saudável de um adulto, mas apresenta sua
atividade aumentada em muitas doenças pulmo-
nares, incluindo asma, fibrose pulmonar e DPOC
(ATKINSON & SENIOR, 2003). A MMP-9 atua
na remodelação, resposta inflamatória e desenvol-
vimento de enfisema pulmonar.
O efeito do polimorfismo –1562C/T na popula-
ção pode ser modulado por fatores ambientais como
hábito crônico de fumar, ou fatores genéticos tais
como etnicidade e o repertório genético. Poucos
estudos analisaram a influência do polimorfismo
genético –1562C/T e o desenvolvimento de DPOC
e apresentaram resultados controversos. A maior
parte destes estudos foi realizada em populações ori-
entais, ressaltando a importância de estudos em
populações caucasóides. MINEMATSU et al. (2001)
e ZHOU et al. (2004) observaram que o alelo T do
polimorfismo aumenta o risco de desenvolvimento
de DPOC em japoneses e chineses, respectivamen-
te. O alelo T, associado com o desenvolvimento de
DPOC, foi associado com maior atividade
transcricional do gene da MMP-9 (ZHANG et al.,
53Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
1999). Por outro lado, ITO et al. (2005) não encon-
traram diferença significativa na freqüência deste
polimorfismo entre o grupo de pacientes e o grupo
controle em uma amostra da população japonesa.
Contudo, estes autores observação associação en-
tre o polimorfismo e a ocorrência de enfisema pul-
monar superior nos pacientes com DPOC (ITO et
al., 2005). JOOS et al. (2002) realizaram estudo de
associação, em indivíduos fumantes caucasóides
americanos, entre a taxa de declínio da função pul-
monar e polimorfismos em três genes das MMPs.
Não foi encontrada diferença significativa na fre-
qüência do polimorfismo –1562C/T entre pacientes
que apresentaram declínio rápido ou lento da fun-
ção pulmonar. Contudo estes autores observaram
que polimorfismos nos genes da MMP-1 e MMP-12
apresentaram associação com o declínio da função
pulmonar.
Com relação a interpretação de nossos da-
dos, algumas limitações devem ser considera-
das. Em primeiro lugar, deve ser destacado que
o poder estatístico para detectar diferenças no
presente estudo pode ser limitado devido ao
número relativamente pequeno de indivíduos
estudados. Contudo, o tamanho amostral é se-
melhante ao analisado em outros trabalhos da
literatura que observaram associação
(MINEMATSU et al., 2001; ITO et al., 2005).
Em segundo lugar, tendo em vista que a doença
é desenvolvida somente em cerca de 15% dos
fumantes, um grupo controle constituído de in-
divíduos fumantes que não desenvolveram a
doença poderia ser mais adequado. Por outro
lado, diversos estudos comparando pacientes
com  DPOC e indivíduos não fumantes foram
relatados na literatura (por exemplo,
MINEMATSU et al., 2001; GASPAR et al.,
2004). Além disso, não se espera que fumantes
apresentem freqüências alélicas diferentes dos
não fumantes na população.
Em conclusão, os resultados do nosso estudo
indicam que o polimorfismo –1562C/T do gene
da MMP-9 não tem impacto significativo no ris-
co de desenvolver DPOC na amostra caucasóide
estudada.
REFERÊNCIAS
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metalloproteinase-9 in lung remodeling.
American Journal of Respiratory Cell and
Molecular Biology, v.28, p.12-24, 2003.
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for purification of nucleic acids. Journal of
Clinical Microbiology, v.28, p.495-503, 1990.
FOOS, L.; PERE, P. D.; SADFORS, A. F.
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pulmonary disease. Swiss Medicine Weekly,
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GASPAR, P. et al. CYP 1A1, CYP 2E1,
GSTM1, GSTT1, GSTP1, and TP53
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to chronic obstructive pulmonary disease and
non-small-cell lung cancer? Genetic and
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promoter polymorphism associated with upper
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JOOS, L. et al. The role of matrix
metalloproteinase polymorphisms in the rate
54 Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005
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Molecular Genetics, v.11, p.569-576, 2002.
Erratum in: Human Molecular Genetics,
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LAHIRI, D. K.; NURNBERGER, J. I. Jr. A rapid
non-enzymatic method for the preparation of
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in regulatory region of gelatinase B gene in
relation to severity of coronary atherosclerosis.
Circulation, v.99, p.1788-1794, 1999.
ZHOU, M. et al. Genetic polymorphism in matrix
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population of south China. Chinese Medical
Journal, v.117, p.1481-1484, 2004


Polimorfismo genético da metaloproteinase de matriz MMP-9 e doença pulmonar obstrutiva crônica

49Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005Polimorfismo genético da metaloproteinase dematriz MMP-9 e doença pulmonar obstrutiva crônicaDAIANE NICOLI SILVELLO1HELENA SCHIRMER2PAULO JOSÉ ZIMERMANN TEIXEIRA3LUCIANO BASSO DA SILVA4DANIEL SIMON5RESUMOAs metaloproteinases de matriz (MMPs) compreendem uma família de aproximadamente 20 enzimasproteolíticas com papel essencial na remodelação e reparo tecidual. A metaloproteinase de matriz MMP-9 é uma das MMPs mais abundantes em diversas doenças pulmonares, incluindo a doença pulmonarobstrutiva crônica (DPOC). Foi descrito um polimorfismo na região promotora do gene da MMP-9, -1562C/T, sendo o alelo T associado com níveis de expressão mais altos do que o alelo C. O presenteestudo teve por objetivo investigar a associação entre o polimorfismo -1562C/T da MMP-9 e o desenvol-vimento da DPOC. Foram estudados 89 pacientes com DPOC e 96 indivíduos normais. O polimorfismofoi analisado por PCR seguido da clivagem com a enzima de restrição SphI. A freqüência do alelo T foide 9,0% no grupo de pacientes e 8,3% no grupo controle, não sendo observada diferença estatisticamentesignificativa entre os dois grupos (p=0,82). Estes resultados sugerem que o polimorfismo -1562C/T não éum fator de risco genético para o desenvolvimento de DPOC na amostra estudada.1Acadêmica do Curso de Biologia/ULBRA – BolsistaPROICT/ULBRA2Aluna do Programa de Pós-Graduação em DiagnósticoGenético e Molecular/ULBRA e Professora do Curso deBiomedicina/FEEVALE3Professor do Curso de Fisioterapia/FEEVALE4Professor do Curso de Biologia/FEEVALE5Professor - Orientador do Curso de Biologia/ULBRA e doPrograma de Pós-Graduação em Diagnóstico Genético eMolecular/ULBRA (daniel.simon@ulbra.br)50 Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005Palavras-chave: doença pulmonar obstrutiva crônica; metaloproteinases de matriz; polimorfismo ge-nético; fator de riscoABSTRACTThe matrix metalloproteinases (MMPs) comprised a family of over 20 proteolytic enzymes which playsan essential role in the tissue remodeling and repair. The MMP-9 (gelatinase B) is an MMP that is presentin low quantities in the healthy adult lung, but much more abundant in several lung diseases, includingchronic obstructive pulmonary disease (COPD), participating of the tissue remodeling and the inflammatoryresponse. A polymorphism in the MMP-9 promoter region was described, –1562C/T, being that carriersof the T allele have higher MMP-9 transcriptional activity than carriers of the C allele. The aim of thepresent study was to study the association between the -1562C/T polymorphism and the development ofCOPD. We studied 185 Brazilian Caucasian subjects, of which 89 had COPD and 96 were normal non-smokers (control group). The polymorphism was analyzed by PCR followed by restriction digestion withSphI. The frequency of the T allele was 9.0% in the COPD group and 8.3% in the control group. Thisdifference was not statistically significant (p=0.82). These results suggest that the MMP-9 polymorphismdoes not act as a genetic factor for the development of COPD in the Brazilian Caucasian sample studied.Key words: chronic obstructive pulmonary disease; matrix metalloproteinase; genetic polymorphism;risk factorSADFORS, 2002). As metaloproteinases de matriz(MMPs) compreendem uma família funcional e es-trutural de aproximadamente 20 enzimasproteolíticas com papel essencial na remodelação ereparo tecidual. A metaloproteinase de matriz MMP-9 (gelatinase B) é uma das MMPs mais abundantesem diversas doenças pulmonares, incluindo DPOC,participando do remodelamento tecidual e da res-posta inflamatória.Alteração da expressão das MMPs pela fuma-ça do cigarro, direta ou  indiretamente, podemconduzir a destruição pulmonar, característica daDPOC, sobretudo com enfisema pulmonar. Ní-veis aumentados de MMP-9 foram encontradosem pacientes com DPOC (ATKINSON &SENIOR, 2003). Foi descrito um polimorfismo naINTRODUÇÃOA doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC)é caracterizada por uma obstrução progressiva eirreversível das vias respiratórias, destruição doparênquima pulmonar e perda da elasticidade dopulmão (PETER & BARNES, 2000). A DPOC éuma das principais causas de mortalidade emorbilidade no mundo, com enorme impacto só-cio-econômico, sendo o resultado de uma interaçãocomplexa entre fatores genéticos e ambientais. Oprincipal fator ambiental é o hábito crônico de fu-mar, e, portanto, evitável. Entre os componentes ge-néticos a deficiência de alfa-1-antitripsina é o úni-co fator de risco bem estabelecido, indicando a im-portância do sistema proteases-antiproteases no de-senvolvimento da DPOC (FOSS, PERE &51Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005região promotora do gene da MMP-9, -1562C/T,sendo o alelo T associado com altos níveis deexpressão de MMP-9 (ZHANG et al., 1999). Estepolimorfismo foi associado com o desenvolvimen-to de enfisema pulmonar em fumantes japoneses(MINEMATSU et al., 2001).O presente trabalho teve por objetivo estudara associação do polimorfismo -1562C/T do geneda MMP-9 com a doença pulmonar obstrutiva crô-nica. Desta forma, foram estabelecidas asmetodologias para genotipagem do polimorfismo-1562C/T e determinadas as freqüências alélicase genotípicas deste polimorfismo em uma amos-tra de indivíduos normais e pacientes com DPOCda população brasileira.MATERIAL E MÉTODOSIndivíduos EstudadosForam estudados 89 pacientes com doença pul-monar obstrutiva crônica (DPOC) provenientesdo projeto “Programa de Reabilitação Pulmonar”do Centro Universitário FEEVALE e 96 indivídu-os normais, não fumantes, doadores do banco desangue, que constituíram o grupo controle. Os gru-pos foram pareados por sexo e idade. O projeto foiaprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa daFEEVALE e consentimento informado foi obtidode todos os indivíduos participantes do estudo.Extração de DNADNA de alto peso molecular foi extraído dospacientes com DOPC a partir de esfregaço demucosa bucal utilizando o método descrito porBOOM et al. (1990). O DNA do grupo contro-le foi extraído a partir de sangue total utilizan-do o método descrito por LAHIRI &NURNBERGER (1991).Determinação dos GenótiposO polimorfismo -1562C/T foi genotipado atra-vés da amplificação das amostras pela reação emcadeia da polimerase seguida de clivagem comenzima de restrição SphI, metodologia conheci-da como PCR-RFLP. As condições de amplifi-cação e primers foram descritos por MORGANet al. (2003). O fragmento amplificado possui436 pares de bases (pb), e quando o alelo T estápresente a clivagem gera fragmentos de 242 pbe 194 pb.Análise dos ProdutosAmplificadosApós a clivagem os fragmentos foram anali-sados por eletroforese em gel de poliacrilamida10%. O tamanho dos fragmentos foi analisadoe estimado por comparação com a migração dasbandas de DNA do marcador de peso molecular50 pb.Análise EstatísticaAs freqüências alélicas foram determinadasatravés da contagem direta dos alelos. As fre-qüências genotípicas foram testadas quanto aoequilíbrio de Hardy-Weinberg através do testede qui-quadrado.52 Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 2005RESULTADOS EDISCUSSÃONo presente trabalho foram determinadasas freqüências alélicas do polimorfismo –1562C/T do gene MMP-9 em uma amostra deindivíduos caucasóides do sul do Brasil. Fo-ram estudados 89 indivíduos do grupo de pa-cientes com DPOC e 96 indivíduos do grupocontrole. A freqüência do alelo T no grupode pacientes foi de 9,0% e no grupo controlefoi de 8,3% (Tabela 1). Esta diferença não foiestatisticamente significativa (p=0,82). Des-ta forma, os resultados não indicam a exis-tência de associação entre o polimorfismo e adoença. As freqüências observadas estão emequilíbrio de Hardy-Weinberg em todos ossubgrupos estudados.Pacientes* ControlesC 162 (91,0) 176 (91,7)Alelos T 16 (9,0) 16 (8,3)CC 74 (83,1) 80 (83,3)Genótipos CT 14 (15,8) 16 (16,7)TT 1 (1,1) -Tabela 1 - Freqüências alélicas e genotípicas do polimorfismo -1562C/T do gene da MMP-9 no grupo depacientes (n=89) e grupo controle (n=96).*Valores entre parênteses são porcentagens.Os mecanismos que estão na base da doençapulmonar obstrutiva crônica (DPOC) e o desen-volvimento da limitação respiratória ainda nãoestão totalmente esclarecidos. Eles envolvem umasérie de fatores ambientais e genéticos que pro-movem o recrutamento de células inflamatórias eoriginam uma resposta alterada das células estru-turais do pulmão, na qual se destaca o desequilíbriodo balanço proteases-antiproteases. A MMP-9 estápresente em pequenas quantidades em um pul-mão saudável de um adulto, mas apresenta suaatividade aumentada em muitas doenças pulmo-nares, incluindo asma, fibrose pulmonar e DPOC(ATKINSON & SENIOR, 2003). A MMP-9 atuana remodelação, resposta inflamatória e desenvol-vimento de enfisema pulmonar.O efeito do polimorfismo –1562C/T na popula-ção pode ser modulado por fatores ambientais comohábito crônico de fumar, ou fatores genéticos taiscomo etnicidade e o repertório genético. Poucosestudos analisaram a influência do polimorfismogenético –1562C/T e o desenvolvimento de DPOCe apresentaram resultados controversos. A maiorparte destes estudos foi realizada em populações ori-entais, ressaltando a importância de estudos empopulações caucasóides. MINEMATSU et al. (2001)e ZHOU et al. (2004) observaram que o alelo T dopolimorfismo aumenta o risco de desenvolvimentode DPOC em japoneses e chineses, respectivamen-te. O alelo T, associado com o desenvolvimento deDPOC, foi associado com maior atividadetranscricional do gene da MMP-9 (ZHANG et al.,53Revista de Iniciação Científica da ULBRA - 20051999). Por outro lado, ITO et al. (2005) não encon-traram diferença significativa na freqüência destepolimorfismo entre o grupo de pacientes e o grupocontrole em uma amostra da população japonesa.Contudo, estes autores observação associação en-tre o polimorfismo e a ocorrência de enfisema pul-monar superior nos pacientes com DPOC (ITO etal., 2005). JOOS et al. (2002) realizaram estudo deassociação, em indivíduos fumantes caucasóidesamericanos, entre a taxa de declínio da função pul-monar e polimorfismos em três genes das MMPs.Não foi encontrada diferença significativa na fre-qüência do polimorfismo –1562C/T entre pacientesque apresentaram declínio rápido ou lento da fun-ção pulmonar. Contudo estes autores observaramque polimorfismos nos genes da MMP-1 e MMP-12apresentaram associação com o declínio da funçãopulmonar.Com relação a interpretação de nossos da-dos, algumas limitações devem ser considera-das. Em primeiro lugar, deve ser destacado queo poder estatístico para detectar diferenças nopresente estudo pode ser limitado devido aonúmero relativamente pequeno de indivíduosestudados. Contudo, o tamanho amostral é se-melhante ao analisado em outros trabalhos daliteratura que observaram associação(MINEMATSU et al., 2001; ITO et al., 2005).Em segundo lugar, tendo em vista que a doençaé desenvolvida somente em cerca de 15% dosfumantes, um grupo controle constituído de in-divíduos fumantes que não desenvolveram adoença poderia ser mais adequado. Por outrolado, diversos estudos comparando pacientescom  DPOC e indivíduos não fumantes foramrelatados na literatura (por exemplo,MINEMATSU et al., 2001; GASPAR et al.,2004). Além disso, não se espera que fumantesapresentem freqüências alélicas diferentes dosnão fumantes na população.Em conclusão, os resultados do nosso estudoindicam que o polimorfismo –1562C/T do geneda MMP-9 não tem impacto significativo no ris-co de desenvolver DPOC na amostra caucasóideestudada.REFERÊNCIASBIBLIOGRÁFICASATKINSON, J. J; SENIOR, R. M. 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Polimorfismo genético da metaloproteinase de matriz MMP-9 e doença pulmonar obstrutiva crônica

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