Prevalência de endocardite infecciosa por Coxiella burnetti em válvulas cardíacas humanas congeladas em um hospital de referência em Brasília

Abstract

oxiella burnetii é uma bactéria de morfologia cocobacilo, gram negativa,estritamente intracelular, do gênero Rickettsia causadora de zoonoses emmamíferos. Ela está envolvida na patogênese da febre Q e, na maioria das vezes,desencadeia um quadro agudo que tende a ser subclínico (60% dos casos) ouautolimitado. Sabe-se que a febre Q está associada a 5% das ocorrências destaafecção cardíaca, como também está entre as principais causadoras de endocarditecom cultura bacteriana negativa. O diagnóstico da endocardite passa por cultura desangue, excisão de tecido da válvula cardíaca ou dos êmbolos; PCR e sorologia.Para se confirmar o diagnóstico é necessário que haja a detecção microbiana porcultura ou PCR com um perfil sorológico correspondente e, ainda, ausência deindícios de infecção. O objetivo desse trabalho foi verificar a prevalência deendocardites por Coxiella burnetii dentre endocardites com culturas negativas emválvulas cardíacas humanas congeladas em um hospital de referência em Brasília.Foram selecionadas 50 amostras de valvas cardíacas humanas que se encontramcongeladas a 20º C negativos, acondicionadas em frascos individuais estéreis, noInstituto de Cardiologia do Distrito Federal- ICDF, as quais se utilizou metodologiacom princípios moleculares de detecção. O material genético foi extraído a partirde aproximadamente 100 mg de tecido originário de valvas cardíacas que foramcolocadas em tubos plásticos de 1,5 mL e macerados mecanicamente com pistilo devidro durante 2 minutos. O tampão de extração utilizado foi 10 mM Tris-HCl pH8,0, 1 mM EDTA pH 8,0 e 0,3% Triton X-100 sendo posteriormente usados fenol/clorofórmio/álcool isoamílico (25:24:1) no processo de extração do DNA. Emseguida, realizou-se nested-PCR com consequente amplificação do materialgenético. Foram analisadas dez amostras de válvulas cardíacas. A extração de DNAproduziu, em média, 40 ng/ul de DNA total. Esses DNA`s foram então diluídos eusados nas reações de nested-PCR. A primeira reação de PCR gerou um fragmentode tamanho esperado de 485 pb. Submetendo-se essas amostras ao segundo ciclode PCR obteve-se um fragmento de tamanho esperado de 260 pb. Das 10 amostrasde DNA testadas, 6 amostras de válvulas cardíacas foram identificadas comopositivas para a presença de DNA da bacteria Coxiella burnetti. As demais amostrasnão resultaram em amplificação, sendo consideradas como negativas quanto àpresença do DNA dessa bacteria. Em conclusão, a suspeita dos pesquisadores seconfirmou pelos resultados obtidos gerando esperança com a expectativa deresultados futuros nas demais amostras congeladas disponíveis (40). Devido aoatraso da entrega dos materiais por parte do UniCEUB, os autores darãocontinuidade às pesquisas por meio do PIC 2019/2020 aprovado com o título de “ENDOCARDITE INFECCIOSA POR COXIELLA BURNETTI EM VÁLVULAS CARDÍACASHUMANAS CONGELADAS EM UM HOSPITAL DE REFERÊNCIA EM BRASÍLIA APÓS SUADETECÇÃO: CONTINUAÇÃO DE UMA LINHA DE PESQUISA

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