Melaleuca alternifolia Cheel possui um óleo essencial em suas folhas, ramos e caule de grande importância medicinal com ação bactericida e antifúngica contra vários patógenos humanos. A técnica da micropropagação de é importante para atender à demanda de plantas medicinais com alto padrão genético e fitossanitário, mantendo um banco de germoplasma. Objetivou-se avaliar o efeito do ANA (Ácido 1-Naftaleno Acético) e do BAP (6-Benzilaminopurina) na multiplicação in vitro de Melaleuca (Melaleuca alternifolia Cheel) para produzir de forma massal atendendo à demanda industrial farmacêutica. Utilizou-se plantas já isoladas in vitro pertencentes ao laboratório. Testou-se cinco concentrações de ANA (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1) e cinco de BAP (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 mg.L-1), adicionadas em meio MS com 30 g.L-1 de sacarose, pH ajustado a 5,8 e solidificado com 2,5 g.L-1 de Phytagel. Os melhores resultados para comprimento de planta foram obtidos com ANA 1 mg.L-1 (2,16 cm) e nos tratamentos com BAP, a testemunha teve melhor desenvolvimento com média de 1,39 cm. O melhor desenvolvimento radicular, para testes com ANA, foi em 1,0 mg.L-1 com média de 5,16 raízes, sendo que a tendência foi diminuir os resultados com concentrações mais elevadas. A concentração de 1 mg.L-1 de ANA é recomendada para o enraizamento in vitro de melaleuca. A adição de 1,5 mg.L-1 de ANA inibe o desenvolvimento da plantas. A concentração de com 0,5 mg.L-1 de BAP favorece a emissão de gemas laterais
