金沢大学理学部"イニシャトリン"は、カイコガ前立腺から分泌されるセリン型エンドペプチターゼで、蛋白質のアルギニンのC側でポリペプチド鎖を切断する。リジン及びアルギニンのC側で切断する哺乳類膵臓由来のトリプシンは、作用の類似を利用して、イニシャトリンのモデルとして代換え出来る。イニシャトリンは、カイコガの無核精子のみならず、他の蛾の無核精子、そしてバッタの有核精子の運動性を獲得させる。また、カイコガ有核精子束を解離し、アルギニン・カルボキシペプチダーゼの前駆体を活性化する。それと共に、アルギニン分解カスケードを作動させ、精子にエネルギーを与える。この精製標品は、前立腺では30kDaで、少量の29と26kDaのも見出された。前立腺分泌液を含む精液で雌交尾襄内に構築される、精包由来精製イニシャトリンは29と26kDaであった。これらは、前立腺由来30kDa標品を免疫原とする抗体に基く、免疫学的解析によって確認された。イニシャトリンの極めて強い自己分解性を考え合わせると、前立腺では、まず30kDaイニシャトリンが分泌され、それが29kDaと26kDaに自己分解するように思われる。精包由来精製29kDaイニシャトリンは、無核精子賦活作用が弱いが、前立腺由来30kDaイニシャトリンは強く、N末20以外のアミノ酸配列がこの作用に関係する事を示唆する。その上、このイニシャトリンは、上記"イニシャトリン"としての条件を全て満足した。前立腺にイニシャトリンと共に存在するそのインヒビターは、約1万の分子量を待ち、耐熱性を有する。恐らく細胞保護のため、イニシャトリンと結合した状態で細胞内に存在し、分泌後、射精によって、イニシャトリン分子から離れ、活性化させると思われる。イニシャトリンを貯精襄液内精子と共に雌交尾襄内へ注入すると、卵を受精せしめる事が出来た。イニシャトリンは単なるエンドペプチダ-ではなくて、受精に不可欠の因子である。Initiatorin, an endopeptidase localized in the glandula (g.) prostatica of the silkmoth, Bombyx mori, triggers the arginine degradation cascade, a specific energy-yielding system for spermatozoa. This protease activates the precursor of arginine carboxy-peptidase which acts at the second step of the arginine degradation cascade by producing free arginine from the Arg-peptide splitted by initiatorin from a substrate protein. This multi-functional enzyme also initiates the dissociation of eusperm bundles and motility of apyrene sperm. The secreting feature from cells of the g. prostatica to its lumen was immunohistologically observed with antiserum which had been prepared from a purified initiatorin preparation. Initiatorin was isolated from the two organs, the g. prostatica and spermatophore, separately. In the former purification procedures hydrophobic interaction chromatography and cation exchange chromatography were applied, whereas affinity chromatography on p-aminobenz- amidine was in the latter. These obtained initiatorins were assigned by their N_-bezoylarginine ethyl ester-hydrolysing activity and also immunoblot after development of SDS-acrylamide gel-electrophoresis. Two types of initiatorins of molecular weights of 29 and 26kDa were isolated from the spermatophore, while three types of 30, 29 and 26kDa were from the g. prostatica. Ten N-terminal amino acid sequence of these initiatorins were identical. Prostatic 30kDa-initiatorin showed the strong induction of apyrene motility, but spermatophore 29kDa initiatorin did weak induction. 30kDa initiatorin satisfied the other three conditions as the multi-functional enzyme. Considered with highly strong self-degradation of initiatorin, 30kDa initiatorin produced in the cells of the g. prostatica must degrade to other initiatorins with smaller molecular weights in the g. prostatica and also in the sprmatophore. The initiatorin inhibitor localized in the g. prostatica seems to have an effect to protect cells to avoid the attack from this drastic protease. After unbinded from this inhibitor on ejaculation, initiatorin apparently "activated" causes many various reactions for sperm maturation. Fertilized eggs were laid, when a mixture of initiatorin and the content of the vesicula seminalis containing eusperm bundles and apyrene sperm was injected to the bursa copulatrix of virgin female moths instead of the spermatophore. Therefore, initiatorin is the indispensable factor for sperm maturation which causes the exact fertilization and fecundity.研究課題/領域番号:07640899, 研究期間(年度):1995 – 1996出典:研究課題「イニシヤトリンとそのインヒビターによる精子運動制御機構の解明」課題番号07640899(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所)) (https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-07640899/076408991996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作