采用捕捉法ElISA，研究64例风湿性心脏病患者的Igg和IgA-补体双特异性免疫复合物（Igg/C3-TCIC和IgA/C3-TCIC）。结果发现，二者的阳性率均为62.5%，与性别、年龄、病程、rf、补体均无明显关系，而与血清Ig有一定关系；Igg/C3-TCIC的阳性率还与风湿活动和反映风湿活动的指标有关。江西省自然科学基

万承爱

万雅各

张丽英

彭宣宪

李思光

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风湿性心脏病 IgG和 Ig A-补体双特异性免疫复合物的研究*李思光 1　万雅各 2　彭宣宪 3　万承爱 4　张丽英 3　　提　要　采用捕捉法 ELISA,研究 64例风湿性心脏病患者的 IgG和 Ig A-补体双特异性免疫复合物 ( Ig G /C3-TCIC和 IgA /C3-TCIC)。结果发现 ,二者的阳性率均为 62. 5% ,与性别、年龄、病程、 RF、补体均无明显关系 ,而与血清 Ig有一定关系 ; Ig G / C3-TCIC的阳性率还与风湿活动和反映风湿活动的指标有关。关键词　风湿性心脏病　免疫复合物　免疫球蛋白　补体　风湿活动　　目前 ,对风湿热的确切发病机理和慢性心瓣膜病反复发生风湿活动的原因尚不清楚。 一般认为与变态反应有关。 因此 ,从免疫学角度研究风湿性心脏病 (风心病 )具有重要意义。 先后有学者报道 ,风心病患者的多项免疫指标异常 [1～ 3]。我们亦发现 IgM /C3双特异性循环免疫复合物 ( tw o-component-determined circula t-ing imm une complexes, TCIC)与风湿活动有关 [4]。本文进一步探讨此类患者的 Ig G / C3-TCIC 和 IgA /C3-TCIC。1　材料和方法1. 1　实验材料　 ( 1)羊 IgG抗人 C3:羊抗人 C3抗血清(卫生部上海生物制品研究所 ) ,单扩效价: 1∶ 60。经硫铵盐析 -DEAE-32层析提取 IgG组分。 ( 2) HRP-羊 IgG抗人 Ig G和 Ig A:采用简易过碘酸钠法将 HRP(辣根过氧化物酶 , Sigma)标记到羊抗人 IgG (γ链特异性 )和Ig A(α链特异性 )的纯化 IgG组分上。 ( 3)羊抗人 IgM、IgG、 Ig A、 C3、 C4和 C5抗血清:卫生部上海生物制品研究所产品。 ( 4)抗链球菌溶血素“ O”测定盒:上海市医学化验所产品。 ( 5) C反应蛋白 ( CRP)检测试剂盒:上海市医学化验所产品。 ( 6)类风湿因子 ( RF )检测试剂盒:中国科学院上海细胞生物研究所产品。1. 2　实验对象　 ( 1)风心病患者 64例 ,经临床病史、体征、 X线胸片、心电图、心功能和超声心动图等项检查确诊。根据病情资料 ,参照 Jones标准综合分析 ,其中风湿活动 37例 ,非风湿活动 27例。 排除服用激素等免疫抑制药物及同时患有其它急、慢性感染性疾病。来源与文献 [4]一致。 ( 2)健康人 335例 ,用于确定正常标准 ,诊断及来源同文献 [4]。1. 3　检测方法　 ( 1)检测 IgG和 Ig A /C3-TCIC的捕捉* 江西省自然科学基金资助课题1.南昌大学生物工程研究所 (南昌 330047)2.南昌大学医院3.厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室4.江西省南昌市第一人民医院法 -ELISA操作过程 :参照文献 [5, 6]进行。 以抗人 C3的羊 IgG为捕捉抗体捕捉待检血清 CIC中的 C3 ,再以HRP-抗人 IgG和 Ig A为检测抗体与 CIC中的 Ig G或Ig A结合来显示。 ( 2)抗“ O”、 CRP和 RF测定: 按各自试剂盒说明书进行。 ( 3)血清 IgM、 IgG、 IgA、 C3、 C4和C5的测定: 采用琼脂单向扩散法进行。2　结果2. 1　 IgG和 Ig A /C3-TCIC的阳性临界值　按本捕捉法操作步骤 ,测定 335例健康人血清标本。 采用文献 [7]法确定正常值 ,以 X+ 2SD为阳性临界值 ,表 1示其值。表 1　 IgG和 Ig A /C3-TCIC的阳性临界值年龄 (岁 ) 例数 IgG /C3 -TCIC Ig A /C3-T CIC1～ 78 0. 68 0. 5215～ 70 0. 77 男 0. 65女 0. 5930～ 64 0. 77 男 0. 74女 0. 6840～ 67 0. 70 男 0. 75女 0. 6050～ 58 0. 62 0. 542. 2　风心病患者的 IgG和 IgA /C3-TCIC阳性率　 64例患者中 , IgG和 Ig A /C3-TCIC阳性数均为 40例 ,阳性率均为 62. 5% ,相互间无差异。2. 3　风心病患者的 IgG和 IgA /C3-TCIC阳性率与性别、年龄和病程的关系　统计学分析表明 ,风心病患者的 IgG和 Ig A /C3-TCIC阳性率与性别、年龄和病程无明显关系。2. 4　风心病患者的 IgG和 IgA /C3-TCIC阳性率与风湿活动的关系　 64例患者中 ,不伴有风湿活动组 27例 ,伴有风湿活动组 37例 ,前者的 Ig G和 IgA /C3-TCIC阳性率分别为 48. 1%和 55. 6% ,后者的阳性率分别为 73. 0%和 67. 6%。 χ2检验表明 , IgG /C3-TCIC阳性率与风湿活动有关 ,而 Ig A /C3-TCIC阳性率与风湿活动无明显关系 ,见表 2。134 中国公共卫生学报 1997年第 16卷第 3期表 2　风湿活动与 Ig G和 Ig A /C3-T CIC阳性率例数Ig G /C3-TC IC阳性数 阳性率 (% )Ig A /C3-T CIC阳性数 阳性率 (% )不伴有风湿活动组 27 13 48. 1 15 55. 6伴有风湿活动组 37 27 73. 0* 25 67. 6　* P < 0. 05表 3　抗“ O”与 Ig G和 Ig A/C3 -TCIC的阳性率抗“ O” 例数IgG /C3 -TCIC阳性数 阳性率 (% )Ig A /C3-TC IC阳性数 阳性率 (% )+ 24 19 79. 2 16 66. 7- 30 16 53. 3* 18 60. 0　* P < 0. 05表 4　 CRP与 Ig G和 Ig A /C3-TCIC的阳性率CRP 例数Ig G /C3-TCIC阳性数 阳性率 (% )Ig A /C3 -TCIC阳性数 阳性率 (% )+ 28 23 82. 1 19 67. 9- 26 12 46. 2* 15 57. 7　* P< 0. 012. 5　风心病患者的 IgG和 Ig A /C3-TCIC阳性率与抗“ O”和 CRP的关系　在 54例检测了抗“ O”和 CRP的患者中 , IgG /C3-TCIC的阳性率在抗 “ O”和 CRP阳性组均分别高于其对应的阴性组 ,差异显著 ,见表 3、表 4。表 5　 Ig与 Ig G和 Ig A /C3-TCIC的阳性率Ig 含量 例数Ig G /C3-TC IC阳性数 阳性率 (% )Ig A /C3-T CIC阳性数 阳性率 (% )IgM 升高 17 14 82. 4 11 64. 7非升高 43 23 53. 4* 29 67. 4Ig G 升高 30 20 66. 7 24 80. 0非升高 30 17 56. 7 16 53. 5*Ig A 升高 35 16 45. 7 25 71. 4非升高 25 21 84. 0* * 15 60. 0　* < 0. 05　　* * P < 0. 012. 6　风心病患者的 IgG和 Ig A / C3-TCIC阳性率与 Ig、补体和 RF的关系　血清 IgM、 IgG和 IgA与 IgG和Ig A /C3-TCIC的阳性率见表 5。 从表 5可见 , IgG /C3-TCIC在 IgM和 Ig A的升高组与非升高组之间以及Ig A /C3-TCIC在 IgG的升高组和非升高组之间分别有显著差异 ,余均无明显差异。血清补体和 RF与 Ig G和 Ig A /C3-TCIC之间均无明显关系。3　讨论本文结果表明 , IgG /C3-TCIC与 IgM /C3-TCIC相似 ,其阳性率与风湿活动和反映风湿活动的指标有关 ,而 Ig A /C3-TCIC的阳性率与之均无明显关系。 这三类TCIC是免疫复合物组成成分 -抗原、抗体和补体中机体方面二因素的组合 ,且补体的参与又是免疫复合物致病的前提 [8]。 故可以认为 , IgG /C3-TCIC升高是机体对风湿活动的反应 ,且其又参与风湿活动的过程。非特异性 CIC可作为判断风心病患者是否有潜在风湿活动的指标 [9]。 结合我们的结果 ,提示只有 IgM和 IgG类CIC具有这一意义 ,而 IgA类 CIC则无此作用 ,说明免疫复合物病理生理意义的 Ig类型决定性。本文发现 , Ig G /C3-TCIC的阳性率在 IgM升高组显著高于非升高组 ,而在 Ig A非升高组显著高于升高组 ; Ig A /C3-TCIC的阳性率则在 IgG升高组显著高于非升高组。 这些结果提示 ,血清 IgM升高之机 ,正是IgG类抗体明显发挥中和抗原能力之时 ;血清 IgG升高之机 ,正是 Ig A类抗体明显起中和抗原作用之时 ;而血清 IgA升高之机 ,则是 Ig G类抗体中和抗原能力显著降低之时。已知 IgM /C3-TCIC与血清 IgM、 IgG和 IgA均无明显关系 [4 ] ,且疾病患者血清 Ig升高大部分系非特异性反应的产物 [4, 10, 11]。相对产生较迟的非特异性反应产物无中和抗原的作用 ,而相对产生较早的特异性抗体具有中和抗原的能力 ,且部分作用较早 ,这可能是某些 IgM类 CIC具有早期诊断价值的机理。本文有关 RF的结果 ,提示本法不受 RF的影响 ,特异性较强。参 考 文 献1. Bh atia R, et al. Lymphocyte subsets in acu te rheumatic feverand rheumatic heart di seas e. Clin Cardiol 1989; 12: 34135中国公共卫生学报 1997年第 16卷第 3期驻粤部队新兵抗 -HCV的血清流行病学调查广州军区卫生防疫队 (广州 510500)　吴辉绪　席云珍　孙均明　彭志强　颜锦北　　目前 ,丙型肝炎病毒 ( HCV )在人群中的感染已引起国内外学者的广泛关注 ,但部队新兵的感染情况 ,文献报道较少。 为此 ,我们于 1995～ 1996年 ,对驻广东部队新兵的血清丙型肝炎病毒抗体 (抗 -HCV)进行检测和分析 ,现报道如下。调查对象和方法　 ( 1)调查对象: 为 1995年某特种部队 1099名新兵 , 1996年 5个单位的 1444名新兵 ,年龄 18～ 22岁 ,男 2362名 ,女性 181名 ,均为地方征兵体检合格 ,到达驻地 1个月内抽血检测。 ( 2)方法:①抗-HCV检测由军事医学科学院基础医学研究所提供第二代抗 -HCV ELISA试剂盒 ;② HBs Ag ELISA试剂盒由南京华东医学生物技术研究所生产 ;③ ALT检测采用赖氏法 ,≥ 30为异常。结果　 ( 1)新兵抗 -HCV检测结果 (附表 ): 2543名新兵的抗 -HCV阳性率为 0. 55% ( 14 /2543)。其中 1995年为 1. 09% ( 12 /1099)显著高于 1996年的 0. 14% ( 2 /1444) ( P < 0. 001) ; HBs Ag 阳性率为 0. 47% ( 12 /2543) ,未检出 HBV与 HCV重叠感染者 ,无 ALT异常者。以安徽籍新兵抗 -HCV阳性率最高。 ( 2)新兵文化程度、性别、城乡、既往献 (受 )血史对抗 -HCV的影响: 文化程度初中组抗 -HCV阳性率为 0. 75% ( 8 /1073) ,高中及高中以上组为 0. 47% ( 6 /1270) ,二者相关无显著性 ( P> 0. 05) ; 2362男性抗 -HCV阳性率为 0. 59% ( 14 /2362) ,与 181名女性 (未检出阳性 )无显著性差异 ( P>0. 05) ;农村新兵抗 -HCV阳性率 0. 79% ( 12 /1518)高于城市新兵 0. 20% ( 2 /1025) ( P < 0. 05);既往有献 (受 )血史的抗 -HCV阳性率为 6. 67% ( 1 /15) ,显著高于无献(受 )血史的 0. 07% ( 1 /1429) ( P < 0. 001)。讨论　调查结果表明: 2543名新兵血清抗 -HCV阳性率为 0. 55% ,与张长法的报道结果一致 [1] ,低于国内自然人群中 20～ 30岁年龄组检测结果 [2] ,显示新兵中存在 HCV感染 ,且在入伍前已感染。 不同年度入伍附表　新兵抗 -HCV的地区分布新兵来源 检测人数抗 -HCV　阳性数 阳性率 (% )安徽 170 5 2. 94河南 98 1 1. 02广东 340 3 0. 88山东 393 3 0. 76山西 207 1 0. 48江苏 207 1 0. 48广西 302 0 0. 00湖南 277 0 0. 00四川 113 0 0. 00湖北 251 0 0. 00海南 107 0 0. 00贵州合计78 0 0. 002543　 14 0. 55新兵抗 -HCV阳性率存在显著性差异 ,表明招兵质量不够稳定。抗 -HCV与献 (受 )血有关 ,与文献报道一致 [3 ]。由于 HCV存在隐性感染和携带者 ,且预后较差 ,传播途径多样 [4, 5]。但目前我军在应征青年入伍体检中 ,只作 HBsAg和 ALT来筛检病毒性肝炎 ,使一部分 HCV感染者被征入伍 ,加上部队的特殊工作生活环境 ,易造成 HCV流行 ,因此建议在征兵体检中增加抗 -HCV检测。参 考 文 献1.　张长法 ,等 . 434名 HBsAg阴性应招飞行员中的 HCV感染调查 .解放军预防医学杂志 1996; 14( 2): 1122.　石玉菇 ,等 .北京地区自然人群 HCV的感染状况和分布调查分析 .中国公共卫生 1996; 12( 5): 1993.　刘庆芬 ,等 .献血员抗 -HCV检测报告 .中华预防医学杂志1993; 27( 2): 1264.　 Tabor E et al丙型肝炎病毒的流行与结构 -HCV所致肝细胞癌会议概述 .国外医学流行病学传染病学分册 1992;19( 4): 1585.　梁争论 ,庄辉 .丙型肝炎传播途径的研究进展 .国外医学流行病学传染病学分册 1992; 19( 5): 197( 1996-07-29收稿 1996-12-30修回 张声闳编辑孟庆云校对 )2.　 Anastasiou M I, et al. 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风湿性心脏病IgG和IgA-补体双特异性免疫复合物的研究

http://dspace.xmu.edu.cn/bitstream/handle/2288/119353/%e9%a3%8e%e6%b9%bf%e6%80%a7%e5%bf%83%e8%84%8f%e7%97%85IgG%e5%92%8cIgA-%e8%a1%a5%e4%bd%93%e5%8f%8c%e7%89%b9%e5%bc%82%e6%80%a7%e5%85%8d%e7%96%ab%e5%a4%8d%e5%90%88%e7%89%a9%e7%9a%84....pdf?sequence=1&isAllowed=y

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