ETUDE DES REMANIEMENTS ÉPIGÉNÉTIQUES AU MOMENT DE L'EGA CHEZ LE BOVIN À L'AIDE D'APPROCHES CORRÉLATIVES EN MICROSCOPIE OPTIQUE

Abstract

International audienceLors du développement embryonnaire précoce, les génomes parentaux provenant respectivement du spermatozoïde et de l'ovocyte, sont fortement remaniés. Ces remaniements permettent une reprogrammation épigénétique de la chromatine et sont concomitants avec la mise en route de la transcription de l'embryon. Le projet vise à étudier l'impact de l'utilisation de semences de taureau ayant des profils de méthylation différents et un profil de sncRNA contrastés, sur cette reprogrammation épigénétique autour de l'activation majeure du génome embryonnaire (EGA) i.e. au stade 8-cellules. Pour cela nous avons privilégié la détection de modification post traductionnelle d'histone (H3K4me3 et H3K9me3) par immunofluorescence sur embryon in toto des stades 2-cellules à Morula. Nous avons à la fois utilisé un microscope confocal pour déterminer la localisation en 3D dans le noyau du signal de fluorescence et sur les mêmes embryons, un microscope photonique équipé d'un module Apotome pour estimer la quantité de fluorescence dans les noyaux. Ces deux approches complémentaires nous ont permis d'acquérir des données quantitatives et qualitatives pour la comparaison de la distribution de ces marques d'épigénétiques entre des taureaux ayant des profils de méthylation et de sncRNA spermatique contrastés