Pesquisa e avaliação de formação de biofilmes de Listeria monocytogenes, Salmonella spp. e Escherichia coli em ambiente de abatedouro frigorífico de suínos
Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2021.O objetivo deste estudo foi verificar a presença de Listeria monocytogenes,
Salmonella e Escherichia coli, bem como realizar antibiograma, detectar genes de
resistência antimicrobiana e virulência, e avaliar a capacidade de formação in vitro
de biofilmes dos isolados de ambientes, equipamentos e utensílios de abatedouros
frigoríficos de suínos localizados no Distrito Federal. Foram detectados 21 isolados
de Escherichia coli, 01 isolado de Salmonella Typhi e não houve detecção de
Listeria monocytogenes. A Salmonella Typhi foi isolada do piso da câmara de
resfriamento de carcaças, e apresentou multirresistência a antimicrobianos, sendo
eles o ácido nalidíxico, cefazolina, cloranfenicol, doxiciclina, estreptomicina,
gentamicina, tetraciclina e sulfonamida, também foram detectados os genes de
resistência tet(B), tet(C), tet(M) e ampC. Apresentou ainda capacidade moderada
de formação de biofilme a 37°C após incubação de 72h. Em relação aos 21
isolados de E. coli, o local com o maior número de detecções foi o piso da câmara
de resfriamento de carcaças, onde o microrganismo foi isolado em 3 (75%) das 4
coletas. Os isolados apresentaram resistência a 12 dos 13 antimicrobianos
testados, sendo que nenhum isolado apresentou sensibilidade ao cloranfenicol,
antimicrobiano de uso proibido na alimentação animal desde 2003 no Brasil. Houve
presença dos genes de resistência MCR-1, MCR-3, sul1, ampC, clmA, cat1, tet(A),
tet(B) e blaSHV, também foram detectados os genes de virulência stx-1, hlyA, eae,
tir α, tir β, tir γ e saa nos isolados de E. coli. No que se refere à capacidade de
formação de biofilme, verificou-se forte capacidade de formação de biofilmes em 5
(23,8%) dos isolados de E. coli e capacidade moderada em 15 (71,4%) isolados
deste mesmo microrganismo. Em relação às diferentes temperaturas, tempo de
incubação e seus locais de origem, o isolado oriundo da mesa de toalete do
abatedouro frigorífico apresentou a maior capacidade de formação de biofilme,
enquanto o oriundo da parede da câmara de resfriamento não formou biofilme em
nenhuma das condições tempo e temperatura verificados neste estudo. No geral,
os isolados apresentaram maior capacidade de formação de biofilmes a 10°C após
72h de incubação. A menor capacidade de formação de biofilmes foi verificada na
temperatura de 37°C após 24h de incubação. Visto que os isolados apresentaram
genes de resistência e virulência, multirresistência a antimicrobianos e capacidade
de formação de biofilmes, os resultados deste estudo sugerem risco à saúde de
pública devido a associação destes patógenos a doenças transmitidas por
alimentos, sendo pertinente ressaltar o risco de propagação de genes de
resistência no ambiente.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).The aim of this work was to verify the presence of Listeria monocytogenes,
Salmonella and Escherichia coli, as well as perform antibiogram, detect genes of
antimicrobial resistance and virulence, and evaluate the in vitro capacity of biofilm
formation of strains isolated from swine slaughterhouse environments, equipment
and utensils located at the Distrito Federal area, Brazil. Twenty-one strains of
Escherichia coli and one strain of Salmonella Typhi were detected, there was no
detection of Listeria monocytogenes. Salmonella Typhi was isolated from the cold
storage chamber floor and showed multiresistance to antimicrobials (nalidixic acid,
cefazolin, chloramphenicol, doxycycline, streptomycin, gentamicin, tetracycline and
sulfonamide), were also detected the resistance genes tet(B), tet(C), tet(M) and
ampC. The Salmonella strain showed a moderate capacity for biofilm formation at
37°C after 72h incubation. Regarding the 21 E. coli strains, the place with the
highest number of detections was the cold storage chamber floor, where the
microorganism was isolated in 3 (75%) of the 4 collected swab samples. The strains
were resistant to 12 of the 13 antimicrobials tested, none of the isolates were
sensitive to chloramphenicol, an antimicrobial that has been banned in animal feed
since 2003 in Brazil. The resistance genes MCR-1, MCR-3, sul1, ampC, clmA, cat1,
tet(A), tet(B), blaSHV, and the virulence genes stx-1, hlyA, eae, tir α, tir β, tir γ were
detected in E. coli strains. Concerning the capacity of biofilm formation, a strong
biofilm formation was found in 5 (23.8%) of the E. coli strains and a moderate
biofilm formation in 15 (71.4%) strains of this same microorganism. Regarding the
different temperatures, incubation period and their places of origin, the strain
isolated from the abattoir evisceration table had the greatest capacity to form a
biofilm, while the one from the cold storage chamber walls did not form biofilm
under any of the time vs. temperature conditions in this study. In general, the strains
showed higher capacity to form biofilms at 10°C after 72h incubation. The lowest
capacity for biofilm formation was verified at 37°C after 24h of incubation. Since the
strains presented resistance and virulence genes, multiresistance to antimicrobials
and the capacity to form biofilms, the results of this study suggest a risk to public
health due to the association of these pathogens with foodborne diseases, it is also
pertinent to emphasize the risk of spreading resistance genes in the environment
