Universidad de Panamá. Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y Tecnología
Abstract
To study the molecular epidemiology of Pseudomonas aeruginosa, 53 isolates from different anatomic areas from patients of the Complejo Metropolitano Armodio Arias Madrid de la Caja del Seguro Social, were obtained and analyzed. The isolates of P. aeruginosa were obtained during a period of 1 year and were phenotypically identified by biochemical analysis carried out with the API 20NE (Bio Merieux, Brussels, Belgium) and antibiotic sensitivity of the strains as well. Molecular diagnosis was performed using Multiplex-PCR of the pyoverdin receptor genes FPVA. This study showed low specificity of phenotypic tests in use since 39 isolates from a total of 53 could not be identified as P. aeruginosa by using the API 20E system, representing 74% of the strains tested. Differences in susceptibility to antibiotics were found compare to previous studies, especially major changes in the antimicrobial susceptibility profile of quinolones were observed. All isolates were identified with any of the pyoverdin receptor genes. The availability of sequences of the pyoverdin receptor fpvA genes of P. aeruginosa allowed us to standardize a rapid technique for the siderotyping of all the isolated strains. This is extremely important for strains that do not produce pyoverdin, which cannot be detected by conventional culture methods. Our study showed that this test has demonstrated to be specific and rapid, when it was compared with the API 20NE test and the conventional antimicrobial sensitivity tests. Para el estudio de la epidemiología molecular de Pseudomonas aeruginosa se obtuvieron 53 aislados de diferentes áreas anatómicas de pacientes del Complejo Metropolitano Harmodio Arias Madrid de la Caja del Seguro Social. Los aislados de P. aeruginosa fueron obtenidos durante un período de 1 año y fueron identificados fenotípicamente mediante el perfil bioquímico obtenido con la prueba de API 20NE (Bio Mérieux, Bruselas, Bélgica) y la sensibilidad de las cepas a antibióticos mediante un antibiograma que verificó la sensibilidad a estos. El diagnóstico molecular se realizó utilizando los genes de los receptores de pioverdina FpvA, los cuales fueron amplificados mediante la técnica de Multiplex-PCR. Los resultados en este estudio demostraron la baja sensibilidad de las pruebas fenotípicas ya que 39 aislados de un total de 53 pudieron ser identificados como P. aeruginosa por medio del sistema API 20E representando un 74% de las cepas analizadas. Igualmente mediante los antibiogramas se encontraron diferencias en la susceptibilidad a los agentes antimicrobianos y que reflejan cambios importantes en el perfil de susceptibilidad antimicrobiana a quinolonas. Todos los aislados fueron identificados con algunos de los genes de los receptores de pioverdina. La disponibilidad las secuencias de los receptores de pioverdina fpvA de P. aeruginosa han permitido estandarizar una técnica rápida para el siderotipaje de las cepas y sobre todo para cepas que no producen pioverdina y que por ende no pueden detectarse a través de métodos de cultivo convencionales. Esta técnica en este estudio ha demostrado su mayor especificidad y rapidez, en comparación con la prueba de API 20NE y el antibiograma. 
