Strain Trichosporon japonicum QU139 showed antimicrobial activity against several pathogenic fungi, and has good potential for being used in the development of a new antimicrobial agent. The objective of this work was to optimize the conditions for the production and detection of the antimicrobial compound produced by this strain. The antimicrobial effect was evaluated by the well method against sensitive cells of Cryptococcus gattii C20 in GYP and YM media at different pH values. GYP medium at pH 4.5 ± 0.5 and 24h of incubation, at 25ºC and 150 rpm, were defined as the best medium and cultivation conditions. The methodologies employed for the isolation and concentration of the antimicrobial compound were negative for antimicrobial activity, suggesting that it may not have a protein nature. The nature of the compound needs to be fully explored, and other methodologies, especially the ones for purification of glycolipids, must be employed in order to obtain a purified compound for biotechnological purposes.(Otimização das condições de cultivo para a produção de um composto antimicrobiano por Trichosporon japonicum QU139). A cepa Trichosporon japonicum QU139 mostrou atividade antimicrobiana contra vários fungos patogênicos, tendo um bom potencial para o desenvolvimento de um novo agente antimicrobiano. O objetivo do trabalho foi a otimização da produção e detecção do composto antimicrobiano. O efeito antimicrobiano foi avaliado pelo método de poços contra células sensíveis de Cryptococcus gattii C20 em meios GYP e YM em diferentes pH. O meio GYP, em pH 4.5 ± 0.5 e 24h de incubação a 25ºC e 150 rpm, foram definidos como o melhor meio e condições de cultivo. As metodologias empregadas para isolamento e concentração do composto antimicrobiano foram negativas para atividade antimicrobiana, sugerindo que ele possa não ter natureza protéica. A natureza do composto precisa ser mais bem explorada e outras metodologias, especialmente as utilizadas em purificação de glicolipídeos, devem ser empregadas para obter um composto purificado visando aplicações biotecnológicas
