The article describes the infection of ticks, common in Yekaterinburg and Sverdlovsk region, tick-borne encephalitis viruses, borrelia, anaplasm and ehrlichia.В статье рассмотрена инфицированность клещей, распространенных в Екатеринбурге и Свердловской области, вирусами клещевого энцефалита, боррелиями, анаплазмами и эрлихиями

Asnovskaya, A. G.

Boronina, L. G.

Асновская, А. Г.

Боронина, Л. Г.

Ural State Medical University Repository

5  МИКРОБИОЛОГИЯ, ЭПИДЕМИОЛОГИЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА УДК 616.9-022:595.42  Асновская А.Г., Боронина Л.Г. ВЫЯВЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИЙ, ПРЕДАВАЕМЫХ КЛЕЩАМИ, МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В ЕКАТЕРИНБУРГЕ И СВЕРДЛОВСКОЙ ОБЛАСТИ Кафедра клинической лабораторной диагностики и бактериологии Уральский государственный медицинский университет  Екатеринбург, Российская Федерация  Asnovskaya A.G., Boronina L.G. DETECTION OF AGENTS CAUSED INFECTIONS TRANSMITTED BY TICKS USING A POLYMERASE CHAIN REACTION IN YEKATERINBURG AND SVERDLOVSK REGION Department of clinical laboratory diagnostic and bacteriology Ural state medical university Yekaterinburg, Russian Federation  E-mail: asnovskaya@mail.ru  Аннотация. В статье рассмотрена инфицированность клещей, распространенных в Екатеринбурге и Свердловской области, вирусами клещевого энцефалита, боррелиями, анаплазмами и эрлихиями. Annotation. The article describes the infection of ticks, common in Yekaterinburg and Sverdlovsk region, tick-borne encephalitis viruses, borrelia, anaplasm and ehrlichia. Ключевые слова: анаплазмоз, эрлихиоз, клещи, инфекции. Key words: anaplasmosis, ehrlichiosis, ticks, infections.  Введение Распространение возбудителей эрлихиоза и анаплазмоза человека на территории России изучено не достаточно, в отличие от возбудителей клещевого энцефалита и Лайм-боррелиоза. Эрлихиозы человека – это остролихорадочные, природно-очаговые инфекционные заболевания человека и животных, передающиеся через иксодовых клещей [3]. Во многих районах Среднего Урала распространены клещи, изучение их инфицированности позволяет диагностировать инфекции, передаваемыми ими. Главное значение для человека представляют Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia muris и Anaplasma phagocytophilum. E. chaffeensis и E. muris поражают главным образом моноциты и мононуклеарные фагоциты у инфицированных людей и вызывают 6  моноцитарный эрлихиоз человека [4]. A. phagocytophilum поражают преимущественно зрелые нейтрофилы (гранулоциты) и вызывает гранулоцитарный анаплазмоз человека [1, 3, 5]. Центральным переносчиком E. chaffeensis является клещ Amblyomma americanum, на втором месте – Dermacentor variabilis. Также установлена зараженность эрлихиями Ixodes pacificus, Ixodes scapularis, Ixodes ricinus. Вид A. phagocytophilum наиболее широко распространен в пределах ареалов его переносчиков – клещей группы I. ricinus – perculcatus [2]. Цель исследования - изучить инфицированность клещей, распространенных в Екатеринбурге и Свердловской области, вирусами клещевого энцефалита, боррелиями, анаплазмами и эрлихиями. Материалы и методы исследования Исследованы клещи, полученные от больных, подвергшихся укусами клещей в эпидемических период 2016-2018 гг. в г. Екатеринбурге и пригороде. Исследовано в 2016 г. - 143, в 2017 г. - 684, в 2018 г. - 299 клещей, 171 образец крови и 2 образца спинномозговой жидкости (СМЖ) от больных с подозрением на инфекции, передаваемыми через клещей. Работу проводили в микробиологическом отделении лаборатории «Руслаб» ООО «УИЦЭ», выявляли РНК/ДНК возбудителей инфекционных заболеваний, переносчиками, которых являются иксодовые клещи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Применялся следующий набор реагентов - «АмплиСенс TBEV, B. burgdorferi sl, A. phagocytophilum, E. chaffeensis / E. muris-FL». Наборы предназначены для выявления РНК TBEV – вируса клещевого энцефалита (КЭ) (Tick-borne encephalitis virus), РНК Borrelia burgdorferi sl – возбудителя иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris – возбудителей моноцитарного эрлихиоза человека (МЭЧ), ДНК Anaplasma phagocytophilum – возбудителя гранулоцитарного анаплазмоза человека (ГАЧ) в клещах, крови, ликворе, аутоптатах методом ПЦР (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора). Сбор, хранение и транспортирование исследуемых образцов осуществлялась согласно действующей нормативной документации. Подготовка исследуемого материала РНК/ДНК проводилась в соответствии с инструкцией фирмы-производителя реагентов.  Принцип метода выявления TBEV, B. burgdorferi sl, A. phagocytophilum, E. chaffeensis / E. muris методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией включает в себя следующие этапы: - экстракцию РНК/ДНК из образцов биологического материала, - проведение реакции обратной транскрипции и получение кДНК на матрице РНК,  - амплификацию участка кДНК/ДНК данных микроорганизмов,  - гибридизационно-флуоресцентную детекцию, которая, производится непосредственно в ходе ПЦР. 7  Анализ результатов проводился с использованием программного обеспечения для прибора Rotor-Gene Q при проведении ПЦР c детекцией в режиме «реального времени». Результаты исследования и их обсуждение Результаты выявления РНК/ДНК возбудителей в клещах и материалах от больных (табл. 1). Таблица 1. Результаты выявления РНК/ДНК возбудителей в клещах и материалах от больных Год Биоматериал Кол-во проб РНК/ДНК возбудителей Количество/ % «+» проб 2016 Клещ 143 - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris - ДНК Anaplasma phagocytophilum 1 (0,6%) 28 (20%) 11 (8%)  6 (4%) 2017 Клещ      Кровь      СМЖ 684      136      2 - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris - ДНК Anaplasma phagocytophilum  - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris - ДНК Anaplasma phagocytophilum  - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris - ДНК Anaplasma phagocytophilum 50 (7%) 296 (43%) 157 (23%)  8 (1%)  - - -  -  - -  - - 2018 Клещ      Кровь   299      35 - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris - ДНК Anaplasma phagocytophilum  - РНК TBEV - РНК Borrelia burgdorferi - РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris 6 (2%) 109 (36%) 5 (2%)  4 (1,3%)  - - -  8  - ДНК Anaplasma phagocytophilum -  При анализе результатов выявлено, что в клещах обнаруживали РНК Borrelia burgdorferi - возбудитель иксодовых клещевых боррелиозов. В 2016 г. заражено - 20%, в 2017 г. - 43%, в 2018 г. - 36% клещей. Возбудители КЭ, ИКБ, МЭЧ и ГАЧ не выявлены в крови и спинномозговой жидкости, что может говорить как об отсутствии инфекции на момент исследования, так, и обусловлено тем, что пациенты, подвергшиеся укусу клеща, сдавали кровь в первые 1-2 дня. Исследование крови на клещевые инфекции методом ПЦР более информативно проводить с 1 по 5 день после укуса клеща. Наибольшее число инфицированных клещей вирусом клещевого энцефалита выявлено в 2017 г. и составило 7%. РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris выявлено в 2016 г. - у 8%, 2017 г. - у 23%, 2018 г. – у 22% обследованных клещей, ДНК Anaplasma phagocytophilum обнаружили у 1-4% клещей. Частота инфицированности клещей выше боррелиями, что соответствует результатам обследования клещей на других территориях [2], обнаружение РНК Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris превышает средние значения, особенно в 2017 году. Выводы В Екатеринбурге и пригороде клещи инфицированы не только возбудителями клещевого энцефалита и Лайм-боррелиоза, но и анаплазмоза (1-4%) и эрлихиоза (8-23%). Список литературы: 1. Тетерин В.Ю. Иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция в лабораторной диагностике гранулоцитарного анаплазмоза человека / В.Ю. Тетерин, Э.И. Коренберг, В.В. Нефедова, Н.Н. Воробьев, В.И. Фризен // Журнал инфектологии. – 2012. – Т. 4. – № 2. – С. 33-39. 2. Тетерин В.Ю. Клинико-лабораторная диагностика инфекций, передающихся иксодовыми клещами, в Пермском крае / В.Ю. Тетерин, Э.И. Коренберг, В.В. Нефедова, Н.Н. Воробьева, В.И. Фризен, В.Г. Помелова, Т.И. Кузнецова // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2013. – № 4. – С. 11-15. 3. Усков А.Н. Клещевой энцефалит, эрлихиоз, бабезиоз и другие актуальные клещевые инфекции в России // Инфекционные болезни / Усков А.Н., Лобзин Ю.В., Бургасова О.А.  – 2010. – Т. 8. – № 2. – С. 33-38. 4. Annual Cases of Anaplasmosis in the United States [Электронный ресурс] // U.S. Department of health and human serviced. Centers for Disease Control and Prevention). Statistics and Epidemiology. URL: http://www.cdc.gov/anaplasmosis/stats/index.html (дата обращения: 25.02.2019). 5. Annual Cases of Ehrlichiosis in the United States [Электронный ресурс] // U.S. Department of health and human serviced. Centers for Disease Control and Prevention). Statistics and Epidemiology. URL: http://www.cdc.gov/ehrlichiosis/stats/index.html (дата обращения: 25.02.2019). 

Detection of agents caused infections transmitted by ticks using a polymerase chain reaction in Yekaterinburg and Sverdlovsk region.

http://elib.usma.ru/bitstream/usma/4052/1/USMU_Sbornik_statei_2019_2_001.pdf

Detection of agents caused infections transmitted by ticks using a polymerase chain reaction in Yekaterinburg and Sverdlovsk region.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Ural State Medical University Repository