Research the action of complexly modulated electromagnetic field on the culture of fibroblastИсследование действия сложномодулированного электромагнитного поля на культуру фибробластов

Derbyshev, G. S.

Makeev, O. G.

Melekhin, V. V.

Дербышев, Г. С.

Макеев, О. Г.

Мелехин, В. В.

Ural State Medical University Repository

IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1239   Список литературы: 1. Арбатская Н.Ю. Сахарный диабет типа 1 и беременность / Н.Ю. Арбатская, И.Ю. Демидова // Consilium Medicum.— 2003. —  № 9. — С. 495-500. 2. Бондарь И.А. Изменения гемостаза у беременных с нарушениями углеводного обмена / И.А. Бондарь, А.С. Малышева // Сахарный диабет.— 2013. —  Т. 16,  № 2. — С. 77-81. 3. Иванова О.О. Роль липидов в развитии осложнений беременности / О.О. Иванова, Н.Л. Стародубцева, Р.Г. Шмаков // Акушерство и гинекология. — 2018. —  № 4. — С. 5-9. 4. Шмагель К.В. Плацентарный  Лактоген: функции, клиническое значение / К.В. Шмагель, В.А Черешнев // Акушерство и гинекология.— 2003. —  № 3. — С. 9-12. 5. Шуплецова Ю.С. Особенности молекулярно-генетических механизмов регуляции системы гемостаза у пациенток с сахарным диабетом / Ю.С. Шуплецова, Н.В. Башмакова, Н.В. Путилова, Т.Б. Третьякова // Акушерство и гинекология. — 2015. —  № 5. — С. 56-60.    УДК 576.08 Дербышев Г.С., Мелехин В.В., Макеев О.Г. ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕЙСТВИЯ СЛОЖНОМОДУЛИРОВАННОГО ЭЛЕКТРОМАГНИТНОГО ПОЛЯ НА КУЛЬТУРУ ФИБРОБЛАСТОВ Кафедра медицинской биологии и генетики Уральский государственный медицинский университет Лаборатория технологий клеточной и генной терапии Институт медицинских клеточных технологий Екатеринбург, Российская Федерация  Derbyshev G.S., Melekhin V.V., Makeev O.G.  RESEARCH THE ACTION OF COMPLEXLY MODULATED ELECTROMAGNETIC FIELD ON THE CULTURE OF FIBROBLAST Department of medical biology and genetics Ural State Medical University Laboratory of cellular therapy and gen-technology Institute of Medical Cell Technologies Yekaterinburg, Russian Federation E-mail: larim@mail.ru  Аннотация. В статье приведен анализ эпигенетического воздействия сложномодулированного электромагнитного поля на культивируемые IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1240  фибробласты человека, представлены результаты статистической обработки полученных данных Annotation. The article analyzes the epigenetic effects of a complex-modulated electromagnetic field on cultivated human fibroblasts, presents the results of statistical processing of the data Ключевые слова: эпигенетика, ЭМП, метилирование ДНК Keywords: epigenetics, EMI, DNA methylation  Введение В последние десятилетия наблюдается неуклонная тенденция роста смертности от онкологических заболеваний, достигающая 3% ежегодно. Из всего разнообразия методов терапии онкологических заболеваний выделяют применение магнитотерапии - использование биоуправляемых низкочастотных импульсных сложномодулированных электромагнитных полей (ЭМП). Данный метод показывает высокую эффективность в комбинированной терапии различных нозологических форм [1,2,4]. Использование импульсного сложномодулированного электромагнитного поля позволяет значительно снизить экссудативные проявления воспаления, повысить пролиферативную активность клеток, увеличить иммунологическую резистентность организма [3]. Последнее, по всей видимости, может быть связано с усилением работы как антигенпрезентирующих клеток, так и эффекторных клеток иммунной системы посредством вторичной эпигенетической стимуляции. Перспективным в исследовательском плане представляется применение импульсного сложномодулированного ЭМП (ИСЭМП) в области клеточных технологий, т.к. изменением амплитудно-частотных характеристик такого поля можно добиться различной ответной реакции культуры клеток. Ввиду малой изученности технологии стимуляции роста клеточных культур с помощью воздействия ИСЭМП открывается широкое многообещающее поле исследований этого направления.  Цель исследования – изучить эпигенетическое влияние различных амплитудно-частотных характеристик сложномодулированного ЭМП на культуру дермальных фибробластов   Материалы и методы исследования Для выполнения поставленной цели была избрана культура фибробластов человека, полученная от клинически здорового донора 25 лет после его информированного согласия. Дезагрегацию клеток проводили ферментативным путем с помощью коллагеназы (SigmaAldrich, USA). Для культивирования использовалась среда DMEM/Ham F-12 (SigmaAldrich, США) с 10% фетальной бычьей сыворотки (SigmaAldrich, США), культивирование клеток осуществляли в инкубаторахMCO-20AIC (Sanyo, Япония)при 37ºC, газовой смесью с 5% СО2 и 95% влажность. IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1241  Пассаж фибробластов провели на культуральные флаконы площадью 25 см2, сформировали 4 группы: две опытных и две контрольных. Культуры вели без воздействия одни сутки, с вторых по шестые сутки обе опытные группы облучали сложномодулированным ЭМП посредством индуктора ИСЭМП «Малахит 010П», несущая частота 0,7 Гц, частота 120 Гц.  Расстояние от катушки излучателя до флакона 5 см, протокол облучения: 30 минут 3 раза в сутки в течение 5 дней. По завершению эксперимента, клетки первой пары групп лизировали, проводили экстракцию ДНК и оценивали уровень общего метилирования ДНК в опытной и контрольной группах. Во второй связке опытной и контрольной групп исследовали изменение синтеза ДНК в клетка. В культуральную среду добавляли 3Н-тимидин в дозе 37 кБк на 106 клеток. По истечении 24 часов клетки ферментативно дезагрегировали путем трипсинизации, тщательно отмывали от не включенного3H-тимидина раствором DPBS (SigmaAldrich, USA), лизировали и растворяли в спиртово-толуоловом сцинтилляторе. Оценка радиоактивности проведена на жидкостном сцинтилляционном счетчике «Бета». Статический анализ полученных результатов проводили в программе RStudio (Version 0.99.903 – © 2009-2016 RStudio, Inc.).   Результаты исследования и их обсуждение Полученные данные демонстрируют, что в первом опыте, при воздействии импульсного сложномодулированного электромагнитного поля в опытной группе статистически достоверно (p<0.001) снижается уровень общего метилирования ДНК. Это косвенно свидетельствует о снижении дифференцировки фибробластов. IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1242   Рис. 1. Сравнение уровня метилирования ДНК у опытной и контрольной групп в первом опыте. Результаты второго эксперимента показывают повышение синтеза ДНК клетками опытной группы, по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует о более высоких темпах пролиферации фибробластов, подвергнутых воздействию импульсного сложномодулированного электромагнитного поля. В опытной группе было отмечено повышение интенсивности синтеза ДНК на 21.3% относительно контроля при высокой достоверности различий (p<0.05). IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1243   Рис. 2. Относительная интенсивность синтеза ДНК клетками опытной и контрольной групп. За 100% принят среднеарифметический показатель контрольной группы  Выводы: 1. Применение метода воздействия импульсным сложномодулированным электромагнитным полем перспективно в клеточных технологиях с целью их эпигенетической перестройки  2. Воздействие ИСЭМП позволило существенно стимулировать клеточную пролиферацию.  Список литературы: 1. Демидов С. М. Сравнительная оценка и совершенствование методов вторичной профилактики рака молочной железы / Демидов С. М., Демидов Д. А., Лан С. А.  // Креативная хирургия и онкология. -2010. -№2. –С. 27-31. 2. Ерофеев С. А. Костеобразование при использовании электромагнитного излучения высокой частоты в условиях гнойной инфекции (экспериментальное исследование) / Ерофеев С. А., Притыкин А. В., Городилов Р. В. // Гений ортопедии. -2009. -№4. –С. 5-10. 3. Ерофеев С.А. Влияние электромагнитного поля высокой частоты на рост золотистого стафилококка (экспериментальное исследование) / Ерофеев С.А., Притыкин А.В., Темникова Н.В., Соловьева Т.Д., Рейс Б.А. // Бюллетень СО РАМН. -2010. –Т.30. -№3. –С. 113-117. 4. Тицкая Е.В. Сравнительная эффективность лечебных комплексов с использованием пелоидотерапии у больных остеоартрозом пожилого возраста / IV Международная (74 Всероссийская) научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной медицинской науки и здравоохранения»  1244  Тицкая Е.В., Мирютова Н.Ф. // Физиотерапия, бальнеология и реабилитация. -2012. -№2. –С. 21-25.   УДК 13058  Дерябина А.М., Гареева И.Р., Власовец А.А., Маклакова И.Ю. МОДЕЛИРОВАНИЕ ГИПОКСИИ У ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И ЕЕ КОРРЕКЦИЯ Кафедра патологической физиологии Уральский государственный медицинский университет Екатеринбург, Российская Федерация  Deryabina A.M., Gareeva I.R., Vlasovets A.A., Maklakova I.Yu. MODELING AND CORRECTION OF HYPOXIA IN LABORATORY ANIMALS Department of Pathological Physiology Ural State Medical University Ekaterinburg, Russian Federation  E-mail: deryabina.alena2013@yandex.ru  Аннотация. В статье представлено исследование механизмов формирования  искусственной гипоксии у лабораторных животных и коррекция гипоксических состояний на этиотропном, патогенетическом и симптоматическом принципах.  Annotation. The article presents a study of the mechanisms of formation of artificial hypoxia in laboratory animals and correction of hypoxic conditions on etiotropic, pathogenetic and symptomatic principles.  Ключевые слова: лабораторные животные, гипоксия, моделирование. Key words: laboratory animals, hypoxia, modeling. Введение Гипоксия — это абсолютная или относительная недостаточность уровня реального энергообеспечения по сравнению с уровнем функциональной активности и интенсивности пластических процессов в органе, ткани или организме. Это состояние приводит к нарушению жизнедеятельности организма в целом, расстройствам функций органов и тканей. Морфологические изменения в них имеют различный масштаб и степень, вплоть до гибели клеток и неклеточных структур. Вследствие гипоксии в жизненно важных органах развиваются необратимые изменения. Наиболее чувствительными к кислородной недостаточности являются центральная нервная система, сердце, ткани почек и 

Research the action of complexly modulated electromagnetic field on the culture of fibroblast

http://elib.usma.ru/bitstream/usma/4015/1/USMU_Sbornik_statei_2019_1_286.pdf

Research the action of complexly modulated electromagnetic field on the culture of fibroblast

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Ural State Medical University Repository