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Previous issue date: 2013-11Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ-PR), Ministério da Saúde, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Fundação Araucária.Pontifícia Universidade Católica do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Biologia Básica de Células-Tronco. Curitiba, PR, Brasil.Pontifícia Universidade Católica do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Biologia Básica de Células-Tronco. Curitiba, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Laboratório de Biologia Básica de Células-Tronco. Curitiba, PR, Brasil.MicroRNAs são pequenas moléculas de RNA (~ 22 nucleotídeos), que atuam como reguladores pós-transcricional da expressão de genes, inibindo a tradução do RNA mensageiro. MicroRNAs estão envolvidos na regulação de muitos processos biológicos e patológicos, assim como a via de sinalização Hedgehog (Hh). Nós avaliamos a expressão de quatro microRNAs (miR-20a, miR-31, miR-17 e miR-199b5p) em células-tronco derivadas de tecido adiposo humano sob ativação e bloqueio da via de sinalização Hh. As células foram tratadas com purmorfamina (ativador da via Hh) ou ciclopamina (bloqueador da via Hh) durante 24 horas. Extração de RNA e cDNA foram realizadas para fazer a analise da expressão dos miRNAs por RT-PCR quantitativa. O nível de expressão do miR-20a e miR-31 aumentou após o bloqueio da via de sinalização Hh, sendo assim, esses miRNAs podem estar envolvidos no controle da proliferação de células-tronco e câncer. O miR-20a e o miR-31 são fortes candidatos para biomarcadores da via Hh.MicroRNAs are small RNA molecules (~ 22 nucleotides) that act as post-transcriptional regulators of gene expression by inhibiting translation of messenger RNAs. MicroRNAs are involved in regulating many biological and pathological processes, as well as the Hedgehog (Hh) signaling pathway. We evaluate the expression of four miRNAs (miR-20a, miR-31, miR-17 and miR-199b5p) in human adipose-derived stem cells under activation and blockade of Hh signaling pathway. Cells were treated with purmorphamine (Hh activator) or cyclopamine (Hh blocker) for 24 hours. RNA extraction and cDNA were performed to analyze of miRNAs expression by quantitative RT-PCR. The expression level of miR-20a and miR-31 increased after blocking Hh signaling pathway, thus these miRNAs may be involved in control of proliferation in stem and cancer cells. MiR-20a and miR-31 are strong candidates for biomarkers of Hh pathway
