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Previous issue date: 2014Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, BrasilDurante o processo de rejeição, linfócitos T do receptor são ativados e migram para o enxerto. A glicoproteína laminina (LM) é importante na migração e posicionamento de linfócitos durante a rejeição, porém dados sobre o papel das diferentes isoformas neste processo são escassos. Usando um modelo de transplante cardíaco alogênico, nosso grupo verificou que o tratamento com o anticorpo monoclonal anti-LM diminuiu o infiltrado inflamatório e a deposição de LM nos enxertos cardíacos. No presente trabalho, caracterizamos os linfócitos T presentes nos linfonodos de drenagem e aloenxertos, a expressão das isoformas de LM nos aloenxertos e seu papel na migração dos linfócitos T. Nos aloenxertos, observamos um aumento de linfócitos T CD4+ e CD8+, e um maior enriquecimento de linfócitos CD8+ ativados, quando comparado aos enxertos isogênicos. Por qPCR, verificamos que somente a cadeia LAMB3, constituinte da LM332, teve sua expressão aumentada nos aloenxertos. Por imunofluorescência, verificamos uma maior deposição de LM332 e da cadeia LAMB3 nos aloenxertos
Para verificar o papel da LM332 na migração dos linfócitos T, realizamos ensaios de migração e observamos uma migração reduzida dos linfócitos T frente a LM332, quando comparado aos grupos controle. Esse resultado sugere que a LM332 pode promover uma forte adesão, influenciando a migração dos linfócitos T alorreativos. A análise das isoformas de LM durante a rejeição será importante para o entendimento da migração das células efetoras durante esse processo e poderá ajudar a definir estratégias terapêuticasDuring rejection process, recipient T
cells are activated in lymph nodes and migrate
to the graft. The glycoprotein laminina (LM) is important
in lymphocyte positioning
and effector function during alloreactive responses. Using a model of allogeneic heart
transplantation, where hearts from neonatal
C57BL/6
mice
were transplanted in the
ear of adult
BALB/c
recipients,
treatment
with a
nti
-
LM mAb
de
creased the cellular
infiltrate and LM
deposition within the
grafts.
In this work
,
we
characterized
T
cells
in
allografts, evaluate
LM isoform expression and their role on T
lymphocyte migration
in the model described above.
In
al
lografts, we observed
an i
ncrease
of CD4
+
and
CD8
+
lymphocytes, and a
n
enrichment
of
activated
CD8
+
T
cells
,
when compared to
the isografts.
By qPCR,
only LAMB3 chain, component of the LM332 isoform, was
increased
in allografts.
Additionally, we observed
higher
deposition of LM332
in
allografts by immunofluorescence. To check the role of LM332 on
T
cell migration,
we performed
ex
vivo
experiments and
observed
a
reduced LM332
-
driven migratory
response of lymphocytes from lymph nodes.
Our data sug
gest that the predominance
of T
cells
in allografts can be rela
ted to an enhanced contact of T
cells with LM332,
as
no haptota
ctic
effect of the intact LM332 was
observed
. Analysis of the role of LM
isoform
s during the rejection
process
will be important to understand the trafficking
process o
f effector cells during graft rejection and might help to de
fine new
therapeutical
strategies
