Aplicación de la técnica FISH en la detección de Pseudomonas stutzeri utilizada para tratamientos de biolimpieza en obras de arte

Abstract

[ES] En el laboratorio se ha desarrollado una técnica para limpiar la superficie de obras de pintura mural mediante la aplicación de bacterias vivas, proceso conocido como Biolimpieza, en donde éstas eliminan restos de incrustaciones que perjudican la obra y son difíciles de eliminar por los métodos convencionales. Uno de los problemas que se suscita por el hecho de aplicar los microorganismos directamente sobre la obra es si permanecerán en la superficie a lo largo del tiempo provocando efectos indeseados, por lo que se hace indispensable controlar el proceso y comprobar la ausencia de bacterias tras el tratamiento. El objetivo es evaluar técnicas de biología molecular para identificar, cuantificar y demostrar la viabilidad de las bacterias mientras actúan en la biolimpieza de las superficies de las obras de arte. Para ello se ha monitorizado el proceso de biolimpieza mediante el seguimiento y control de la presencia de P. stutzeri en probetas de pintura mural durante un total de tres semanas, haciendo uso de diversas técnicas para la detección de la bacteria. Se destaca el empleo de la técnica FISH (hibridación fluorescente in situ) que permite una detección e identificación específica, así como su combinación con DVC (Direct Viable Count) para validar la viabilidad de las bacterias encontradas. Estas técnicas se han trasladado a su utilización en pinturas murales que habían sido previamente tratadas con la bacteria.[EN] In the lab it has been developed a technique for cleaning the surface of wall paintings by the application of live bacteria, process known as Biocleaning, in which the bacteria remove incrustations which damage the piece and are difficult to remove by the conventional methods. One of the concerns about this technique is the fact that the microorganisms are directly applied over the artwork surface, what raises to think if the bacteria would remain on the surface along the time causing undesirable effects, so it is essential to monitor the process and check the absence of bacteria after the treatment. This project consists of evaluating molecular biology methods to identify, quantify and evidence the viability of the bacteria while acting during the biocleaning treatment. In order to achieve that, it has been monitored a bioclening process by the control of P. stutzeri presence in wall tiles during a total of three weeks, using diverse methods for detecting the bacteria. The use of FISH (fluorescence in situ hybridization) is highlighted since it allows a specific detection and identification, as well as its combination with DVC (Direct Viable Count) for the validation of viability cell. These techniques have been translated to its use on real wall paintings that were previously treated with the bacteria.Márquez Costa, R. (2017). Aplicación de la técnica FISH en la detección de Pseudomonas stutzeri utilizada para tratamientos de biolimpieza en obras de arte. http://hdl.handle.net/10251/86567TFG