Mestrado em Bioquímica - Métodos BiomolecularesA Hiperplasia Supra-Renal Congénita (HSRC), causada por deficiência na enzima 21-hidroxilase, constitui uma das doenças autossómicas recessivas mais frequentes. Mutações no gene CYP21A2 estão, maioritariamente, na causa desta patologia. A correlação entre o genótipo e o fenótipo nos pacientes com HSRC está bem estabelecida ou seja, mutações no gene da 21-OH estão em concordância com as manifestações clínicas apresentadas na maioria dos casos. As regiões regulatórias do gene CYP21A2 têm sido pouco estudadas nestes pacientes e nelas pode estar a resposta para os casos que permanecem por esclarecer relativamente à relação genótipo-fenótipo. No presente trabalho foi estudada a região promotora do gene CYP21A2 em 40 pacientes com HSRC e em 50 controlos. Neste grupo foram encontradas as variações de sequência -4C/T, -189insT, -210C/T, -282T/G, -284A/G, -295A/C, -296T/C, -308G/C/T. A mesma região foi estudada num grupo controlo que revelou a presença das variações de sequência -4C/T, -282T/G, -284A/G, -295A/C, -296T/C. Adicionalmente, foram usadas ferramentas bioinformáticas- Software TRANSFAC®, para o estudo dos locais de ligação de factores de transcrição na região promotora analisada. Não foram encontradas diferenças significativas relativamente às frequências alélicas das variações de sequência entre o grupo dos pacientes e o grupo controlo. As variações de sequência -189insT, -210T/C e -308G/C/T não estavam presentes no grupo controlo, Não foi claramente encontrada nenhuma relação entre as variações de sequência detetadas e o fenótipo apresentado pelos pacientes. Na análise relativa aos factores de transcrição, verificaram-se diferenças de ligação destes elementos, aquando da presença de determinadas variações de sequência. Este foi o primeiro estudo da região promotora do gene CYP21A2 efectuado na população Portuguesa e os resultados obtidos servem como ponto de partida para trabalhos futuros nos quais seria de interesse aumentar o número de pacientes e de controlos bem como o investigar o papel de determinados factores de transcrição.Congenital Adrenal Hyperplasia (CAH), caused by 21-OH deficiency, is one of the most common autossomic recessive disorders. Mutations in CYP21A2 gene are, in most cases, the main cause for this disease. There is a good correlation between genotype and phenotype, however, there are some cases for which this correlation is not well stablished and regulatory regions may be involved. In the present study the promoter region on CYP21A2 gene was studied in 40 patients diagnosed with CAH. The polymorphisms found: -4C/T, -189insT, -210C/T, -282T/G, -284A/G, -295A/C, -296T/C, -308G/C/T. The same region was studied in a control group which revealed the polymorphisms -4C/T, -282T/G, -284A/G, -295A/C, -296T/C. Additionally, bioinformatic tool - Software TRANSFAC® was used to study the binding of the transcription factors to the promoter region of the CYP21A2 gene. The results didn’t show significant differences between the allelic frequencies of the patient and control groups. The polymorphisms -189insT, -210T/C and -308G/C/T were not detected in the control group. NO correlation was observed between the presence of specific polymorphisms and the phenotype presented by the patients.. In concern to transcription factors ligation sites, some differences were observed regarding binding dependent of the sequence polymorphisms. This was the first study on the CYP21A2 promoter made in the Portuguese population and the results obtained should be the start point to next extended studies with larger number of patients and controls studied as well as to focus on transcription factors specific of the adrenal region
