The objective of the present thesis was to compare the levels of circulating
endothelial progenitor cells (EPCs), circulating endothelial cells (CECs), and
hematopoietic stem cells (HSCs) between patients with heart failure with reduced
ejection fraction (HFrEF) and a group of subjects with cardiovascular risk factors.
We also compared the levels of circulating EPCs, CECs, and HSCs between
subgroups regarding the presence of cardiovascular risk factors (e.g. diabetes
mellitus) and the etiology of heart failure (HF). To achieved this, whole peripheral
blood was drawn from patients previously diagnosed with HFrEF (n = 42) and
age-matched subjects presenting similar cardiovascular risk factors but without
established cardiovascular disease (n = 42). Then, a combination of markers was
used in peripheral blood samples in order to assess the number of circulating
EPCs, CECs, and HSCs via flow cytometry analysis. Patients with HFrEF had
significantly decreased levels of circulating EPCs (5.28 x 10-3 ± 6.83 x 10-4 % vs
7.76 x 10-3 ± 4.91 x 10-4 %, P ≤ 0.001) and CECs (5.11 x 10-3 ± 7.87 x 10-4 % vs
6.51 x 10-3 ± 5.21 x 10-4 %, P = 0.005) compared to subjects with cardiovascular
risk factors. However, levels of HSCs were not significantly different between the
two groups (P = 0.590). Additionally, CECs (6.69 x 10-3 ± 6.38 x 10-3 % vs 3.61 x
10-3 ± 2.71 x 10-3 %, P = 0.057) tended to circulate in higher number in patients
with ischemic HF compared to patients with non-ischemic HF. Patients with
HFrEF and diagnosed as overweight/obese had significantly higher levels of
circulating EPCs (6.10 x 10-3 ± 4.78 x 10-3 % vs 4.13 x 10-3 ± 3.55 x 10-3 %, P =
0.043) and CECs (6.27 x 10-3 ± 5.66 x 10-3 % vs 3.47 x 10-3 ± 3.54 x 10-3 %, P =
0.019) when compared to patients with HFrEF presenting a normal weight.
Lastly, when comparing subjects from the age-matched group, subjects with
dyslipidemia had significantly higher levels of CECs (7.74 x 10-3 ± 3.64 x 10-3 %
vs 5.34 x 10-3 ± 2.59 x 10-3 %, P = 0.042) compared to subjects without
dyslipidemia. In conclusion, the main result of this study is that the circulating
levels of EPCs and CECs were significantly decreased in patients with HFrEF in
comparison to subjects with cardiovascular risk factors. The current observations
regarding cardiovascular risk factors suggest that EPCs, CECs, and HSCs play
an important role in the detection and repair of vascular damage and endothelial
dysfunction.O presente trabalho teve como principal objetivo comparar os níveis de células
endoteliais progenitoras (CEPs), células endoteliais circulantes (CECs) e células
estaminais hematopoiéticas (CEHs) em circulação entre doentes com
insuficiência cardíaca com fração de ejeção reduzida (ICFEr) e um grupo de
adultos com fatores de risco cardiovasculares. Adicionalmente, os níveis das
CEPs, CECs e CEHs foram comparados entre subgrupos em função da
presença de fatores de risco (ex. diabetes) e da etiologia da insuficiência
cardíaca. Inicialmente foram recolhidas amostras de sangue periférico de
doentes com ICFEr (n = 42) e indivíduos da mesma faixa etária com fatores de
risco cardiovasculares, mas sem qualquer doença cardiovascular estabelecida
(n = 42). Em seguida, foi utilizada uma combinação de anticorpos nas amostras
de sangue periférico para quantificação do número de CEPs, CECs e CEHs por
citometria de fluxo. Doentes com ICFEr apresentaram níveis de CEPs (5.28 x
10-3 ± 6.83 x 10-4 % vs 7.76 x 10-3 ± 4.91 x 10-4 %, P ≤ 0.001) e CECs (5.11 x 10-
3 ± 7.87 x 10-4 % vs 6.51 x 10-3 ± 5.21 x 10-4 %, P = 0.005) significativamente
inferiores aos indivíduos com fatores de risco cardiovasculares. Contudo, não
foram encontradas diferenças significativas nos níveis de CEHs entre os dois
grupos (P = 0.590). Adicionalmente, observou-se que as CECs (6.69 x 10-3 ±
6.38 x 10-3 % vs 3.61 x 10-3 ± 2.71 x 10-3 %, P = 0.057) tendem a circular em
maior número em doentes com ICFEr com etiologia isquémica
comparativamente a doentes com ICFEr não isquémica. Doentes com ICFEr e
com sobrepeso/obesidade apresentaram níveis de CEPs (6.10 x 10-3 ± 4.78 x
10-3 % vs 4.13 x 10-3 ± 3.55 x 10-3 %, P = 0.043) e CECs (6.27 x 10-3 ± 5.66 x 10-
3 % vs 3.47 x 10-3 ± 3.54 x 10-3 %, P = 0.019) significativamente superiores
comparativamente a doentes com ICFEr e com peso normal. Por último, dentro
do grupo de indivíduos com fatores de risco cardiovasculares, indivíduos com
dislipidemia apresentaram níveis de CECs (7.74 x 10-3 ± 3.64 x 10-3 % vs 5.34 x
10-3 ± 2.59 x 10-3 %, P = 0.042) significativamente superiores em comparação a
indivíduos sem dislipidemia. Em conclusão, os principais resultados deste
estudo indicam que o número de CECs e CEPs em circulação encontra-se
significativamente reduzido em doentes com ICFEr comparativamente a
indivíduos com fatores de risco para doenças cardiovasculares. As observações
atuais em relação aos fatores de risco para doenças cardiovasculares sugerem
que CEPs, CECs e CEHs desempenham um papel fundamental na sinalização
e reparação do dano vascular e disfunção endotelial.Mestrado em Biomedicina Molecula