CALBO, A. G.

HENZ, G. P.

MORETTI, C. L.

Infoteca-e

ComunicadoFoto:GilmarP.HenzHá diversos métodos para amostrar aatmosfera interna de frutas e hortaliças.Um método que é pouco invasivo e quepossibilita amostragens repetidas ao longodo tempo no mesmo órgão é o da câmaraexterna, ou método de Devaux. Por serum método que não causa ferimentosao fruto, a técnica da câmara externa deDevaux possibilita amostragens periódicas,para acompanhar, por exemplo, oamadurecimento de frutos.Um outro método mais simples e maispopular, porém muito mais invasivo, éa extração em passos de 0,1 ml a cada10 ou 15 minutos com uma seringaTécnico/SSN 1414-9850Novembro, 2007Brasí/ia, DFMétodos de amostragemda atmosfera interna defrutas e hortalicasIAdonai Gimenez Celbo!Celso Luiz MorettPGilmar Paulo Henz3mantida inserida no órgão até a tomadado volume total necessário (SMITH,1965), por exemplo, 0,5 ml. Geralmente,o volume gasoso de um órgão vegetal érelativamente pequeno. Por exemplo, umfruto de maçã de 100 g pode ter cercade 20 ml de volume gasoso intercelular,a batata-doce pode ter 6 ml de ar em100 g da raiz tuberosa, e a batata podeter apenas 0,50 ml de ar em 100 gramasdo tubérculo. Assim, para que durante aextração não se remova ar dissolvido nasolução das células ou ar da atmosferaambiente, deve-se fazer a amostragem deforma lenta e paulatina, isto é, insere-sea agulha e puxa-se cerca de 0,1 ml de ara cada 10 minutos. Adicionalmente, logo, Eng. Agr .• PhD., Embrapa Instrumentação Agropecuária. São Carlos-SP. E-mail: adonai@cnpdia.embrapa.br2 Eng. Agr .• DSc .• Embrapa Hortaliças. Brasília-DF. E-mail: moretti@cnph.embrapa.br3 Eng. Agr .• DSc .• Embrapa Hortaliças. Brasília-DF. E-mail: gilmar@cnph.embrapa.br.2 Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliçasapós a inserção da agulha no órgão, osvolumes gasosos costumam permanecertemporariamente bloqueados pelaimpregnação com a solução das célulasrompidas.A remoção de amostras gasosas de órgãoscom lóculos e cavidades como o tomate, aabóbora ou o melão com seringa, por outrolado, tende a ser muito mais fácil, vistoque o mencionado cuidado de remoção empassos não é necessário.Para o método da câmara externa, umacâmara de pequeno volume, como porexemplo 5 ml, é acoplada hermeticamentecontra a superfície do órgão com resinaou massa plástica de calafetar macia.A concentração de aromas, CO2, 02e etileno no volume de ar da câmaraexterna equilibra-se dinamicamente coma concentração destes mesmos gasesna atmosfera interna do órgão, porFoto: Gilmar P. Henz1- corpo12'i 2- hasteI 3- pipeta4- suporte/pipeta5- fiange/parafusos6- torneira7- frasco movel 3 r16água acidulada .r',8- frasco kOH 'lt-- ••••••9- frasco pirogalol10- frasco água '-14acidulada11- tubo espaguete12-agulha13- massa de silicone14- fio de escoamento15- tira de silicone16- borracha paravedação17- seringa paraintroduzir a amostragasosa18- recipiente decoleta do efluente19- borracha para14 [16 espetar seringas com"'\ amostras gasosas.,11' "'_wt17(8Fig.1. Esquema básico e partes do equipamento'Facili'.difusão após um necessário tempo deequilíbrio (NERY e CALBO, 1994). Assim,pequenas amostras de ar coletadas dacâmara externa passam a representaramostras da concentração do composto naatmosfera interna do fruto. As mediçõesde concentração podem ser efetuadaspor cromatografia gasosa ou por meio doaparelho 'Facili' (Figura 1) (CALBO, 1997;CALBO, 2007; CALBO et aI., 2007).Como evidenciar os principais sítios detrocas gasosas em frutas e hortaliçasA técnica do borbulhamento talvez sejaa forma mais simples para evidenciar oslocais onde ocorrem as principais trocasgasosas em frutas e hortaliças. Paraisto introduz-se um pequeno fluxo de arcomprimido, de uma fonte com suficientepressão, no interior do órgão, mediantea inserção de um tubo rijo no centro dofruto. A seguir, o fruto é imerso em umacuba de água para se verificar em quaislocais na superfície do fruto ou outro órgãoocorre borbulhamento. Nos sítios maisabertos ocorre maior borbulhamento. Estemétodo, evidentemente, é mais fácil de seraplicado em órgãos com cavidade como osfrutos de melão (Figura 2) ou a abóbora,.:- ..!..:;;Foto:GilmarP. HenzFig.2. Borbulhamento de ar comprimido através deaberturas (Ienticelas) de um fruto de melão imerso emágua.Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliças 3porém é uma técnica que pode ser utilizadacom eficiência em muitos outros produtos,como por exemplo, a pêra, o tomate e amaçã.Os ensaios de borbulhamento podem serefetuados aplicando-se cortes tangenciaise longitudinais para verificar assimetrias evariações de permeabilidade ao ar na polpade frutos e outros órgãos. Nestes testesse evidencia que a casca é uma importantebarreira à passagem do ar comprimido.Como se mede a composição daatmosfera interna de frutas e hortaliçasA composição da atmosfera interna emgeral é medida em cromatógrafo a gás.Alternativamente, pode ser medida comum instrumento muito simples denominadode 'Facili' (CALBO, 1997; CALBO, 2007;CALBO et ai., 2007). No cromatógrafoa gás usualmente se injeta 1,0 ml deamostra. No entanto, para medição deatmosfera interna é comum se fazerinjeções menores com volume da ordem de0,1 ml.Como fazer a leitura da atmosferainterna no 'Facili'Os volumes de gás que são medidos no'Facili' (Figura 1) são da ordem de 0,1ml. ° 'Facili' é um equipamento antigo erepresenta uma atualização do aparelhode Bonnier & Mangin, descrito por Thoday(1913). A medição das porcentagens deCO2 e 02 neste instrumento são efetuadaspor diferença de três medições:(1) primeiro: uma medição do volume dear introduzido na pipeta;(2) segundo: o volume de ar na pipetaapós a remoção do CO2, o que éfeito introduzindo-se algumas vezesuma solução de KOH na pipeta; e,finalmente,(3) uma leitura da amostra gasosa semoxigênio após se introduzir umasolução de pirogalol em meio alcalinopara a absorção do 02.Por ter sensibilidade da ordem de 0,5%de CO2 ou de 02' o 'Facili' deve serutilizado apenas para estudos de atmosferainterna de frutas e hortaliças e paraestudos de concentrações em atmosferasmodificadas e controladas. Devido a suabaixa sensibilidade, o 'Facili' não deve serutilizado para medir respiração diretamente.Referências BibliográficasCALBO, A.G. 'Facili': uma adaptaçãoeudimetrica para medição de componentesgasosos de microamostras da atmosferainterna de tecidos vegetais. In:CONGRESSO BRASILEIRO DE FISIOLOGIAVEGETAL, 6., 1997, Belém. Resumos ...Belém: SBFV, 1997. p.218.CALBO, A.G. 'Facili': uma adaptaçãoeudimétrica para medir CO2 e 02 demicroamostras de atmosferas modificas econtroladas. Disponível em: http://www.cnph .embrapa. br/laborato/pos _colheita/faciliti.htm Acesso em: 12 novo 2007.CALBO, A.G.; MORETTI, C.L.; HENZ, G.P.Uso do equipamento 'Facili' para mediçõesda atmosfera interna de frutas e hortaliças.Brasília: Embrapa Hortaliças, 2007. 7p.(Embrapa Hortaliças. Comunicado Técnico,48).NERY, A.A.; CALBO, A.G. Adaptingconstant-volume manometry for studying4 Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliçasgas exchange by bulky plant organs,Journal of the American Society forHorticultural Sciences, v.119, n.6, p.1222-1229, 1994.SMITH, W.H. A new method for thedetermination of the composition of theatmosphere of flesh plant organ. Annals ofBotany, v.11, p.363-361, 1965.Ministério daAgricultura, Pecuáriae AbastecimentoHortaliçasComunicado Exemplares desta edição podem ser adquiridos na:Técnico,51 Embrapa HortaliçasBR060 km 9 Rod. Brasrlia-AnápolisC. Postal 218, 70359-970 - Brasília-DFwww.cnph.embrapa.brTelefone: 161) 3385-9009Fax: 161) 3385-9042E-mail: sac.hortalicas@embrapa.br1" edição'" impressão (2006): 500 exemplaresComitê de Presidente: Gilmar P. HenzPublicações: Secretária-Executiva: Fabiana S. SpadaEditor Técnico: Flávia A. de AlcântaraSupervisor Editorial: Sieglinde BruneMembros: Alice Maria Ouezado DuvalEdson Guiducci FilhoMilza M. LanaExpediente Normatização Bibliográfica: Rosane M. ParmagnaniFotos: Gilmar P. HenzEditoração eletrônica: José Miguel dos Santos

Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliças.

ISSN 1414-9850Novembro, 2007Brasília, DFComunicadoTécnico 51Adonai Gimenez Calbo1Celso Luiz Moretti2Gilmar Paulo Henz3Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliças1 Eng. Agr., PhD., Embrapa Instrumentação Agropecuária, São Carlos-SP. E-mail: adonai@cnpdia.embrapa.br2 Eng. Agr., DSc., Embrapa Hortaliças, Brasília-DF. E-mail: moretti@cnph.embrapa.br3 Eng. Agr., DSc., Embrapa Hortaliças, Brasília-DF. E-mail: gilmar@cnph.embrapa.br.Há diversos métodos para amostrar a atmosfera interna de frutas e hortaliças. Um método que é pouco invasivo e que possibilita amostragens repetidas ao longo do tempo no mesmo órgão é o da câmara externa, ou método de Devaux. Por ser um método que não causa ferimentos ao fruto, a técnica da câmara externa de Devaux possibilita amostragens periódicas, para acompanhar, por exemplo, o amadurecimento de frutos.Um outro método mais simples e mais popular, porém muito mais invasivo, é a extração em passos de 0,1 ml a cada 10 ou 15 minutos com uma seringa mantida inserida no órgão até a tomada do volume total necessário (SmItH, 1965), por exemplo, 0,5 ml. Geralmente, o volume gasoso de um órgão vegetal é relativamente pequeno. Por exemplo, um fruto de maçã de 100 g pode ter cerca de 20 ml de volume gasoso intercelular, a batata-doce pode ter 6 ml de ar em 100 g da raiz tuberosa, e a batata pode ter apenas 0,50 ml de ar em 100 gramas do tubérculo. Assim, para que durante a extração não se remova ar dissolvido na solução das células ou ar da atmosfera ambiente, deve-se fazer a amostragem de forma lenta e paulatina, isto é, insere-se a agulha e puxa-se cerca de 0,1 ml de ar a cada 10 minutos. Adicionalmente, logo  Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliçasapós a inserção da agulha no órgão, os volumes gasosos costumam permanecer temporariamente bloqueados pela impregnação com a solução das células rompidas.A remoção de amostras gasosas de órgãos com lóculos e cavidades como o tomate, a abóbora ou o melão com seringa, por outro lado, tende a ser muito mais fácil, visto que o mencionado cuidado de remoção em passos não é necessário.Para o método da câmara externa, uma câmara de pequeno volume, como por exemplo 5 ml, é acoplada hermeticamente contra a superfície do órgão com resina ou massa plástica de calafetar macia. A concentração de aromas, CO2, O2 e etileno no volume de ar da câmara externa equilibra-se dinamicamente com a concentração destes mesmos gases na atmosfera interna do órgão, por difusão após um necessário tempo de equilíbrio (NEry e CAlBO, 1994). Assim, pequenas amostras de ar coletadas da câmara externa passam a representar amostras da concentração do composto na atmosfera interna do fruto. As medições de concentração podem ser efetuadas por cromatografia gasosa ou por meio do aparelho ‘Facili’ (Figura 1) (CAlBO, 1997; CAlBO, 2007; CAlBO et al., 2007).Como evidenciar os principais sítios de trocas gasosas em frutas e hortaliçasA técnica do borbulhamento talvez seja a forma mais simples para evidenciar os locais onde ocorrem as principais trocas gasosas em frutas e hortaliças. Para isto introduz-se um pequeno fluxo de ar comprimido, de uma fonte com suficiente pressão, no interior do órgão, mediante a inserção de um tubo rijo no centro do fruto. A seguir, o fruto é imerso em uma cuba de água para se verificar em quais locais na superfície do fruto ou outro órgão ocorre borbulhamento. Nos sítios mais abertos ocorre maior borbulhamento. Este método, evidentemente, é mais fácil de ser aplicado em órgãos com cavidade como os frutos de melão (Figura 2) ou a abóbora, Fig.1. Esquema básico e partes do equipamento ‘Facili’.Fig.2. Borbulhamento de ar comprimido através de aberturas (lenticelas) de um fruto de melão imerso em água.Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliçasBporém é uma técnica que pode ser utilizada com eficiência em muitos outros produtos, como por exemplo, a pêra, o tomate e a maçã.Os ensaios de borbulhamento podem ser efetuados aplicando-se cortes tangenciais e longitudinais para verificar assimetrias e variações de permeabilidade ao ar na polpa de frutos e outros órgãos. Nestes testes se evidencia que a casca é uma importante barreira à passagem do ar comprimido.Como se mede a composição da atmosfera interna de frutas e hortaliçasA composição da atmosfera interna em geral é medida em cromatógrafo a gás. Alternativamente, pode ser medida com um instrumento muito simples denominado de ‘Facili’ (CAlBO, 1997; CAlBO, 2007; CAlBO et al., 2007). No cromatógrafo a gás usualmente se injeta 1,0 ml de amostra. No entanto, para medição de atmosfera interna é comum se fazer injeções menores com volume da ordem de 0,1 ml. Como fazer a leitura da atmosfera interna no ‘Facili’Os volumes de gás que são medidos no ‘Facili’ (Figura 1) são da ordem de 0,1 ml. O ‘Facili’ é um equipamento antigo e representa uma atualização do aparelho de Bonnier & mangin, descrito por thoday (1913). A medição das porcentagens de CO2 e O2 neste instrumento são efetuadas por diferença de três medições: (1) primeiro: uma medição do volume de ar introduzido na pipeta; (2) segundo: o volume de ar na pipeta após a remoção do CO2, o que é feito introduzindo-se algumas vezes uma solução de KOH na pipeta; e, finalmente,(3) uma leitura da amostra gasosa sem oxigênio após se introduzir uma solução de pirogalol em meio alcalino para a absorção do O2.Por ter sensibilidade da ordem de 0,5% de CO2 ou de O2, o ‘Facili’ deve ser utilizado apenas para estudos de atmosfera interna de frutas e hortaliças e para estudos de concentrações em atmosferas modificadas e controladas. Devido a sua baixa sensibilidade, o ‘Facili’ não deve ser utilizado para medir respiração diretamente.Referências BibliográficasCAlBO, A.G. ‘Facili’: uma adaptação eudimetrica para medição de componentes gasosos de microamostras da atmosfera interna de tecidos vegetais. In: CONGrESSO BrASIlEIrO DE FISIOlOGIA VEGEtAl, 6., 1997, Belém. Resumos... Belém: SBFV, 1997. p.218.CAlBO, A.G. ‘Facili’: uma adaptação eudimétrica para medir CO2 e O2 de microamostras de atmosferas modificas e controladas. Disponível em: http://www.cnph.embrapa.br/laborato/pos_colheita/faciliti.htm Acesso em: 12 nov. 2007.CAlBO, A.G.; mOrEttI, C.l.; HENZ, G.P. Uso do equipamento ‘Facili’ para medições da atmosfera interna de frutas e hortaliças. Brasília: Embrapa Hortaliças, 2007. 7p. (Embrapa Hortaliças. Comunicado técnico,  48).NEry, A.A.; CAlBO, A.G. Adapting constant-volume manometry for studying  Métodos de amostragem da atmosfera interna de frutas e hortaliçasgas exchange by bulky plant organs, Journal of the American Society for Horticultural Sciences, v.119, n.6, p.1222-1229, 1994.SmItH, W.H. A new method for the determination of the composition of the atmosphere of flesh plant organ. Annals of Botany, v.11, p.363-361, 1965. Comunicado Exemplares desta edição podem ser adquiridos na:  técnico, 51 Embrapa Hortaliças  Br 060 km 9 rod. Brasília-Anápolis  C. Postal 218, 70359-970 - Brasília-DF  www.cnph.embrapa.br  telefone: (61) 3385-9009  Fax: (61) 3385-9042  E-mail: sac.hortalicas@embrapa.br	 	 1a	edição	 	 1a	impressão	(006):	500	exemplares	 Comitê de Presidente: Gilmar P. Henz Publicações:  Secretária-Executiva: Fabiana S. Spada  Editor técnico: Flávia A. de Alcântara  Supervisor Editorial: Sieglinde Brune  membros: Alice maria Quezado Duval   Edson Guiducci Filho   milza m. lana Expediente Normatização Bibliográfica: Rosane M. Parmagnani  Fotos: Gilmar P. Henz  Editoração eletrônica: José miguel dos Santos

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