Alecrim, Breno José da Cruz

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Repositório do INPA

X Jornada de Iniciação Científica do PIBIC/INPA • 04 a 06 de Julho de 2001 • Manaus - AMESTUDO DO COMPLEXO SINAPTONÊMICO EM PEIXES,SATANOPERCA JURUPARI (CICHLIDAE): ANÁLISE DA SINAPSEDOS CROMOSSOMOS SUPRANUMERÁRIOSBreno José da Cruz Alecrim': Celeste Mutuko Nakayama': Eliana Feldberg'IBolsista CNPq/PIBIC; 2Pesquisador INPAlCPBACromossomos supranumerários ou B são cromossomos adicionais ou dispensáveis aogenoma que seguem sua própria evolução; não segregam de acordo com as leis mendelianas enão apresentam pareamento com nenhum cromossomo do complemento padrão, havendo,assim, uma variabilidade intraindividual (Camacho, 1993). Mendonça et al. (1999, dados nãopublicados), verificaram em alguns indivíduos da espécie Satanoperca jurupari, a presença dedois a três pequenos cromos somos supranumerários. Visto que, nos peixes amazônicos temsido verificada uma grande variabilidade cromossômica quanto ao número de cromossomos(Porto et al., 1992), presença de cromos somos sexuais diferenciados (Falcão, 1988), presençae variação no número de microcromossomos (Salgado et al., 1994), presença de rearranjosRobertsonianos (Feldberg et al., 1993, Nakayama et al., 2001) e cromossomos B (Alves et al.1999), o estudo da meiose permitirá uma maior compreensão dos mecanismos cromossômicosenvolvidos na evolução desse grupo de vertebrados. O complexo sinaptonêmico é umaestrutura protéica que se forma ao longo dos cromossomos, durante o pareamento doshomólogos nas fases de zigóteno e paquíteno da prófase I da meiose (Guerra, 1988). Seuestudo tem sido de grande importância no entendimento do comportamento dos diferentesrearranjos cromossômicos durante a meiose, em muitos organismos. Satanoperca jurupariapresenta 2n=48 cromossomos, 2 pares de cromos somos organizadores de nucléolo (Salgadoet al., 1994) e os indivíduos coletados no Catalão apresentam um polimorfismo quanto aonúmero de cromossomos com dois braços (M-SM), além de cromossomos B (Mendonça etal., 1999). Deste modo, os objetivos do presente trabalho foram: (i) Caracterizar o complexosinaptonêmico em preparações testiculares de Satanoperca jurupari; (ii) verificar ocomportamento de cromossomos supranumerários durante a meiose. No presente trabalho,foram sacrificados sete exemplares machos da espécie Satanoperca jurupari, coletados noLago do Catalão. Para obtenção de cromossomos mitóticos foi utilizada a técnica de "airdrying" de curta duração, segundo Moreira-Filho & Bertollo (1990). Para obtenção decromos somos meióticos, foi utilizada a técnica de Klingerman & Bloom (1977), adaptadapara tecidos testiculares de peixes por Bertollo (1978), e a técnica de microespalhamento paravisualização do complexo sinaptonêmico (CS) segundo Dresser & Moses (1980), com142X Jornada de Iniciação Científica do PIBICIINPA • 04 a 06 de Julho de 2001 • Manaus - AMmodificações. E, para coloração do CS e detecção das regiões organizadoras de nucléolos(NORs), foi utilizada a técnica descrita por Howell & Black (1980). Nas preparaçõesmitóticas foi verificado um número diplóide igual a 48 cromossomos e a presença de umpequeno cromossomo B em algumas metáfases. Nas preparações meióticas foramevidenciados 48 cromossomos em metáfases espermatogoniais. Na fase de paquíteno daprófase I foram observados até três cromossomos B, sugerindo que sejam cromossomosperdidos durante os rearranjos estruturais. Neste estágio também foram observados oscromômeros, que são responsáveis pela formação dos qui asmas, que irão dar início aoprocesso sináptico. Em metáfases I verificaram-se 24 bivalentes e em metáfases TI, 24cromossomos (Fig. lb, c) esses dados estão de acordo com o número diplóide descrito porestas espécies. Na coloração com AgN03, os nucléolos foram visualizados nos três estágios(Fig. 1 d, e, f). A segregação dos Bs, como já sugerido, foi ao acaso, dois em paquíteno (Fig.1a) nenhum em metáfase I (Fig. 1b) ou três em metáfase TI (Fig. 1c). Já, com a técnica domicroespalhamento foram visualizados os complexos sinaptonêmicos nas fases de zigóteno epaquíteno, onde foram verificadas as placas de ligação em uma das extremidades dosbivalentes, a presença de dois Bs (Fig. 2d) e a presença de dois nucléolos, uma vez que estaespécie apresenta quatro regiões organizadoras de nucléolo, os quais em muitas célulasmostraram-se associados (Fig. 2a, b, c, d). No entanto, um aspecto interessante verificadoatravés desta técnica foi à presença de um bivalente com o comportamento de cromossomossexuais em meiose, ou seja, esse par se mostra mais condensado que o restante, mesmo estaespécie não tendo cromossomos sexuais diferenciados em mitose. Fato semelhante foiverificado em Oreochromis ni/oticus por Foresti et ai. (1993). Na fase de paquíteno, pode-senotar o nucléolo com um formato mais granular, ou já se desligando do cromossomo. Dessemodo, a adaptação da técnica de CS e meiose a partir de suspensão celular indica aviabilidade e aplicabilidade destes métodos nos estudos meióticos em peixes.Alves, M.N.; Santos, M.N.M.; Feldberg, E. 1999. Presença de cromossomos supranumeráriosem três espécies da família Cichlidae na bacia amazônica. Res. xm Enc. Brasil. letiol.: 155.Bertollo, L.A.c. 1978. Estudos citogenéticos no gênero Hoplias GiIl, 1903 (Pisces,Erythinidae). Tese de Doutorado. Departamento de Genética e Matemática Aplicada àBiologia, Faculdade de Medicina de Riberão Preto, Universidade de São Paulo.Camacho, J.P.M. 1993. Polymorphisms and geographic distribuition. In: First ChromosomeConference. Anais. Universidad Autonoma de Madrid. Madrid, Espanha. pp. 2-3.143X Jornada de Iniciação Científica do PIBICIINPA • 04 a 06 de Julho de 2001 • Manaus - AMFigura I. Cromossomos meióticos de Satanoperca jurupari. a) Paquíteno; b) Metáfase I; c) Metáfase 11. Asflechas indicam os cromossomos B's. d, e, f) coloração com Agn03 as setas indicam os nucléolos.aFigura 2. Complexos sinaptonêrnicos corados com AgN'03 de Satanoperca jurupari. a) Zigóteno, b, c, d)Paquíteno. As setas indicam os nucléolos, as flechas os prováveis cromossomos B's e nos círculos o provável parsexual.144X Jornada de Iniciação Científica do PIBICIINPA • 04 a 06 de Julho de 2001 • Manaus - AMDresser, M.E.; Moses, M.l. 1980. Synaptonemal complex karyotyping in spermatocytes of thechinese hamster (Cricetulus griseus). IV. Light and electron microscopy of synapsis andnucleolar development by silver staining. Chromosoma 76: 1-22.Falcão, l.N. 1988. Caracterização cariotipica em peixes do gênero Triportheus (Teleostei,Characiformes, Characidae). Tese de doutorado. Ribeirão Preto.Feldberg, E.; Porto, l.I.R., Bertollo, L.AC.; Nakayama, C.M. 1993. Karyotype evolution inCurimatidae (Teleostei, Characiformes) from the Amazon region II. Centric fissions in thegenus Potamorhina. Genome. 36.Foresti, F.; Oliveira, C.; Galetti, P.M.; Ameida- Toledo, L.F. 1993. Synaptonemal complexAnalysis in spermatocytes of tilapia, Oreochromis niloticus (Pisces, Cichlidae). Genome. 36:1124-1128.Guerra, M.S. 1928. Introdução a citogenética geral. Ed. Guanabara, 142p.Howell, W.M.; Black, D.A 1980. Controlled silver staining of nucleolus organizer regionswith a protective colloidal developer: a l-setp method. 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Estudos citogenéticos na família Cichlidae(Perciformes, Labroidei) da bacia amazônica central. VII Simp. Citogen. Evol. Aplic. PeixesNeotrop.:47., Botucatu, SP.145

Estudo do Complexo Sinaptonêmico em Peixes, Satanoperca  Jarupari (cichlidae): Análise da Sinapse dos Cromossomos Supra Numerários

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