Utilization of tissue cultures for toxicology of the environment.

Abstract

Pět látek ze skupiny látek tzv. produktů osobní hygieny, které jsou známé svou obtížnou degradabilitou a běžnou detekcí v životním prostředí, bylo testováno z hlediska toxicity pomocí dvou rybích tkáňových liniích (RTgill-W1 a RTG-2) izolovaných ze pstruha duhového (Oncorhynchus miykiss). Testovanými látkami byli hexadecylpyridinium chlorid (HDP), chlorhexidin (CHX), octenidin (OCT), thymol (THM) a triclosan (TCS), S každou z těchto látek byl proveden test na viabilitu buněk s použitím protokolů Alamar Blue™ (AB), 5-karboxyfluorescein diacetát acetoxymethyl ester (CFDA-AM) a neutral red (NR). Výsledky byly použity pro konstrukci křivek dávka-odpověď spolu s hodnotou EC50 pro každou z těchto látek. Hodnoty EC50 se pohybovaly u RTgill-W1 od 0,51 (HDP) do 33,75 µg.ml-1 (THM) a u RTG-2 od 0,31 (HDP) do 33,37 µg.ml-1 (THM). Byl zpracován i teoretický odhad LC50 podle Tanneberger et al. (2013). U všech látek byla sledována aktivita cytochromu P450 1A pomocí 7-ethoxyresorufin-o-deethylázy (EROD), z čehož čtyři se statisticky prokázaly jako tzv. EROD pozitivní, nejvyšší odezva EROD byla naměřena u nejtoxičtější z chemikálií - HDP. Jediný TCS nevykazoval statisticky významnou aktivitu cytochromu P450 1A. Dále byl měřen oxidativní stres s fluorescenčním barvivem dichlorofluorescein (DCFH-DA), přičemž...5 Abstract Five substances from the group of so-called personal care products, known for their low degradability and regular environmental detection, were tested for toxicity using two fish tissue lines (RTgill-W1 a RTG-2) isolated from rainbow trout (Oncorhynchus miykiss). The tested substances were hexadecylpyridinium chloride (HDP), chlorhexidine (CHX), octenidine (OCT), thymol (THM) and triclosan (TCS). A cell viability assay was performed with each of these compounds using Alamar Blue ™ (AB), 5-carboxyfluorescein diacetate acetoxymethyl ester (CFDA-AM) and neutral red (NR) protocols. The results were used to construct dose-response curves along with an EC50 value for each of these substances. The EC50 values ranged from 0,51 (HDP) to 33,75 µg.ml-1 (THM) for RTgill-W1 and from 0,31 (HDP) to 33,37 µg.ml-1 (THM) for RTG-2. The theoretical LC50 estimation was calculated according to Tanneberger et al. (2013). For all substances, cytochrome P450 1A activity was monitored using 7-ethoxyresorufin-o-deethylase (EROD), four out of five tested chemicals were statistically positive for EROD, the highest EROD response was observed for the most toxic compound - HDP. Only TCS did not show statistically significant cytochrome P450 1A activity. In addition, oxidative stress was measured with the fluorescent dye...Ústav pro životní prostředíInstitute for Environmental StudiesPřírodovědecká fakultaFaculty of Scienc

    Similar works