倉本 大輔

志摩 亜季保

松井 隆司

松岡 浩史

菊本 大輔

道原 明宏

松岡, 浩史

41194

志摩, 亜季保

46570

倉本, 大輔

46604

菊本, 大輔

46605

松井, 隆司

20221

道原, 明宏

16635

Fukuyama University Repository / 福山大学学術情報リポジトリ

血中グルコ ー スの調節に関わるホスホエノ ールピルビン酸カルボキシキナ ーゼはRORa核内受容体の標的である松岡浩史、 志摩亜季保、 倉本大輔、 菊本大輔、 松井隆司、 道原明宏PLoS One, 10(9), e0137955 (2015) Phosphoenolpyruvate carboxykinase, a key enzyme that controls blood glucose, is a target of retinoic acid receptor-related orphan receptor a Hiroshi Matsuoka, Akiho Shima, Daisuke Kuramoto, Daisuke Kikumoto, Takashi Matsui, and Akihiro Michihara ABSTRACT: Phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) catalyzes a committed and rate-limiting step in hepatic gluconeogenesis, and its activity is tightly regulated to maintain blood glucose levels within normal limits. PEPCK activity is primarily regulated through hormonal control of gene transcription. Transcription is additionally regulated via a cAMP response unit, which includes a cAMP response element and four binding sites for CCAAT/enhancer-binding protein (C/EBP). Notably, the cAMP response unit also contains a putative response element for retinoic acid receptor-related orphan receptor Cl (RORu). In this paper, we characterize the effect of the RORu response element on cAMP­induced transcription. Electrophoresis mobility shift assay indicates that RORu binds this response element in a sequence-specific manner. Furthermore, luciferase reporter assays indicate that RORu interacts with C/EBP at the PEPCK promoter to synergistically enhance transcription. We also found that cAMP-induced transcription depends in part on RORu and its response element. In addition, we show that suppression of RO Ru by siRNA significantly decreased PEPCK transcription. Finally, we found that a RORu antagonist inhibits hepatic gluconeogenesis in an in vitro glucose production assay. Taken together, the data strongly suggest that PEPCK is a direct RORu target. These results define possible new roles for RORu in hepatic gluconeogenesis. 抄録 ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナ ー ゼ (PEPCK) は肝糖新生の律速酵素であり その活性は血中グルコ ース量の調節に関与している。 PEPCK 活性は、 主に遺伝子転写の段階で調節されている。 本論文では， PEPCK 遺伝子のプロモ ーター 領域内の cAMP 応答配列へ相乗的作用を及ぼす RORa 応答配列の存在を明らかにした。 方法は、 ゲルシフト解析およびルシフェラ ーゼレポ ーター解析により、 RORa 応答配列への RORa 核内受容体の作用を評価した。 さらに、 siRNA ノックダウン法および RORaアンタゴニストにより、 RORa の発現減少に伴うグルコ ース生産量の減少を評価した。これらの解析の結果、 RORaがPEPCK の発現冗進に直接的に作用することで肝糖新生を増加させることをはじめて明らかにした。-55-

Phosphoenolpyruvate carboxykinase, a key enzyme that controls blood glucose, is a target of retinoic acid receptor-related orphan receptor a

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血中グルコースの調節に関わるホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼはRORa核内受容体の標的である

血中グルコースの調節に関わるホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼはRORa核内受容体の標的である

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