Introdução: As células-tronco mesenquimais (CTM) têm despertado interesse de vários grupos de pesquisa em função do grande potencial de aplicabilidade em terapia celular e medicina regenerativa. Nesse contexto, o tecido adiposo vemrecebendo grande destaque como importante fonte para obtenção de CTM. Os protocolos utilizados atualmente parao isolamento das células-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC) empregam, de forma geral, o método de digestãoenzimática com colagenase extraída de bactéria (Clostridium histolyticun), que pode conter contaminantes, como endotoxinase outros peptídeos que, eventualmente, poderão resultar em reações adversas nos procedimentos de terapia celularem pacientes humanos. Objetivo: Pretendeu-se no presente estudo adequar e propor uma nova abordagem empregandoa metodologia de dissociação mecânica para isolamento de CTM derivadas de tecido adiposo de ratos. Métodos: Ascélulas cultivadas foram analisadas quanto ao potencial de adesão, proliferação e tempo de duplicação celular, por meiode uma curva de crescimento. As células isoladas e cultivadas a partir do tecido adiposo foram também analisadas quantoao potencial de diferenciação in vitro nas linhagens adipogênica, condrogênica e osteogênica. Resultados: Os resultadosmostraram que o tempo de duplicação (velocidade de crescimento) da população celular isolada por dissociação mecânica é mais expressivo quando comparado com a técnica de digestão enzimática. As células isoladas do tecido adiposo apresentaram potencial de diferenciação nas linhagens osteogênica, condrogênica e adipogênica. Conclusão: Os resultados obtidos permitem concluir que a metodologia de dissociação mecânica apresenta-se como uma alternativa viável, de baixo custo e, como tal, extremamente promissora no sentido de permitir que a colagenase de origem bacteriana (Clostridium histolyticun) torne-se um componente prescindível para isolamento e cultivo de células provenientes do tecido adiposo
