Caracterización inmunoquímica y enzimática del veneno de la serpiente Porthidium nasutum

Abstract

El envenenamiento por Porthidium nasutum causa principalmente dolor, edema, hemorragia y necrosis en el lugar de la mordedura y en algunos casos, se puede presentar deficiencia renal aguda. El objetivo de este trabajo, fue caracterizar algunas actividades inmunoquímicas y enzimáticas del veneno de P. nasutum. La caracterización bioquímica se llevó a cabo por medio de electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de SDS (12,5%). Caseína, gelatina, fibrinógeno y ácido hialurónico fueron adicionados como substrato en SDS-PAGE (12,5%), para determinar las actividades enzimáticas. Se realizaron ELISA y Western Blotting para verificar el reconocimiento del veneno por parte del suero antibotrópico producido por el Instituto Butantan. Para todos los experimentos, se utilizó veneno de Bothrops jararaca como control positivo1. INTRODUCCIÓN 5 1.1 Porthidium nasutum 6 1.2 Epidemiología 8 1.3 El veneno 10 1.4 El suero 13 2. OBJETIVOS 17 3. MATERIALES Y MÉTODOS 18 3.1 Veneno 18 3.2 Suero 18 3.3 Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) 19 3.4 Zimografía 20 3.5 Inmunoensayo (ELISA) 22 3.6 Western Blotting 23 4. RESULTADOS 24 4.1 Análisis del veneno de Porthidium nasutum por SDS–PAGE 24 4.2 Estudio de las actividades enzimáticas del veneno de Porthidium nasutum por Zimografía. 26 4.3 Reactividad cruzada ente los venenos de Porthidium nasutum y Bothrops jararaca revelada por ELISA 32 4.4 Reactividad antigénica cruzada entre los venenos de Porthidium nasutum y Bothrops jararaca revelada por Western Blotting 34PregradoLicenciado en Biología y Educación Ambienta

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