Determınatıon Of The Mıcrobıal Interactıons In Polymıcrobıal
Bıofılms Actıng As A Role In Susceptıbılıty Agaınst To
Dısınfectants Frequently Used In Hospıtals Wıth Phenotypıc And
Genotypıc Analysıs
Biyofilm oluşumu insan sağlığını tehdit eden önemli bir problemdir. Yapılan son
çalışmalarda persistan enfeksiyonlara yol açan klinik ile ilişkili biyofilmlerin çoğunun
polimikrobiyal kaynaklı olduğu belirtilmiştir. Sesil biyofilm hücrelerinin antimikrobiyal
ajanlara karşı yüksek direnç göstermelerinden dolayı bu enfeksiyonların tedavisi oldukça
zordur. Polimikrobiyal biyofilmlerin önemi günden güne artmasına rağmen henüz bu
biyofilmlerin özellikleri üzerine az sayıda çalışma bulunmaktadır. Çalışmamızın amacı,
tekrar edilebilirliği yüksek in vitro polimikrobiyal biyofilm modeli geliştirmek, aynı
zamanda da fenotipik ve moleküler yöntemlerle biyofilm ortamında bulunan C. albicans ve
S. aureus varlığının P. aeruginosa nın çeşitli dezenfektanlara karşı duyarlılığı üzerindeki
etkisini anlayabilmektir. Bu çalışmada 96 çukurlu mikrotitrasyon plaklarında tekrar
edilebilirliği yüksek polimikrobiyal biyofilmler oluşturulmuştur. Piyasada bulunan 9
dezenfektanın polimikrobiyal biyofilm içinde bulunan S. aureus, C. albicans, and P.
aeruginosa ya etkileri belirlenerek birbirleriyle karşılaştırılmıştır. Seçici besiyerleri
kullanılarak plak döküm yöntemiyle hücre sayımları yapılmıştır. Hidrojen peroksit kalıntı
miktarı, ROS birikimi ve oksidatif stres ilişkili genlerin ekspresyon seviyeleri hem
monomikrobiyal hemde polimikrobiyal biyofilm hücrelerinden ölçülmüş ve sonuçlar
birbirleriyle karşılaştırılmıştır. Sonuçlar polimikrobiyal biyofilmlerdeki mikrobiyal
etkileşimin öneminin kullanılan dezenfektana ve ortamda bulunan mikrobiyal türe bağımlı
olduğunu göstermiştir. Ayrıca literatürde sıklıkla bahsedilen monomikrobiyal biyofilmlerin
polimikrobiyaller e göre daha duyarlı olduğu düşüncesinin her zaman geçerli olmadığı bu
çalışma sonuçlarıyla ortaya koyulmuştur.Biofilms are substantial problem threatening the human health. It was shown that in recent
studies, most of clinically relevant biofilms leading to persistent infections are
polymicrobial. Because of sessile cells in biofilm are highly resistant against antimicrobial
agents to treat these infections are troublesome. While increasingly being recognized as
important, there are few studies on the properties of multispecies biofilms. Our aim is set
up an in model to grow polymicrobial biofilms in a repeatable style and to find out the
impact of the presence of S. aureus or C. albicans on the susceptibility of P. aeruginosa to a
variety of disinfectants by using phenotypic and moleclar test methods. In the present
study, polimicrobial biofilms were grown in a repeatable manner in a multi-well plate. S.
aureus, C. albicans, and P. aeruginosa in polymicrobial biofilms were threated by nine
commercial different disinfectants and the effects of these disinfectant were compared. The
number of cells was quantified and counted by pour plating method on a selective growth
media. Both in polymicrobial and monomicrobial biofilms, the residual hydrogen peroxide
concentration, the accumulation of ROS and the expression level of oxidative stress related
genes were measured and the results compared with each other. Our results demonstrated
that the aspect and the importance of the effect in a polymicrobial biofilm depend on the
strain and the disinfectant used. Moreover, it is conflict with the extensive belief that
organisms in polymicrobial biofilms are always less susceptible than in monomicrobial