Chevreuil, Larissa Ramos

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Repositório do INPA

REC-12xm Jornada de Iniciação Científica do PIBIC/CNPqIFAPEAM/INPA • Manaus-AMCARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA DE PROTEÍNAS DE RESERVAEM SEMENTES DE PAU-ROSA (Aniba rosaeodora Ducke) DURANTE AGERMINAÇÃO.Larissa Ramos Chevreuil ( 1 ); José Francisco de Carvalho Gonçalves (2)( 1 ) Bolsista PIBIC - CNPq/ INPA; (2) Pesquisador INPAI CPSTA despeito da importância econômica do pau-rosa, atualmente, existem poucas informaçõescientíficas sobre a espécie no que concerne à fisiologia e à bioquímica de suas sementes.Quanto aos componentes do metabolismo primário, as informações são ainda mais escassas.Desta forma, julga-se de grande importância aumentar o entendimento sobre a bioquímica deproteínas visando subsidiar estudos que esclareçam os mecanismos de germinação da Anibarosaeodora. Durante a germinação das sementes, várias rotas bioquímicas e fisiológicas sãoativadas, ocorrendo intensa hidrólise e mobilização das reservas a fim de atender a demandade crescimento do eixo embrionário e, por conseguinte, fornecer energia e metabólitos para odesenvolvimento da plântula (Borges et aI., 2002; Pontes et al., 2002). Entre as rotasbioquímicas ativadas, ressaltam-se aquelas ligadas à biossíntese de proteínas. Nas plantas,destacam-se proteínas de estocagem que são usadas como reserva de nitrogênio, o qual seráutilizado para a síntese de novos aminoácidos e, subseqüente, síntese de novas proteínasdurante o processo de germinação ou da propagação vegetativa (Toro, 2001; Marcellino,2002). Sementes de pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke) originárias da Reserva AdolphoDucke (3°00'02"S e 59°58'00"W), Manaus - AM, foram coletadas e conduzi das aolaboratório de Fisiologia e Bioquímica Vegetal (MCT-INPA). Após tratamento comhipoclorito de sódio a 0,5% (v/v) durante 10 minutos e a retirada do tegumento, as sementesforam colocadas para germinar em bandejas plásticas com quatro repetições de 15 sementes,utilizando como substrato vermiculita, acondicionadas em câmara de germinação a 25°C(fotoperíodo de 12/12 h de luz e de escuro). Em seguida, coletou-se e armazenou-se emfreezer o material biológico das sementes quiescentes e em intervalos de 5 em 5 dias até ovigésimo quinto dia de germinação, para caracterizar o padrão das proteínas nos cotilédones.Para a extração das proteínas, os cotilédones das sementes quiescentes, com 5, 10, 15 e 20dias de germinação foram macerados em tampão Tris (100 mM de Tris-HCI pH 7,5,30 mMde NaCI, 5 mM de MgC}z, 1 mM de ~-mercaptoetanol e 1% de Triton X-100) e centrifugadosa 12.000 g, 4°C durante 15 minutos. A partir da análise das bandas protéicas, identificou-segrande variação nos valores das massas moleculares das sementes de pau-rosa com 10, 15 e251XIII Jornada de Iniciação Científica do PIBICICNPq/F APEAM/INP A • Manaus- AM20 dias e a existência de 12 bandas nas sementes (Figura 1). As bandas protéicas maisintensas, presentes nos três intervalos analisados de germinação possuem, cerca de, 22,9 e33,5 KDa, correspondendo, provavelmente, às principais proteínas estocadas como reservas aserem mobilizadas para dar suporte a germinação, já que naquele período da análise, deacordo com Lima et al. (2003), ocorre a emissão da radícula do pau-rosa (16 dias).10 15 20M/(Kp..e1 CW..e1- 120- 85 - 84.1- 70.2- 60- 50 - 44.1- 40 - 39.9- 33.5- 32.2- 28.0- 25 - 22.9- 20 - 16.9- 15 - 12.4- 92- 3.7Figura 1 - Gel de poliacrilamida corado com Comassie Brilliant Blue. Bandas protéicas das sementes de pau-rosa aos 10, 15 e 20 dias de germinação. Legenda: M - Marcador Molecular (Benchmark Protein Ladder)Borges, E. E. L., Perez, S. C. J.G.A., Borges, R. C. G., Rezende, S. T., Garcia, S. R. 2002.Comportamento Fisiológico De Sementes Osmocondicionadasde Platyrniscium Pubescens Micheli(Tamboril-Da-Mata), R. Árvore, Viçosa-MG, 26 (5): 603-613.Toro, A. A., 2001. Quantificação de aminoácidos solúveis em mutantes de endosperma de milho.Piracicaba, 88p.ESALQ/USP. Dissertação de mestrado. Escola superior de Agricultura LuizQueiroz.Marcellino, L. H., 2002. Proteínas de reserva de plantas: Caracterização e Estudos de ExpressãoCênica, Universidade de Brasília, Brasília, DF, Tese de doutorado.Lima, R. B. S. L., Gonçalves, J. F.C., MeIo, Z. L. O. Femandes, A. V., Sampaio, P. T. B. 2003. Uso dereservas orgânicas em sementes de pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke). Desafios da Botânica noNovo Milênio, 54 Congresso Nacional de Botânica, Belém-PA.252

Caracterização Bioquímica de Proteínas de Reserva em Sementes de Pau-rosa (aniba Rosaeodora Ducke) Durante A Germinação.

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Caracterização Bioquímica de Proteínas de Reserva em Sementes de Pau-rosa (aniba Rosaeodora Ducke) Durante A Germinação.

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