The tissue culture techniques can be supplemented with others that are carried out in the cultivation in situ and being applied in combined way to give solution to the extinction of different species. Eugenia squarrosa (Ekman Urban) it is an endemic species of Cuba in extinction danger due to the urbanization of their natural habitat, which have been reduced to a few hectares. The aim of this work was to achieve the establishment in vitro of this species. Seeds and young branches were collected starting from plants in its natural habitat. The effect of three concentrations of NaOCl (2.0, 2.5, 3.0%) during 20 minutes in the disinfection of the seeds was studied. For the disinfection of the buds a treatment with alcohol to 70% was used during two minutes previously to the disinfection with NaOCl. The effect of three concentrations of this NaOCl was studied (1.0, 2.0, 3.0%) during 10 minutes. The present microbiota was characterized in the contaminated branch. The 100% of disinfection of the seeds was achieved in all the treatments studied. The bigger explants percentage free of contaminant (88.6%) was obtained in the treatment with 3% of NaOCl. However the biggest percentage of survival (45.7%) was obtained when 2.0% of NaOCl was used. The establishment in vitro of the species was achieved starting from seeds and buds collected of field plants.Key Words: biodiversity, micropropagation, threatened speciesLas técnicas de cultivo de tejidos pueden complementarse con otras que se realizan en el cultivo in situ y ser aplicadas de forma combinada para dar solución a la extinción de diferentes especies de plantas. Eugenia squarrosa (Ekman Urban) es una especie endémica de Cuba en peligro de extinción, debido a la urbanización que han sufrido sus hábitat naturales, los cuales han sido reducidos a pocas hectáreas. Este trabajo tuvo como objetivo lograr el establecimiento in vitro de esta especie, para lo cual se utilizaron semillas y ramas jóvenes colectadas a partir de plantas en su hábitat natural. Se estudió el efecto de tres concentraciones de NaOCl (2.0, 2.5, 3.0%) durante 20 minutos en la desinfección de las semillas. Para este mismo propósito, en el caso de los esquejes, se utilizó un tratamiento previo con alcohol al 70% y se evaluó el efecto de tres concentraciones de NaOCl (1.0, 2.0, 3.0%) durante un tiempo de desinfección de 10 minutos. Se caracterizó además, la micobiota presente en los esquejes contaminados. Se logró el 100% de desinfección de las semillas en todos los tratamientos estudiados. El mayor porcentaje de esquejes libres de contaminantes visibles (88.6%) se obtuvo en el tratamiento donde se utilizó 3% de NaOCl, sin embargo el mayor porcentaje de supervivencia (45.7%) se obtuvo cuando se utilizó 2% de NaOCl. Se logró el establecimiento in vitro de la especie a partir de semillas y de brotes colectados de plantas de campo.Palabras clave: biodiversidad, especie amenazada, micropropagació
