蓝细菌病毒A-4L 在鱼腥藻(Anabaena variabilis)藻苔中形成同心圆噬斑的成因

Abstract

【目的】分析蓝细菌病毒A-4L 在鱼腥藻(Anabaena sp.) PCC 7120藻苔中形成同心圆噬斑的原因,阐明 A-4L 的一个重要生物学特征,为分离、鉴定和筛选新的水华蓝藻病毒提供借鉴。【方法】用初始滴度为2. 8 × 10~(10) PFU /mL 的A-4L 悬液感染鱼腥藻,在不同时间点收集裂解液绘制一步生长曲线,获得A-4L 对鱼腥藻的潜伏期和释放量。将适量A-4L 悬液感染不同培养时间的藻苔,逐日观察和记录藻苔病变情况。培养藻苔并接种适量A-4L 悬液,分别置于完全持续光照(Light∶ Dark = 24 h∶ 0 h,L∶ D = 24 h∶ 0 h)条件;完全周期光照(L∶ D = 14 h∶ 10 h)条件;或前3 d 周期光照转后3 d 持续光照的条件下,比较不同光照条件对同心圆噬斑形成的影响。然后挑取单个噬斑进行扩大培养,纯化后,负染电镜观察A-4L 的超微形态。【结果】A-4L的潜伏期为0. 5 - 2 h,释放量约为247 IU / cell (Infectious Units)。在周期光照条件下,藻苔接种A-4L 3 - 4 d后,出现同心圆噬斑,且同心圆数量与攻毒后的天数(n)有相关性,为“n - 1”;同心圆间距约为3 mm。与周期光照条件相比,在持续光照条件下未形成同心圆噬斑。而在周期光照条件转持续光照条件下,由先周期光照时所形成的同心圆在转持续光照后逐渐消失,证实同心圆噬斑的形成依赖于周期光照。负染电镜观察显示A-4L 具有一个近似球形的头部,直径约为50 nm 以及长度约为10 nm 的尾部,形态与短尾蓝细菌病毒相似。【结论】A-4L 是一株能形成同心圆噬斑的蓝细菌病毒,并揭示其同心圆噬斑形成的关键条件是周期光照