Suatu kalkon   telah diisolasi dari kulit batang  Cryptocarya costata. Isolat  diperoleh dari fraksi kloroform, setelah fraksinasi dengan teknik kromatografi yang dilanjutkan  dengan rekristalisasi dalam heksana dan etilasetat, dihasilkan kristal jarum berwarna kuning dengan titik leleh 167-169oC. Elusidasi struktur isolat berdasarkan spektrum UV, IR, 1 D dan 2D NMR,  maka dapat ditetapkan bahwa senyawa isolat adalah 2’,4’-Dihidroksi-3’,6’-dimetoksicalkon. Uji sitotoksik terhadap E.coli, menunjukkan aktivitas positif dengan nilai hambat 35,4 %, dan pertama kali ditemukan dari tumbuhan Cryptocarya

Kata kunci : Kalkon, Sitotoksik, Cryptocarya costat

Achmad, Sjamsul A. A.

Hakim, Euis H.

Harlim, Tjodi

Jalaluddin, M. Noor

Latip, Jalifah

Said, Ikram M.

Syah, Yana M.

Indonesian

BIMIPA

HanapiUsman dkk, Senyawa Kalkon Baru  37 SENYAWA KALKON BARU BERSIFAT ANTI-BAKTERI DARI TUMBUHAN CRYPTOCARYA COSTATA (LAURACEAE) (New Chalcone Compound having Anti-Bactery Property from Cryptocarya COSTATA (LAURACEAE) Plant)   Hanapi Usman1, M. Noor Jalaluddin1, Tjodi Harlim1,2 , Euis H.Hakim2 Sjamsul A.Achmad2,Yana M. Syah2, Jalifah Latip3, dan Ikram M. Said 3  1 Departemen Kimia Universitas Hasanuddin Makassa,  Jalan Perintis Kemerdekaan    Km.10, Makassar, Indonesia.  2 Kelompok Peneliti Kimia Organik Bahan Alam, Departemen Kimia, Institut Teknologi  Bandung,  JalanGaneca 10 Bandung, Indonesia.  3 School of Chemical Science & Food Technology, Faculty of Science and Technology,  Universiti Kebangsaan Malaysia  43600 UKM Bangi, Selangor D.E., Malaysia.     ABSTRAK  Suatu kalkon   telah diisolasi dari kulit batang  Cryptocarya costata. Isolat  diperoleh dari fraksi kloroform, setelah fraksinasi dengan teknik kromatografi yang dilanjutkan  dengan rekristalisasi dalam heksana dan etilasetat, dihasilkan kristal jarum berwarna kuning dengan titik leleh 167-169oC. Elusidasi struktur isolat berdasarkan spektrum UV, IR, 1 D dan 2D NMR,  maka dapat ditetapkan bahwa senyawa isolat adalah 2’,4’-Dihidroksi-3’,6’-dimetoksicalkon. Uji sitotoksik terhadap E.coli, menunjukkan aktivitas positif dengan nilai hambat 35,4 %, dan pertama kali ditemukan dari tumbuhan Cryptocarya  Kata kunci : Kalkon, Sitotoksik, Cryptocarya costata  ABSTRACT  A chalcone has been isolated from methanol extract of the stem bark of Cryptocarya costata. The chloroform fraction was separated and purified by chromatography and recrystalisation methodes, which yielded a colorless needle. With melting point 167–169oC. Structure elucidation of the compound was established based on the spectroscopic evidence, including UV, IR, 1-D and 2D NMR spectra. And it showed that the isolate compound is 2’,4’-Dihydroxy-3’,6’-dimethoxy chalcone. The cytotoxic test to E.coli  indicates positive activity by obstruction value of 35.4 %, first discovered from Cryptocarya plant.  Keywords : Chalcone, Cytotoxic, Cryptocarya costata   Makalah diterima 25 Oktober 2005   1. PENDAHULUAN    Cryptocarya adalah salah satu genus dari famili Lauraceae yang mempunyai sekitar 478 spesies.1 Tumbuhan ini hidupnya tersebar luas di daerah tropika dan sub tropika dengan topologi berupa pohon tinggi. Sejak dahulu kelompok tumbuhan ini banyak digunakan sebagai bahan bangunan, bahan baku pulp, dan beberapa di antaranya kemudian digunakan sebagai obat tradisional.2 Bahkan akhir-akhir ini beberapa penelitian telah mengungkapkan bahwa Cryptocarya  mengandung banyak senyawa kimia berguna.3,4,5 Beberapa metabolit sekunder telah diisolasi dari beberapa spesies  Berkala MIPA, 16(1), Januari 2006  38 Cryptocarya.6,7,8 Telah dilaporkan bahwa sebagian besar  dari spesies Cryptocarya mengandung molekul  kimia anti tumor.9,10  Cryptocarya costata diidentifikasi sebagai tumbuhan primitif dan langka, ditemukan di kawasan hutan Sulawesi yang dikenal sebagai kawasan Wollacea. Berdasarkan penelusuran literatur diketahui bahwa tumbuhan ini belum pernah ditemukan orang di kawasan lain, berarti kandungan kimianyapun belum pernah diselidiki. Namun demikian peta kemotaksonomi menunjukkan bahwa famili tumbuhan ini mengandung banyak senyawa kimia bermanfaat.11,12 Di Sulawesi tumbuhan ini dikenal dengan nama daerah Tarusu (Bugis), Garate Borong (Makassar), Baga Tomombu (Keli). Penelitian terhadap Cryptocarya costata tersebut, menggunakan serbuk kulit batang yang diekstraksi dengan metanol lalu dipartisi dengan kloroform. Pada paper ini akan dilaporkan isolasi dan penentuan struktur suatu senyawa calkon yang beraktivitas anti tumor, elusidasi struktur didasarkan pada data-data spektara  UV, IR, MS dan 1H-NMR,  13C-NMR yang didukung oleh data FGHMBC dan FGHMQC.  2. PERCOBAAN   2.1 Umum   Penentuan titik leleh dilakukan menggunakan ‘micro melting point apparatus’. Spektra UV dan IR diukur menggunakan Cary Varian 100 Conc. dan Perkin Elmer Spectrum One FT-IR.  1H (500 MHz) dan 13C (125 MHz) NMR spektra diperoleh dari spektrofotometer JEOL, dengan menggunakan puncak residu pelarut dan pelarut terdeuterasi sebagai standar. Kromatografi cair vakum menggunakan Si-gel 60 GF254 (Merck), Kromatografi kolom tekan menggunakan Si-gel G60 (230-400 mesh) (Merck), kromatografi radial menggunakan Si-gel 60 PF254 (Merck), dan analisis KLT menggunakan plat KLT  Kieslgel 60 F254 0,25 mm (Merck).  2.2 Bahan Tumbuhan  Bagian tumbuhan yang digunakan adalah kulit batang Cryptocarya costata, yang didapatkan dari hutan taman nasional Lore Lindu, desa Tomodo, kec. Kulawi Sulawesi tengah. Identifikasi dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bogor dan Lab. Herbarium Biologi Univ.Tadulako Sul-Teng, voucher specimen tersimpan di Herbarium Biologi Univ.Tadulako (E.377 L).  2.3 Ekstraksi dan Isolasi  Sebanyak 2,5 Kg serbuk halus kulit batang Cryptocarya costata dimaserasi dengan metanol, kemudian dipartisi dengan kloroform. Selanjutnya, fraksi kloroform dievaporasi sehingga didapatkan ekstrak kental berwarna coklat kehitaman sebanyak  140 g. Sebanyak 20 g ekstrak tersebut difraksinasi menggunakan kromatografi kolom cair (KVC) dengan eluen campuran antara n-heksan : etilasetat ( 9 : 1  s/d 6 : 4 ). Didapatkan enam  fraksi, yakni fraksi A, B, C, D, E dan F. Fraksi C sebanyak 230 mg selanjutnya diolah dengan kromatografi radial, diperoleh dua komponen utama yakni C-1 (102 mg) dan C-2 (14 mg). Rekristalisasi berulang-ulang terhadap senyawa C-1 menggunakan kombinasi pelarut n-heksana dan etilasetat, maka dihasilkan kristal berwarna oranye sebanyak 49 mg. Uji TLC dengan tiga sistem pelarut menunjukkan masing-masing satu noda, uji titik leleh menunjukkan tl 167 – 169 oC.   3. PEMBAHASAN   3.1 Elusidasi struktur  Isolat dari fraksi C-1 didapatkan dalam bentuk kristal berwarna kuning, dengan titik leleh 167 – 169oC. Uji TLC dengan tiga sistem pelarut, masing-masing menunjukkan hanya ada satu noda; (1).aseton : kloroform : n-heksan (0,5: 1,5 : 8), dengan Rf. 0,42, (2) n-heksan : etilasetat (7 : 3) dengan Rf. 0,53, dan (3) kloroform : metanol (9 : 1 ) dengan Rf. 0,78. Data fisikokimia tersebut di atas menunjukkan bahwa isolat yang dihasilkan relatif murni. Berdasarkan NMR diketahui rumus molekul senyawa adalah C17H16O5.  Spektrum UV dalam metanol menujukkan serapan maksimum pada 205, 228 dan 325 nm, penambahan pereaksi penggeser NaOH HanapiUsman dkk, Senyawa Kalkon Baru  39 menunjukkan adanya pergeseran batokromik yakni pada serapan 205, 304 dan 400 nm, gejala tersebut karakteristik untuk   senyawa  kalkon. Spektrum IR menunjukkan adanya gugus –OH pada serapan 3412 cm-1 dan karbonil terkonyugasi pada 1629 cm-1 disamping adanya metil dan metilen yang ditunjukkan pada 2992, 2942, dan 2847 cm-1,  sistem aromatik ditunjukkan pada puncak 1555, 1486 dan 1444 cm-1. Struktur kalkon didukung oleh spektrum  1H NMR, yakni sinyal pada dH  7,83 (1H, d, J=15,7 Hz)  dan 7,92 (1H, d, J = 15,7 Hz ) adalah dua proton trans vinilik  masing-masing pada C-a  dan C-ß  dalam gugus a,ß-karbonil tak jenuh dari calkon. Sinyal pada  dH  7,63 (2H, d) dalam spektrum 1H NMR adalah dua proton dalam posisi simetrik, masing-masing satu proton pada karbon 2 dan satu proton pada karbon 6 (cincin B), demikian juga sinyal  pada dH  7,42 (2H, m)  menunjukkan dua proton yang simetris pada karbon 3 dan 5, dan sinyal pada dH  7,41(1H, m) adalah satu proton pada karbon 4, jadi sinyal dH  (7,41 – 7,63 ppm) milik lima proton fenil (cincin B). Sinyal pada dH 13,48 (1H, s) adalah proton OH pada karbon 2’ yang berikatan hidrogen dengan oksigen karbonil dan sinyal dH 6,32 (1H, s) adalah proton dari OH pada karbon 4’ (cincin A). Sinyal pada dH  6,32 (1H, s) menunjukkan proton pada karbon 5’ dan sinyal dH  3,89 (3H, s ) dan 3,94 (3H, s) adalah  proton dari dua gugus metil  pada OCH3. Spektrum 13C NMR sebagaimana (Tabel 1) menunjukkan  adanya 15 sinyal yang mewakili 17 karbon, dua pasang karbon pada cincin B berkedudukan simetris,  sehingga memunculkan masing-masing hanya satu sinyal yaitu C-2/C-6 (dC 128,4), dan C-3/C-5 (dC  128,9),  selain itu, pada cincin B terdapat pula satu karbon tertier C-4 (dC 130,3) dan satu karbon kuartener C-1 (dC 132,5). Enam karbon pada cincin A teridentifikasi melalui sinyal-sinyal pada;  (dC 109,0, 162,6, 156,4, 154,1 dan 162,4) kelimanya menunjukkan karbon kuartener yaitu 1’, 2’, 3’, 4’, 6’ dan satu karbon tertier 5’ (dC 99,5). Sinyal karbon karbonil terdapat pada  (dC  192,8),  dan (dC 61,4 dan 61,5)  menunjukkan dua karbon pada OCH3, sinyal pada (dC 142,3 dan 126,3) masing-masing untuk Ca dan Cß.    Berdasarkan analisis data spektrum  maka dapat disimpulkan bahwa senyawa isolat adalah  2’4’- Dihidroksi-3’,6’- trimetoksikal-kon.           Gambar 1. 2’,4’-Dihidroksi-3’, 6’- dimetoksikalkon  Tabel 1. Data NMR senyawa isolat          No                 dH                                 dC      1             -          132,5 2/6   7,63 ( 2H, d  )         128,4 3/5   7,42 ( 2H, m )         128,9   4   7,41 ( 1H, m )         130,3   1’            -          109,0   2’            -          162,7   3’            -          156,4   4’            -                    154,1   5’     6,36 (1H, s)           99,5   6’            -          162,7   Ca    7,92 (1H, d)            142,3   C ß       7,83 (1H, d)         126,3  2’-OH  13,60 (1H, s)             -  3’- OCH3     3,94  (3H, s)           61,4 6’- OCH3     3,89 (3H, s)           61,5  C=O            -          192,82  Tabel 2. Hasil Ujibioakti vitas menggunakan bakteri E.coli   Sampel: Senyawa C.1 Bakteri Uji: E. coli     1 = Kontrol (+) amoxicillin 2000 mg/mL                   2 = Kontrol (+) amoxicillin 1000mg/mL                               3 = sample H.C 2000 mg/mL                   4 = Sampel H.C 1000 mg/mL     5 = kontrol (-) etil asetat Zona Hambat: 1 = 12 mm 2 = 10 mm 3 =   9 mm 4 =   7 mm 5 =   0 mm Jadi prosentase (%) keaktifan:          (St+ Sr )  -  ( Bt + Br ) log ? =                                        log   dt/dr          (St + Bt)  -   ( Sr + Br)   OOHH3COHO OCH31234561'2'3'4'5'6'A BBerkala MIPA, 16(1), Januari 2006  40 (09 + 07 ) - ( 12 + 10 )           log ? =                                      log 2000/1000  (09 + 12)  -   ( 07 + 09)     (16 - 22 )    log ? =                    log   2                       (21 + 16)   ? = 0,1249  x 100 =  35,4 %  4. KESIMPULAN   Berdasarkan data spektroskopi sebagaimana diuraikan di atas, maka ditetapkan bahwa senyawa isolat yang didapatkan adalah jenis calkon, yakni 2’,4’-Dihidroksi-3’,6’-dimetoksikalkon.  Senyawa tersebut bersifat anti bakteri dan pertama kalinya ditemukan dalam tumbuhan Cryptocarya.  DAFTAR PUSTAKA  Kostermans,A.J.G.H.,1957,  Lauraceae, Comm. Forest Res.Inst. Indonesia, 57, 1-64 Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia, Yayasan Sarana Wanajaya, Jakarta,  Ahmad,  S.A. ,  2004,  Empat    Puluh   Tahun   Dalam   Kimia Organik  Bahan  Alam Tumbuh-tumbuhan Tropika Indonesia, Rekoleksi dan Prospek. Bulletin of The Indonesian Society of Natural Products Chemistry,Vol.4, No.2., 5 – 54. Hakim, E.H.,   Achmad, S.A.,   Buchari   dan   Pramu-tadi, S., 1994, Ilmu Kimia Tumbuhan Lauraceae Indonesia, XI;  Alkaloid Aporfin dan Oksoaporfin dari Litsea Excelsa, Proceedings ITB, Bandung Vol.27, No.3.  Dumontet, V.,   Hung, N.V.,   Adeline,  M.T.,  Riche, C., Chiaroni, A., Seven, T. dan Gueritte, F., 2004, Cytotoxic Flavonoids and a-pyrones from Cryptocarya  obovata J. Nat. Prod. 67,  858 – 862. Bick, I.R.C., Sevenet, T., Sinchai, W., Skelton, B., White Allen H., 1981, Alcaloids  of    Cryptocarya longifolia. Aust. J. Chem., 34 (1),  477 – 481  Bishara, R.H., Schiff, P.L., 1970, The isolation of Some Sterols and Protocatheuic acid  from Cryptocarya faveolata . Lyodia , 33 (4),  477-481. Fu, X., Sevenet, T., Remy, F., Pais, M., Hadi, A.H., Zeng, L.M., 1993, Flavanone and Chalcone derivatives from Cryptocarya kurzii. J. Nat. Prod. 56 (7), 1153. Collins, D.J.,  Culvenor, C.C.J.,  Lamberton, J.A.,  Loder, J.W.,  Price, J.R., 1990, Plants for Medicine. CSIRO, Melborne, Australia. Joseph,  H., Dori, J. L., Sterling, J.T., Jack R.C., 1978,      Cryptopleurine, cytotoxic agent from  Boehmeria caudata  (Urticaceae)  and Cryptocarya  laevigata (Lauraceae), Phytochemistry,  17(8),  1448.  Gottlieb,O.R., 1972, Chemosystematik of the Lauraceae,  Phytochemistry, 11, 1537 – 1570. Juliawaty, L.D., Achmad, S.A.,  Makmur, L., akim, E.H., 1993, Investigation of  the Chemical  Constituent    of  Cryptocarya  Laevigata Bl  and   Cryptocarya Nutans and its Relation to the Taxonomy of Lauracea, Biotrop Spec. Publ. No.23,  1-9.   

SENYAWA KALKON BARU BERSIFAT ANTI-BAKTERI DARI TUMBUHAN CRYPTOCARYA COSTATA (LAURACEAE)

https://jurnal.ugm.ac.id/bimipa/article/download/13899/9970

SENYAWA KALKON BARU BERSIFAT ANTI-BAKTERI DARI TUMBUHAN CRYPTOCARYA COSTATA (LAURACEAE)

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

BIMIPA