ABSTRACT: The prevalence of Trypanosoma cruzi in domestic and wild reseroirs in nine localities of the Amalfi town, (Antioquia, Colombia), was determined. Blood samples were tested by hemoculture, xenodiagnosis, and thick smears to determine the percentage of Trypanosoma infection and to evaluate the presence of antibodies against the parasite in these species. Vector activity was previusly reported in households of this minicipality in 1994, followed by the confirmation of presence of the parasite in the vectors. Sixty-three samples from canines and 33 of several other wild animal species like Didelphis marsupialis, Proechymis semiespinosus, Phylander spp., Among other ere collected. The percentage of animals with antibodies against the parasite, measured by ELISA, was 47.6% for dogs and 20% for other wild animals. The parasite was isolated once from a canine blood simple and the identification confirmed by morphology and IFI. In this paper we discuss the results and we suggest the realization of additional studies regarding these aspects.RESUMEN: Se realizó un muestreo mensual durante un año, en nueve veredas del Municipio de Amalfi, Antioquia en reservorios domésticos y silvestres de Trypanosoma cruzi (T. cruzi), con el fin de determinar el porcentaje de infección natural por los métodos de hemocultivo, xenodiagnóstico y gota gruesa; y la presencia de anticuerpos contra el parasito mediante pruebas serológicas en cada una de las especies evaluadas. En este Municipio ya se había reportado, desde 1994, la presencia de vectores llegando a las casas, los cuales fueron encontrados infectados con T. cruzi. Para el presente trabajo se procesaron 63 muestras de perros y 33 de varias especies de animales silvestres como Didelphis marsupialis, Proechymis semiespinosus, Phylander spp., entre otros. El porcentaje de animales con anticuerpos para el parasito, medidos por la técnica de ELISA, fue de 47,6% y 20% para animales domésticos y silvestres respectivamente. De las pruebas parasitológicas realizadas se obtuvo solamente la muestra de un perro positiva por hemocultivo, de la cual se aislaron parásitos que se determinaron por morfología y se probó la presencia de anticuerpos en el suero por las técnicas de ELISA e IFI. Se discuten los resultados y se proponen nuevos estudios