ABSTRACT: The staining technique for the Nucleolar Organizer Regions using silver nitrate known as AgNORs
stain is frequently used as a highly efficient tumor marker in human pathology and with less frequency
in veterinarian pathology.The purpose of this study is to use AgNORs stain as a new technique to
diagnosticate canine breast neoplasias which are consider to be highly frequent in this species. There
were a total of 55 samples used in this study. These samples were obtained from the animal pathology
laboratory archives and from the veterinarian center of the University of Antioquia as well as other
local clinics in the city of Medellín, Colombia. The 55 samples were analyzed using the Hematoxylin-
Eosin stain technique and further classified histopathologically in accordance with guidelines
recommended by the World Health Organization (W.H.O.) thus: Tubular Adenocarcinoma (12), Solid
Adenocarcinoma (13), Papillary Adenocarcinoma (9), Mixed Benign Breast tumors (6) and malignant
(15) were diagnosed. A second cut (4 um) from each sample was stained with silver nitrate to label the
AgNORs. The morphometric posterior analysis was performed using the automatic image analyzer
(AIA). The results were statistically analyzed using the variance analysis (ANOVA) with statistically
p<0.05 value aditionally Fischer (F) test was used. The statistics analysis showed that tubulars
adenocarcinoma have a nuclear area bigger significant statistically (p<0.05) compared with papilars
and solid, while the papilars have AgNORs area smaller than the others types. The benign breast
mixed tumors have nuclear area and AgNORs area smaller significant statistically (p<0.05) than
malignant breast mixed tumors. Both tumors malignant and benign mixed did not present statistics
difference significant with relation to AgNORs numbers.RESUMEN: La técnica de coloración de las Regiones Organizadoras Nucleolares con plata, conocida como
coloración de AgNORs, se ha utilizado frecuentemente como un marcador tumoral eficiente en patología
humana y con menor frecuencia en la patología veterinaria. En este trabajo se utilizó la coloración de
AgNORs como una técnica para el diagnóstico de la neoplasia mamaria canina, considerada como
una de las más frecuentes en esta especie. En el estudio se evaluaron 55 muestras que se obtuvieron de
los archivos del laboratorio de Patología Animal y del Consultorio Veterinario de la Universidad de
Antioquia; así como de otros consultorios de la ciudad de Medellín, Colombia. Las 55 muestras se
colorearon con Hematoxilina -Eosina (H-E), y se clasificaron histológicamente de acuerdo con las
recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud (O.M.S.), así: Adenocarcinoma Tubular
(12), Adenocarcinoma Sólido (13), Adenocarcinoma Papilar (9), Tumor Mixto Mamario benigno (6) y
Tumor Mixto Mamario maligno (15). Un segundo corte de cada muestra se coloreo con plata para
marcar las AgNORs y luego se realizó su análisis morfométrico por medio de un Sistema Automático
Analizador de Imágenes (SAAI). Los resultados obtenidos fueron comparados utilizando el análisis de
varianza (ANOVA), con una significancia de p<0.05, y mediante el test de Fischer (F). El análisis
estadístico mostró que los adenocarcinomas tubulares poseen un área nuclear estadísticamente mayor
(p<0.05) al compararlos con los papilares y los sólidos, a su vez los papilares poseen un área de AgNORs
menor que los otros dos tipos. Los tumores mixtos mamarios benignos poseen áreas nucleares y de
AgNOR significativamente menores (p<0.05), que los tumores mamarios mixtos malignos. Ambos
tumores, no presentaron diferencia estadística significativa con relación al número de AgNORs