富山大学・富医薬博甲第177号・馬躍・2015/09/28・★論文非公開★富山大

馬 躍

富山大学博士（医学）Article富山大学・富医薬博甲第177号・馬躍・2015/09/28・★論文非公開★thesi

馬, 躍

University of Toyama Repository

論  文  要  約 論 文 題 目 The renoprotective effect of shichimotsukokato on hypertension-induced renal dysfunction in spontaneously hypertensive rats （自然発症高血圧ラットにおける七物降下湯の腎保護作用) Yue Ma Department of Japanese Oriental Medicine, Graduate School of Medicine and Pharmaceutical Sciences, University of Toyama要 旨  【目的】 慢性腎臓病 (chronic kidney disease; CKD) の原因には糖尿病性腎症、慢性腎炎、腎硬化症などがあり、その罹患率は先進諸国で増加の一途を辿っている。CKD患者の予後には心血管疾患の合併の関与が大きいため、生活習慣病の管理や心血管疾患の早期発見と治療が重要である。高血圧はCKDの主要な原因疾患であり、今後も腎硬化症は増加すると予想されるため、高血圧の管理はCKDの予防と治療において最も重要と考えられる。 漢方方剤・七物降下湯は、本邦では高血圧に伴う随伴症状（のぼせ、肩こり、耳鳴、頭重）に効能・効果があり、医療用医薬品として使用されている。本処方はこれまでに、食塩誘発性高血圧ラットを用いた実験で腎保護作用を有することや、脳卒中易発症自然発症高血圧ラットを用いた実験で降圧作用を示すことが報告されているが、その機序は十分に解明されていない。そこで、七物降下湯のCKD、特に腎硬化症の進行抑制作用とその機序の解明を目的に、自然発症高血圧ラット(spontaneously hypertensive rat; SHR)を用いて実験を行った。  【方法】  7種類の生薬を一定の比率（芍薬：当帰：黄耆：地黄：川芎：釣藤鈎：黄柏＝4：4：3：3：3：3：2）で混合し、全生薬100 gに500 mLの水を加え、50分間加熱還流を行い、煎液を濾過後、凍結乾燥により七物降下湯エキスを作製した。 8週齢の雄性SHRを2週間の適応飼育の後、無作為に4群に分け8週間飼育した。即ち、①コントロール群、②高用量七物降下湯群(0.45 g/kg/day)、③低用量七物降下湯群(0.15 mg/kg/day)、陽性対照薬として④テルミサルタン群(0.01g/kg/day)、さらにはSHRの対照としてWister-Kyotoラットを⑤WKY群とした (n=6/group)。薬剤は carboxymethyl cellulose sodium saltで溶解し胃管より強制投与した。コントロール群とWKY群には carboxymethyl cellulose sodium saltのみを投与した。すべての群に普通飼料を与えた。血圧は2週間毎に測定し、実験飼育開始4週後と8週後に代謝ケージを用いて1日の蓄尿サンプルを採取した。実験飼育終了後、pentobarbital sodium saltを腹腔内投与し深麻酔下で安楽死させ、血液サンプルと両腎を採取した。摘出腎から速やかに腎皮質組織を採取し、測定までの間、-80°Cで保管した。 採取した血液サンプルより、アルブミン、尿素窒素、クレアチニンを、尿サンプルより1日アルブミン量、クレアチニンを測定し、クレアチニンクリアランスを算出した。 ウエスタンブロット法により、糸球体スリット膜の構成蛋白である nephrinとpodocinの発現、近位尿細管におけるアルブミン再吸収に関与する蛋白である cubilin、megalinならびに近位尿細管細胞のエンドソーム内の酸性化に関与する蛋白であるClC-5とv-H+-ATPaseの発現を評価した。  【結果】 ①実験期間中の飼料摂取量は各群の間で差はなく、実験飼育終了時点でのSHRの各群間の体重と体重あたりの腎重量に差はみられなかった。 ②各七物降下湯群とテルミサルタン群は実験飼育開始 6週目以降、血圧はコントロール群よりも有意に低下した。 ③実験飼育8週の時点での1日尿量、尿中ナトリウム、血清アルブミン、尿素窒素、クレアチニン、ならびにクレアチニンクリアランスは、SHRの各群間で差はみられなかった。 ④尿中アルブミンは実験飼育開始 4 週後、8 週後のいずれにおいても、各七物降下湯群とテルミサルタン群はコントロール群よりも有意に低値を示した。 ⑤Nephrinとpodocinの蛋白発現は腎障害の進行に伴い低下するが、今回の実験ではコントロール群とWKY群との間に差はみられなかった。Podocinについては、各七物降下湯群はコントロール群より有意に高い発現を認めた。 ⑥Cubilinとmegalinの蛋白発現は、コントロール群とWKY群との間に差はなかった。Cubilinについては、各七物降下湯群はコントロール群よりも有意に発現が亢進していた。 ⑦ClC-5 蛋白の発現において、コントロール群は WKY 群よりも有意に低値であった。各七物降下湯群とテルミサルタン群はいずれもコントロール群よりも有意に高く、またテルミサルタン群は各七物降下湯群よりも有意に高い発現を示した。 ⑧V-H+-ATPase 蛋白の発現は腎障害の進行に伴い低下するが、今回の実験ではコントロール群とWKY群との間に差はみられなかった。  【結論】 SHRにおいて七物降下湯は血圧上昇抑制作用と尿中アルブミン分泌抑制作用を有し、腎保護作用の機序として少なくともClC-5の発現低下に対する抑制作用の関与が示唆された。   文献   Yue Ma, Makoto Fujimoto, Hidetoshi Watari, Mari Kimura and Yutaka Shimada: The renoprotective effect of shichimotsukokato on hypertension-induced renal dysfunction in spontaneously hypertensive rats. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (submitted).   

The renoprotective effect of shichimotsukokato on hypertension-induced renal dysfunction in spontaneously hypertensive rats

https://toyama.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=5131&item_no=1&attribute_id=18&file_no=2

自然発症高血圧ラットにおける七物降下湯の腎保護作用

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

University of Toyama Repository