Penentuan spesifisitas substrat enzim selulase dari bakteri Bacillus subtilis SF01 dengan metode KLT- densitometri

Bacillus subtilis SF01 adalah bakteri selulolitik yang diisolasi dari ampas tebu. Pengujian penentuan spesifisitas substrat dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis untuk menentukan jenis selulase (Endo β-1,4-glukanase, Ekso β-1,4-glukanase, β-1,4-glukosidase) dari enzim selulase asal isolat Bacillus subtilis SF01. Penelitian ini dilakukan dengan metode KLT menggunakan plat silika gel 60 F254, sistem eluen terpilih butanol : asam asetat : air (2:1:1) dan penampak bercak alfa naftol dilanjutkan densitometeri. Hasil KLT hidrolisis substrat CMC Na memberikan nilai Rf 0,322; 0,395; 0,425 dan avicel PH 101 memberikan nilai Rf 0,320; 0,393; 0,420; 0,494 yang lebih rendah daripada nilai Rf standar glukosa (0,538), sedangkan nilai Rf pada hidrolisis p-NPG oleh selulase SF01 memberikan hasil nilai Rf 0,761 yang melebihi glukosa. Pengamatan lanjutan menggunakan TLC Scanner 3 pada lintasan ekstrak kasar enzim dan produk hidrolisis CMC Na memberikan hasil adanya spektrum milik produk hidrolisis ekstrak kasar pada substrat. Simpulan dari data yang diperoleh selulase dari isolat bakteri Bacillus subtilis SF01 termasuk enzim Endo β-1,4-glukanase dan Ekso β-1,4-glukanase

Penentuan spesifisitas substrat enzim selulase dari bakteri Bacillus subtilis SF01 dengan metode KLT- densitometri

Bacillus subtilis SF01 adalah bakteri selulolitik yang diisolasi dari ampas tebu. Pengujian penentuan spesifisitas substrat dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis untuk menentukan jenis selulase (Endo β-1,4-glukanase, Ekso β-1,4-glukanase, β-1,4-glukosidase) dari enzim selulase asal isolat Bacillus subtilis SF01. Penelitian ini dilakukan dengan metode KLT menggunakan plat silika gel 60 F254, sistem eluen terpilih butanol : asam asetat : air (2:1:1) dan penampak bercak alfa naftol dilanjutkan densitometeri. Hasil KLT hidrolisis substrat CMC Na memberikan nilai Rf 0,322; 0,395; 0,425 dan avicel PH 101 memberikan nilai Rf 0,320; 0,393; 0,420; 0,494 yang lebih rendah daripada nilai Rf standar glukosa (0,538), sedangkan nilai Rf pada hidrolisis p-NPG oleh selulase SF01 memberikan hasil nilai Rf 0,761 yang melebihi glukosa. Pengamatan lanjutan menggunakan TLC Scanner 3 pada lintasan ekstrak kasar enzim dan produk hidrolisis CMC Na memberikan hasil adanya spektrum milik produk hidrolisis ekstrak kasar pada substrat. Simpulan dari data yang diperoleh selulase dari isolat bakteri Bacillus subtilis SF01 termasuk enzim Endo β-1,4-glukanase dan Ekso β-1,4-glukanase