Disk diffusion method for fluconazole susceptibility testing of Candida spp. isolates

Fil: Rodero, L. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Córdoba, Susana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Vivot, W. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Campo, M. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Corfield, P. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Olguín, C. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Cuirolo, A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Soria, M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Guelfand, L. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Canteros, C. E. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Davel, Graciela Odelsia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Red de Vigilancia de la Resistencia a los Antimicrobianos WHONET; Argentina.Se estudiaron 1193 aislamientos clínicos para estandarizar y evaluar un método de difusión con discos de fluconazol de lectura visual, que permita detectar levaduras sensibles al antifúngico. Las especies analizadas fueron: Candida albicans (n=584), Candida parapsilosis (n=196), Candida tropicalis (n=200), Candida glabrata (n=113), Candida krusei (n=50), Candida spp. y otras levaduras oportunistas (n=50). Los discos fueron manufacturados en el INEIANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”. Se midieron los halos de inhibición del crecimiento producidos por fluconazol y la concentración inhibitoria mínima (CIM) por el método de referencia M27-A2 modificado por EUCAST. Se establecieron los valores de corte del método de difusión en: ³ 16 mm para levaduras sensibles a fluconazol (CIM £ 8 μg/ml), entre 9 y 15 mm para sensibles dependientes de la dosis (CIM = 16-32 mg/ml) y £ 8 mm para resistentes (CIM ³ 64 μg/ml). El método de difusión tuvo 94,7% de concordancia con el de referencia, con 0,2% de errores very major y 0,3% de errores major. La reproducibilidad inter e intralaboratorio fue muy buena. Para detectar aislamientos sensibles a fluconazol, este método resulta confiable y de bajo costo; sin embargo, es conveniente que los aislamientos con halos £ 15 mm sean reevaluados por el método de referencia. (EN) In order to standardize and evaluate a disk diffusion method with visual reading to detect in vitro fluconazole susceptibility of yeast, 1193 clinical isolates were tested. These included 584 Candida albicans, 196 Candida parapsilosis, 200 Candida tropicalis, 113 Candida glabrata, 50 Candida krusei and 50 Candida spp. and other opportunistic yeasts. The disks were manufactured in the INEI-ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”. The disk diffusion method results were compared to MIC results obtained by the reference CLSI M27-A2 broth microdilution method modified by EUCAST. The interpretative breakpoints for in vitro susceptibility testing of fluconazole were established at: zone diameter ³ 16 mm for MIC £ 8 μg/ml (susceptible isolates), between 9 and 15 mm for MIC = 16-32 mg/ml (susceptible dose-dependent isolates), and £ 8 mm for MIC ³ 64 μg/ml (resistant isolates). Overall agreement between the two methods was 94.7%, with 0.2% very major errors, and 0.3% major errors. Inter - and intralaboratory agreement was good. The disk diffusion method for drug susceptibility testing of Candida spp. isolates is inexpensive, reliable and reproducible. However, when the inhibition zone diameter is £ 15 mm, it is advisable to test the isolate by the reference microdilution method

Disk diffusion method for fluconazole susceptibility testing of Candida spp. isolates

Fil: Rodero, L. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Córdoba, Susana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Vivot, W. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Campo, M. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Corfield, P. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Olguín, C. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Cuirolo, A. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Soria, M. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Guelfand, L. Universidad Católica Argentina. Cátedra de Microbiología; Argentina.Fil: Canteros, C. E. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Davel, Graciela Odelsia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Departamento de Micología; Argentina.Fil: Red de Vigilancia de la Resistencia a los Antimicrobianos WHONET; Argentina.Se estudiaron 1193 aislamientos clínicos para estandarizar y evaluar un método de difusión con discos de fluconazol de lectura visual, que permita detectar levaduras sensibles al antifúngico. Las especies analizadas fueron: Candida albicans (n=584), Candida parapsilosis (n=196), Candida tropicalis (n=200), Candida glabrata (n=113), Candida krusei (n=50), Candida spp. y otras levaduras oportunistas (n=50). Los discos fueron manufacturados en el INEIANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”. Se midieron los halos de inhibición del crecimiento producidos por fluconazol y la concentración inhibitoria mínima (CIM) por el método de referencia M27-A2 modificado por EUCAST. Se establecieron los valores de corte del método de difusión en: ³ 16 mm para levaduras sensibles a fluconazol (CIM £ 8 μg/ml), entre 9 y 15 mm para sensibles dependientes de la dosis (CIM = 16-32 mg/ml) y £ 8 mm para resistentes (CIM ³ 64 μg/ml). El método de difusión tuvo 94,7% de concordancia con el de referencia, con 0,2% de errores very major y 0,3% de errores major. La reproducibilidad inter e intralaboratorio fue muy buena. Para detectar aislamientos sensibles a fluconazol, este método resulta confiable y de bajo costo; sin embargo, es conveniente que los aislamientos con halos £ 15 mm sean reevaluados por el método de referencia. (EN) In order to standardize and evaluate a disk diffusion method with visual reading to detect in vitro fluconazole susceptibility of yeast, 1193 clinical isolates were tested. These included 584 Candida albicans, 196 Candida parapsilosis, 200 Candida tropicalis, 113 Candida glabrata, 50 Candida krusei and 50 Candida spp. and other opportunistic yeasts. The disks were manufactured in the INEI-ANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”. The disk diffusion method results were compared to MIC results obtained by the reference CLSI M27-A2 broth microdilution method modified by EUCAST. The interpretative breakpoints for in vitro susceptibility testing of fluconazole were established at: zone diameter ³ 16 mm for MIC £ 8 μg/ml (susceptible isolates), between 9 and 15 mm for MIC = 16-32 mg/ml (susceptible dose-dependent isolates), and £ 8 mm for MIC ³ 64 μg/ml (resistant isolates). Overall agreement between the two methods was 94.7%, with 0.2% very major errors, and 0.3% major errors. Inter - and intralaboratory agreement was good. The disk diffusion method for drug susceptibility testing of Candida spp. isolates is inexpensive, reliable and reproducible. However, when the inhibition zone diameter is £ 15 mm, it is advisable to test the isolate by the reference microdilution method

Antimicrobial resistance in bacterial isolates from companion animals in Buenos Aires, Argentina: 2011–2017 retrospective study

The widespread use of antimicrobial therapy in companion animals could lead to increased levels of resistance. Monitoring these levels is critical to understand not only the zoonotic threat of resistant bacteria but also the interspecies transmission of resistance mechanisms. However, data on resistance levels in companion animals of urban areas in Latin America are lacking. In this retrospective study, we analysed 23,922 isolates recovered from clinical samples of dogs and cats between 2011 and 2017. Growing trends of resistance to fluoroquinolones were observed in most bacterial species of veterinary importance with zoonotic potential (Enterobacterales, Pseudomonas and Staphylococcus). Furthermore, an increase of resistance levels to third-generation cephalosporins was also detected in Enterobacterales. Currently, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus spp. and Streptococcus spp. did not seem to represent a clinical challenge. A high proportion of multidrug-resistant (MDR) Enterobacterales isolated from urine was reported. It is interesting to outline that resistance to amikacin was exceptional. This study might be considered as a baseline for prospective antimicrobial resistance surveillance in companion animals in our region.Fil: Rumi, María Valeria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Investigaciones En Bacteriologia y Virologia Molecular; ArgentinaFil: Nuske, Ezequiel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Investigaciones En Bacteriologia y Virologia Molecular; ArgentinaFil: Mas, Javier Diego. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Laboratorio de Análisis Clínico Diagnotest; ArgentinaFil: Argüello, Andrea. Laboratorio de Análisis Clínico Diagnotest; ArgentinaFil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Investigaciones En Bacteriologia y Virologia Molecular; ArgentinaFil: Di Conza, José Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Investigaciones En Bacteriologia y Virologia Molecular; Argentin

Monitoring antibiotic resistance in Argentina. The WHONET program, 1995-1996

Fil: Rossi, Alicia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Tokumoto, Marta. Fundación Favaloro. Instituto de Cirugía Cardiovascular; Argentina.Fil: Galas, Marcelo F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Soloaga, Rolando. Fundación Favaloro. Instituto de Cirugía Cardiovascular; Argentina.Fil: Corso, Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Red Nacional de Laboratorios que participan en el Programa WHONET; Argentina.La Organización Mundial de la Salud ha puesto en marcha un programa para la vigilancia de la resistencia a los antibacterianos, denominado WHONET, que se desarrolló en Argentina mediante una red de 23 laboratorios de instituciones hospitalarias públicas y privadas someti-dos a programas nacionales e internacionales de control de calidad. Entre enero de 1995 y di-ciembre de 1996 se determinó por el método de difusión en agar la sensibilidad a los antibacte-rianos de 16 073 aislados clínicos consecutivos, siguiendo las recomendaciones del Comité Nacional de Estándares para Laboratorios Clínicos (National Committee for Clinical Labo-ratory Standards:NCCLS) de los Estados Unidos de América. Más de la mitad de los aisla-dos urinarios de Escherichia colifueron resistentes a la ampicilina, y más de 30% a la trime-toprima-sulfametoxazol. Cuando se comparó la sensibilidad de los aislados urinarios de pacientes ambulatorios y hospitalizados, se observó una marcada diferencia en los perfiles de actividad (porcentaje de microorganismos resistentes aislados en pacientes hospitalizados frente a pacientes ambulatorios) de la gentamicina (8% frente a 2%), la norfloxacina (6% frente a 2%) y las cefalosporinas de tercera generación (18% frente a 10%). Los aislados de Klebsiella pneumoniaerecuperados de hemocultivos presentaron resistencia a las cefalospo-rinas de tercera generación y a la gentamicina en 71 y 60% de los casos, respectivamente. La proporción de Staphylococcus aureusresistentes a la oxacilina fue de 39%. Cerca de la mitad de los aislados de Enterococcusspp. presentaron resistencia de alto nivel a los aminoglucósi-dos, pero no se detectó resistencia a los glicopéptidos. En nuestro medio, la ampicilina y la tri-metoprima-sulfametoxazol no fueron apropiadas para el tratamiento de las diarreas; Shigella flexneripresentó mayor porcentaje de aislados resistentes a ambos fármacos (87 y 74%, res-pectivamente) que Shigella sonnei(47 y 71%, respectivamente). Se detectó resistencia a las cefalosporinas de tercera generación en 40% de los aislados de Salmonella spp. recuperados en hospitales pediátricos. En casos de meningitis bacteriana, las tasas de resistencia de Strep-tococcus pneumoniaea la penicilina (18%) y de Haemophilus influenzaea la ampicilina (19%) se situaron en el rango intermedio de las descritas en países americanos y europeos

Monitoring antibiotic resistance in Argentina. The WHONET program, 1995-1996

Fil: Rossi, Alicia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Tokumoto, Marta. Fundación Favaloro. Instituto de Cirugía Cardiovascular; Argentina.Fil: Galas, Marcelo F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Soloaga, Rolando. Fundación Favaloro. Instituto de Cirugía Cardiovascular; Argentina.Fil: Corso, Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Red Nacional de Laboratorios que participan en el Programa WHONET; Argentina.La Organización Mundial de la Salud ha puesto en marcha un programa para la vigilancia de la resistencia a los antibacterianos, denominado WHONET, que se desarrolló en Argentina mediante una red de 23 laboratorios de instituciones hospitalarias públicas y privadas someti-dos a programas nacionales e internacionales de control de calidad. Entre enero de 1995 y di-ciembre de 1996 se determinó por el método de difusión en agar la sensibilidad a los antibacte-rianos de 16 073 aislados clínicos consecutivos, siguiendo las recomendaciones del Comité Nacional de Estándares para Laboratorios Clínicos (National Committee for Clinical Labo-ratory Standards:NCCLS) de los Estados Unidos de América. Más de la mitad de los aisla-dos urinarios de Escherichia colifueron resistentes a la ampicilina, y más de 30% a la trime-toprima-sulfametoxazol. Cuando se comparó la sensibilidad de los aislados urinarios de pacientes ambulatorios y hospitalizados, se observó una marcada diferencia en los perfiles de actividad (porcentaje de microorganismos resistentes aislados en pacientes hospitalizados frente a pacientes ambulatorios) de la gentamicina (8% frente a 2%), la norfloxacina (6% frente a 2%) y las cefalosporinas de tercera generación (18% frente a 10%). Los aislados de Klebsiella pneumoniaerecuperados de hemocultivos presentaron resistencia a las cefalospo-rinas de tercera generación y a la gentamicina en 71 y 60% de los casos, respectivamente. La proporción de Staphylococcus aureusresistentes a la oxacilina fue de 39%. Cerca de la mitad de los aislados de Enterococcusspp. presentaron resistencia de alto nivel a los aminoglucósi-dos, pero no se detectó resistencia a los glicopéptidos. En nuestro medio, la ampicilina y la tri-metoprima-sulfametoxazol no fueron apropiadas para el tratamiento de las diarreas; Shigella flexneripresentó mayor porcentaje de aislados resistentes a ambos fármacos (87 y 74%, res-pectivamente) que Shigella sonnei(47 y 71%, respectivamente). Se detectó resistencia a las cefalosporinas de tercera generación en 40% de los aislados de Salmonella spp. recuperados en hospitales pediátricos. En casos de meningitis bacteriana, las tasas de resistencia de Strep-tococcus pneumoniaea la penicilina (18%) y de Haemophilus influenzaea la ampicilina (19%) se situaron en el rango intermedio de las descritas en países americanos y europeos

Método de difusión con discos para la determinación de sensibilidad a fluconazol en aislamientos de Candida spp Disk diffusion method for fluconazole susceptibility testing of Candida spp. isolates

Se estudiaron 1193 aislamientos clínicos para estandarizar y evaluar un método de difusión con discos de fluconazol de lectura visual, que permita detectar levaduras sensibles al antifúngico. Las especies analizadas fueron: Candida albicans (n=584), Candida parapsilosis (n=196), Candida tropicalis (n=200), Candida glabrata (n=113), Candida krusei (n=50), Candida spp. y otras levaduras oportunistas (n=50). Los discos fueron manufacturados en el INEI-ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán". Se midieron los halos de inhibición del crecimiento producidos por fluconazol y la concentración inhibitoria mínima (CIM) por el método de referencia M27-A2 modificado por EUCAST. Se establecieron los valores de corte del método de difusión en: &#8805;16 mm para levaduras sensibles a fluconazol (CIM &#8804; 8 µg/ml), entre 9 y 15 mm para sensibles dependientes de la dosis (CIM = 16-32 mg/ml) y &#8804; 8 mm para resistentes (CIM &#8805; 64 µg/ml). El método de difusión tuvo 94,7% de concordancia con el de referencia, con 0,2% de errores very major y 0,3% de errores major. La reproducibilidad inter e intralaboratorio fue muy buena. Para detectar aislamientos sensibles a fluconazol, este método resulta confiable y de bajo costo; sin embargo, es conveniente que los aislamientos con halos &#8804; 15 mm sean reevaluados por el método de referencia.<br>In order to standardize and evaluate a disk diffusion method with visual reading to detect in vitro fluconazole susceptibility of yeast, 1193 clinical isolates were tested. These included 584 Candida albicans, 196 Candida parapsilosis, 200 Candida tropicalis, 113 Candida glabrata, 50 Candida krusei and 50 Candida spp. and other opportunistic yeasts. The disks were manufactured in the INEI-ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán". The disk diffusion method results were compared to MIC results obtained by the reference CLSI M27-A2 broth microdilution method modified by EUCAST. The interpretative breakpoints for in vitro susceptibility testing of fluconazole were established at: zone diameter &#8805; 16 mm for MIC &#8804; 8 µg/ml (susceptible isolates), between 9 and 15 mm for MIC = 16-32 mg/ml (susceptible dose-dependent isolates), and &#8804; 8 mm for MIC &#8805; 64 µg/ml (resistant isolates). Overall agreement between the two methods was 94.7%, with 0.2% very major errors, and 0.3% major errors. Inter - and intralaboratory agreement was good. The disk diffusion method for drug susceptibility testing of Candida spp. isolates is inexpensive, reliable and reproducible. However, when the inhibition zone diameter is &#8804; 15 mm, it is advisable to test the isolate by the reference microdilution method

rmtD2, a new allele of a 16S rRNA methylase gene, has been present in Enterobacteriaceae isolates from Argentina for more than a decade

Fil: Tijet, Nathalie. Public Health Laboratories. Ontario Agency for Health Protection and Promotion; Canadá.Fil: Andres, Patricia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Chung, Catherine. Public Health Laboratories. Ontario Agency for Health Protection and Promotion; Canadá.Fil: Lucero, Celeste. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Grupo WHONET; Argentina.Fil: Low, Donald E. Public Health Laboratories. Ontario Agency for Health Protection and Promotion; Canadá.Fil: Galas, Marcelo F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Corso, Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Petroni, Alejandro. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio Antimicrobianos; Argentina.Fil: Melano, Roberto. Public Health Laboratories. Ontario Agency for Health Protection and Promotion; Canadá.The first allele of a 16S rRNA methyltransferase gene, rmtD2, conferring very high resistance to all clinically available aminoglycosides, was detected in 7/1,064 enterobacteria collected in 2007. rmtD2 was located on a conjugative plasmid in a Tn2670-like element inside a structure similar to that of rmtD1 but probably having an independent assembly. rmtD2 has been found since 1996 to 1998 mainly in Enterobacter and Citrobacter isolates, suggesting a possible reservoir in these genera. This presumption deserves monitoring by continuous surveillance

Multiple-Clones of Streptococcus agalactiae harbouring lnuB gene

Fil: Faccone, Diego. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio de Antimicrobianos; Argentina.Fil: Lalonardi, Florencia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio de Antimicrobianos; Argentina.Fil: Abel, Sofia. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio de Antimicrobianos; Argentina.Fil: Machain, Monica. HIGA Hospital Dr. Abraham Piñeyro; Argentina.Fil: Errecalde, L. Hospital Dr. Juan A. Fernandez; Argentina.Fil: Littvik, Ana. Hospital Dr. Guillermo Rawson; Argentina.Fil: Kaufman, Sara. Hospital Dr. Juan A. Fernandez; Argentina.Fil: Galas, Marcelo F. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio de Antimicrobianos; Argentina.Fil: Red de Vigilancia de la Resistencia a los Antimicrobianos. WHONET; Argentina.Fil: Corso, Alejandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas. Servicio de Antimicrobianos; Argentina