Reemergence of Dengue Virus Type 4, French Antilles and French Guiana, 2004–2005

After 10 years of absence, dengue virus type 4 (DENV-4) has recently reemerged in Martinique, Guadeloupe, and French Guiana. Phylogenetic analyses of strains isolated from 2004 to 2005 showed that they belong to DENV-4 genotype II, but to a different cluster than strains isolated from 1993 to 1995

Effet du valproate sur l'expression du génome viral dans les cellules infectées par HTLV-1

L HTLV-1 est l agent étiologique de la TSP/HAM et de l ATL. La TSP/HAM est une méningomyélite chronique d évolution lente et progressive. La charge provirale HTLV-1 est corrélée à l évolutivité de la maladie. La protéine virale Tax module la synthèse et la fonction de multiples protéines de la prolifération et de la survie des lymphocytes T infectés. L expression virale n est pas toujours détectable in vivo. Une modulation épigénétique par inhibiteurs d HDAC a été proposée. Des travaux dans le modèle du BLV et in vitro dans l infection à HTLV-1 ont conforté ce concept et conduit à un essai thérapeutique évaluant le VPA dans le traitement de la TSP/HAM, qui n a pas montré d impact sur la charge provirale. Nous nous sommes intéressés à l effet du VPA sur les lymphocytes T CD4+ en culture, cibles du virus HTLV-1. L expression du génome viral, surtout la balance entre les protéines Tax et HBZ a été étudiée avec ou sans VPA. Son expression serait corrélée à la charge provirale et à l évolution de la TSP/HAM. Nous montrons qu un tiers des cellules CD4+ infectées expriment Tax. Cette proportion augmente sous VPA. La détection de la protéine p19 est augmentée sous VPA. La stimulation par le VPA de la transcription sens du génome viral a été confirmée par quantification des messagers Tax et Gag alors que l expression d HBZ se trouve réprimée sous VPA. Les données cinétiques d expression spontanée d HBZ montrent l existence d un rétrocontrôle négatif exercé par HBZ sur l expression de Tax et des gènes structuraux. Influer sur l expression d HBZ ouvre une voie nouvelle pour le traitement des maladies associées à HTLV-1.HTLV-1 is the etiological agent of HAM/TSP and ATL. TSP/HAM is a chronic meningomyelitis with a course being slow and progressive. HTLV-1 proviral load correlates with disease progression. Tax protein modulates the synthesis and function of proteins involved in the regulation of infected T-lymphocytes proliferation and survival. Viral expression is not always detectable in vivo. An epigenetic modulation by the use of HDAC inhibitors has been proposed. A study in the BLV model and an in vitro study in a HTLV-1 infection have lead to a therapeutic assay in order to assess VPA in the treatment of HAM/TSP. This assay did not show any impact on the proviral load. We evaluated the impact of VPA treatment on viral genome expression in cultured lymphocytes, especially the balance between Tax and HBZ. A third of provirus-positive CD4+ T cells spontaneously became Tax-positive. The estimation rose up to two-thirds of Tax-positive infected cells when VPA was added. VPA enhanced Gag p19 protein release. VPA treatment enhanced and prolonged Tax mRNA expression, while it blocked HBZ expression. Our data are consistent with the hypothesis of a feed-back loop coordinating Tax and HBZ expression. Modulation of HBZ expression may impact the net outcome of VPA treatment on HTLV-1-infected cell proliferation and survival.SCHOELCHER-BU (972332101) / SudocSudocFranceF

Détection, quantification et génotypage de l'ARN du virus de la dengue par RT-PCR en temps réel multiplex

RENNES1-BU Santé (352382103) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Mise au point d'une technique de détection du VHC par RT-PCR en temps réel et comparaison aux tests de RT-PCR classique et TMA

PARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Détection de l'ARN du virus de la dengue par RT-PCR en temps réel

BORDEAUX2-BU Santé (330632101) / SudocSudocFranceF

Effet du valproate sur l'expression du genome viral dans les cellules infectées par HTLV-1

L HTLV-1 est l agent étiologique de la TSP/HAM et de l ATL. La TSP/HAM est une méningomyélite chronique d évolution lente et progressive. La charge provirale HTLV-1 est corrélée à l évolutivité de la maladie. La protéine virale Tax module la synthèse et la fonction de multiples protéines de la prolifération et de la survie des lymphocytes T infectés. L expression virale n est pas toujours détectable in vivo. Une modulation épigénétique par inhibiteurs d HDAC a été proposée. Des travaux dans le modèle du BLV et in vitro dans l infection à HTLV-1 ont conforté ce concept et conduit à un essai thérapeutique évaluant le VPA dans le traitement de la TSP/HAM, qui n a pas montré d impact sur la charge provirale. Nous nous sommes intéressés à l effet du VPA sur les lymphocytes T CD4+ en culture, cibles du virus HTLV-1. L expression du génome viral, surtout la balance entre les protéines Tax et HBZ a été étudiée avec ou sans VPA. Son expression serait corrélée à la charge provirale et à l évolution de la TSP/HAM. Nous montrons qu un tiers des cellules CD4+ infectées expriment Tax. Cette proportion augmente sous VPA. La détection de la protéine p19 est augmentée sous VPA. La stimulation par le VPA de la transcription sens du génome viral a été confirmée par quantification des messagers Tax et Gag alors que l expression d HBZ se trouve réprimée sous VPA. Les données cinétiques d expression spontanée d HBZ montrent l existence d un rétrocontrôle négatif exercé par HBZ sur l expression de Tax et des gènes structuraux. Influer sur l expression d HBZ ouvre une voie nouvelle pour le traitement des maladies associées à HTLV-1.HTLV-1 is the etiological agent of HAM/TSP and ATL. TSP/HAM is a chronic meningomyelitis with a course being slow and progressive. HTLV-1 proviral load correlates with disease progression. Tax protein modulates the synthesis and function of proteins involved in the regulation of infected T-lymphocytes proliferation and survival. Viral expression is not always detectable in vivo. An epigenetic modulation by the use of HDAC inhibitors has been proposed. A study in the BLV model and an in vitro study in a HTLV-1 infection have lead to a therapeutic assay in order to assess VPA in the treatment of HAM/TSP. This assay did not show any impact on the proviral load. We evaluated the impact of VPA treatment on viral genome expression in cultured lymphocytes, especially the balance between Tax and HBZ. A third of provirus-positive CD4+ T cells spontaneously became Tax-positive. The estimation rose up to two-thirds of Tax-positive infected cells when VPA was added. VPA enhanced Gag p19 protein release. VPA treatment enhanced and prolonged Tax mRNA expression, while it blocked HBZ expression. Our data are consistent with the hypothesis of a feed-back loop coordinating Tax and HBZ expression. Modulation of HBZ expression may impact the net outcome of VPA treatment on HTLV-1-infected cell proliferation and survival.SCHOELCHER-BU (972332101) / SudocSudocFranceF

Evaluation de la détection de l'antigène NS1 dans le diagnostic biologique précoce de la dengue

RENNES1-BU Santé (352382103) / SudocLYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Quantification par PCR en temps réel de la charge provirale HRLV-1 et application à l'étude des malaldies associées

Nous avons mis au point une méthode de quantification de la charge provirale HTLV-1 par PCR en temps réel et appliqué cette analyse à l'étude de la paraparésie spastique tropicale associée à ce rétrovirus. La charge provirale sanguine est plus élevée dans la TSP/HAM que dans l'infection asymptomatique,rmais cette analyse n'est pas suffisamment discriminante pour contribuer au diagnostic. Par contre, la charge provirale est encore majorée dans le LCR de TSP/HAM et présente une valeur prédictive permettant de proposer l'ajout de ce paramètre aux critères de diagnostic de la maladie. La TSP/HAM est le syndrome prédominant d'une maladie inflammatoire de système pouvant atteindre le tissu oculaire, salivaire ou alvéolaire. Dans les arthropathies associées à l'HTLV-1, l'augmentation de la charge provirale dans le sang périphérique et davantage encore dans le compartiment synovial plaide en faveur d'une participation d'HTLV-1 au processus arthritique. La charge provirale sanguine est corrélée au profil évolutif de la TSP/HAM, les valeurs étant plus élevées dans les formes d'aggravation rapide. La coinfectipn par le HIV augmenterait le risque de survenue d'une TSP/HAM. Dans notre étude, la charge pro virale HTLV-1 sanguine n'est pas modifiée par la coinfection par l'HIV, mais la proportion de lymphocytes T CD4+ infectés par l'HTLV-1 parait augmentée. La charge provirale serait contrôlée par la réponse CTL avec une efficacité dictée par le polymorphisme HLA. Contrairement aux études dans la population japonaise, nous n'avons pas retrouvé d'association entre allèles HLA et charge provirale ou statut clinique. Une autre application a porté sur l'efficacité de la filtration dans la réduction du contenu pro viral de produits sanguins labiles, les résultats soulignant l'importance de la qualité de la déleucocytation. Enfin, la charge pro virale HTLV-1 est corrélée au pourcentage de lymphocytes atypiques dans l'ATL et pourrait être appliquée au suivi de la maladie résiduelle.PARIS7-Bibliothèque centrale (751132105) / SudocSudocFranceF

Diagnostic de la leptospirose par PCR en temps réel au centre hospitalier universitaire de Fort-de-France

Traditionnellement, le diagnostic de la leptospirose est basé sur la sérologie. Cette approche nécessite une expertise rarement disponible dans les laboratoires d analyses médicales et donne un diagnostic retardé. Merien et al. ont développé une PCR en temps réel basée sur la chimie SYBR Green I pour la détection des leptospires pathogènes dans des échantillons de sérum. Dans cette étude, nous décrivons l adaptation de cette PCR en temps réel au Centre Hospitalier Universitaire de Fort-de-France pour le diagnostic précoce de la leptospirose. Des échantillons de sérum provenant de 48 patients cliniquement suspects de leptospirose ont été soumis au test de microagglutination (MAT), à la culture et à la PCR. La PCR en temps réel a confirmé le diagnostic pour 10 patients tandis que le MAT l a confirmé pour 4 patients. L isolement par culture a échoué avec tous les échantillons testés. Entre nos mains, l analyse complète de 10 échantillons a pris moins de 6 heures avec un coût inférieur a 10 EUR par échantillon. Notre étude démontre que cette technique de PCR en temps réel est l outil le plus sensible, le moins cher et le plus rapide pour le diagnostic précoce de la leptospirose.Definitive diagnosis of leptospirosis traditionally depends upon serological tests. This approach requires expertise not routinely available in clinical laboratories and usually results in delayed diagnosis. Merien et al. have developed a real-time PCR assay using SYBR Green I for the detection of pathogenic leptospires in serum specimens. In this study, we report the adaptation of this real-time PCR assay for the early diagnosis of leptospirosis in the Fort-de-France teaching hospital. Serum samples from 48 patients with clinical suspicion of leptospirosis were tested by microscopic agglutination test (MAT), culture and PCR. The real-time PCR assay confirmed the diagnosis for 10 patients whereas the MAT confirmed the diagnosis for 4 patients. The culture failed to isolate leptospires in all tested specimens. In our hands, the total assay time for 10 clinical samples was less than 6 hours with a cost below 10 EUR per specimen. Our study demonstrates that this real time PCR assay is the most sensitive, the cheapest and the most rapid tool for early diagnosis of leptospirosis.CAYENNE-BU (973022101) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF