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Monoclonal antibodies produced against Trypanosoma equiperdum and Trypanosoma evansi recognize both species
Los tripanosomas africanos T. equiperdum y T. evansi son dos especies pat贸genas del caballo con una amplia distribuci贸n en los pa铆ses en 谩reas tropicales y subtropicales de 脕frica, Asia y parte de Europa para los primeros y en 脕frica, Asia y Am茅rica para los segundos. Estas especies son los agentes etiol贸gicos de la Dourina o Morbo Coital Maligno y de la Surra o Derrengadura respectivamente, est谩n morfol贸gica y antig茅nicamente relacionadas. S贸lo es posible diferenciar las dos especies por la sintomatolog铆a cl铆nica y el mecanismo de transmisi贸n de la infecci贸n, la cual es por v铆a coital la primera y por picadura de insectos hemat贸fagos la segunda. Se prepararon hibridomas secretantes de anticuerpos monoclonales contra T. equiperdum y T. evansi. Se us贸 como ant铆genos hidrolizados totales de ambas especies y se inocularon intraperitonealmente en ratones hembras Balb/c, sin adjuvante. De la preparaci贸n de los hibridomas se clonaron y subclonaron siete hibridomas positivos para cada una de las especies de tripanosomas en estudio. Los anticuerpos monoclonales derivados de los hibridomas para ambas especies mostraron tener relativamente bajos t铆tulos, (1:80), ser de la clase IgM, tener una alta reactividad cruzada con ant铆genos de ambas especies y ser incapaces de reaccionar frente ant铆genos separados por electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturantes. Mostraron una adecuada capacidad de reacci贸n frente ant铆genos acoplados a placas de microtitulaci贸n en ensayos de ELISA. Nuestros resultados demuestran y reafirman que ambas especies son antig茅nicamente semejantes, probablemente relacionada con la estructura de la parte glicos铆dica de las prote铆nas variables de superficie. Estos anticuerpos monoclonales pueden ser 煤tiles como herramientas para la identificaci贸n y detecci贸n de estas especies de tripanosomas donde ambas especies no se encuentran en infecciones mixtas (Europa del Este y Am茅rica).82 - 93BimestralThe African trypanosomes T. equiperdum and T. evansi are two pathogenic species in horses with a wide distribution in countries in tropical and subtropical areas of Africa, Asia and part of Europe in the first case and in Africa, Asia and America for the second. These species are the etiological agents of Dourine and Surra or Derrengadera respectively; both are morphologically and antigenically related. It is only possible to differentiate both species by the clinical symptoms and the mechanism of transmission of the infection, which is through coitus for T. equiperdum and by insect bites by hematophagous flies for T. evansi. Secreting hybrids of monoclonal antibodies were prepared against T. equiperdum and T. evansi. They were used a total hydrolyzed antigens for both species and injected in female Balb/c mice intraperitoneally without adjuvant. The hybridomas were cloned and subcloned and seven positive hybridomas were obtained for each trypanosome species. The monoclonal antibodies for both species proved to have relatively low titles (1:80); to be of the IgM class and to have a high cross reactivity with antigens of both species. They were unable to react against separated antigens in western blotting. They reacted appropriately against antigens in ELISA. Our results demonstrate that both species are antigenically very similar, probably due to the structure of the glycosidic moiety of the VSG. These monoclonal antibodies can be useful as tools for the identification and detection of these Trypanosoma species where they do not occur in mixed infections (East Europe and America)