Análisis del papel de la proteína Cinderella en la migración de las células del borde en el ovario de Drosophila melanogaster

Motivación: La migración celular constituye un fenómeno crucial tanto en procesos normales como patológicos, desde el desarrollo embrionario a la metástasis tumoral. Por ello, el avance en el conocimiento de los mecanismos que regulan el fenómeno de migración es de gran relevancia. El ovario de Drosophila melanogaster constituye un buen sistema para el estudio de la migración celular, ya que, durante la maduración de las cámaras ováricas, tiene lugar la delaminación y desplazamiento polarizado de unas células epiteliales llamadas células del borde. Un posible candidato involucrado en esta migración es el gen cinderella. Se ha descrito que Cinderella proporciona una conexión funcional entre adhesiones dinámicas de superficie y cambios del citoesqueleto, durante la migración celular que ocurre en el desarrollo normal del ojo de Drosophila, aunque se desconocen los mecanismos moleculare y celulares por los cuales Cinderella realiza esta función. El objetivo principal de este proyecto es testar si Cinderella se requiere durante la migración de las células del borde y, si este fuera el caso, identificar los mecanismos por los cuales realiza esta función. Métodos: Se han afectado los niveles y la función de Cinderella de manera específica en células del borde mediante la expresión, usando el sistema GAL4/UAS, de RNAis y formas dominantes negativas de la proteína. Se han analizado los fenotipos de migración que las células del borde presentan en estas condiciones experimentales, realizando para ello tinciones inmunohistoquímicas de cámaras ováricas de estadío 10 fijadas.Resultados: Los resultados obtenidos hasta ahora muestran que la disminución de la función de Cinderella en las células del borde produce un retraso en su migración. Así mismo, se ha observado que la expresión de una forma dominante negativa que carece de la región N-terminal, la cual contiene dominios SH3 de unión a cadherinas, es la que produce los fenotipos de migración más fuertes. Conclusiones: Podemos concluir que Cinderella se requiere de manera específica en las células del borde para una migración correcta. El papel que Cinderella pueda tener en dicha migración de las células de borde en el ovario de Drosphila parece estar relacionado con su habilidad para interaccionar con cadherinas, mecanismo que deberá ser estudiado en análisis posteriores

Integrins Cooperate With the EGFR/Ras Pathway to Preserve Epithelia Survival and Architecture in Development and Oncogenesis

Adhesion to the extracellular matrix (ECM) is required for normal epithelial cell survival. Disruption of this interaction leads to a specific type of apoptosis known as anoikis. Yet, there are physiological and pathological situations in which cells not connected to the ECM are protected from anoikis, such as during cell migration or metastasis. The main receptors transmitting signals from the ECM are members of the integrin family. However, although integrin-mediated cell-ECM anchorage has been long recognized as crucial for epithelial cell survival, the in vivo significance of this interaction remains to be weighed. In this work, we have used the Drosophila wing imaginal disc epithelium to analyze the importance of integrins as survival factors during epithelia morphogenesis. We show that reducing integrin expression in the wing disc induces caspase-dependent cell death and basal extrusion of the dead cells. In this case, anoikis is mediated by the activation of the JNK pathway, which in turn triggers expression of the proapoptotic protein Hid. In addition, our results strongly suggest that, during wing disc morphogenesis, the EGFR pathway protects cells undergoing cell shape changes upon ECM detachment from anoikis. Furthermore, we show that oncogenic activation of the EGFR/Ras pathway in integrin mutant cells rescues them from apoptosis while promoting their extrusion from the epithelium. Altogether, our results support the idea that integrins promote cell survival during normal tissue morphogenesis and prevent the extrusion of transformed cells.España MICINN (Nos. BFU2016-80797-R and PID2019-109013GB-100