Direct confocal acquisition of fluorescence from X-gal staining on thick tissue sections

X-gal staining is a common procedure used in the histochemical monitoring of gene expression by light microscopy. However, this procedure does not permit the direct confocal acquisition of images, thus preventing the identification of labelled cells on the depth (Z) axis of tissue sections and leading sometimes to erroneous conclusions in co-localization and gene expression studies. Here we report a technique, based on X-gal fluorescence emission and mathematically-based optical correction, to obtain high quality fluorescence confocal images. This method, combined with immunofluorescence, makes it possible to unequivocally identify X-gal-labelled cells in tissue sections, emerging as a valuable tool in gene expression and cell tracing analysis

Regulation of oxygen sensing by ion channels

O2 sensing is of critical importance for cell survival and adaptation of living organisms to changing environments or physiological conditions. O2-sensitive ion channels are major effectors of the cellular responses to hypoxia. These channels are preferentially found in excitable neurosecretory cells (glomus cells of the carotid body, cells in the neuroepithelial bodies of the lung, and neonatal adrenal chromaffin cells), which mediate fast cardiorespiratory adjustments to hypoxia. O2- sensitive channels are also expressed in the pulmonary and systemic arterial smooth muscle cells where they participate in the vasomotor responses to low O2 tension (particularly in hypoxic pulmonary vasoconstriction). The mechanisms underlying O2 sensing and how the O2 sensors interact with the ion channels remain unknown. Recent advances in the field give different support to the various current hypotheses. Besides the participation of ion channels in acute O2 sensing, they also contribute to the gene program developed under chronic hypoxia. Gene expression of T-type calcium channels is upregulated by hypoxia through the same hypoxiainducible factor-dependent signaling pathway utilized by the classical O2-regulated genes. Alteration of acute or chronic O2 sensing by ion channels could participate in the pathophysiology of human diseases, such as sudden infant death syndrome or primary pulmonary hypertension

Fermentación acética : estudio de las enzimas implicadas en el proceso. Inmovilización en alginato para la mejora de la producción

El trabajo que se recoge en esta memoria se enmarca dentro de la mejora del proceso de acetificación. Este estudio tendrá tres puntos de vista, el microbiológico, el biotecnológico y el bioquímico. Lógicamente puede resultar ser muy amplio, por lo que requiere que se proyecte de una forma sistemática. Para llevar a cabo este trabajo nos hemos marcado los siguientes objetivos: 1º.- Identificaci ón de las bacterias que intervienen en el proceso de la fermentación del vinagre utilizado por la Industria Carbonell S.A. 2º.- Características biológicas de los citados gérmenes. Dentro de estas hay que señalar: A) Los requerimientos fundamentales para su crecimiento y viabilidad. Características cualitativas del medio, con especial atención al contenido de metales y productos utilizados comúnmente en la industria vinícola. B) Condiciones físico-químicas del medio para su crecimiento y viabilidad. Estudios del crecimiento en función de fuerza iónica, pH, temperatura y oxigenación. 3º.- Estudio de las características bioquímicas de las citadas cepas en las distintas condiciones antes descritas. En este estudio se hará una especial atención a las enzimas fundamentales del proceso: alcohol deshidrogenasa y acetaldehído deshidrogenasa. Observando las alteraciones que pueden sufrir estas actividades según los cambios ambientales a los que son sometidas las cepas aisladas. 4º.- Producción de ácido acético por las bacterias aisladas inmovilizadas en alginato y por las enzimas purificadas, responsables de la oxidación de etanol