ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА еNOS КАК ФАКТОР РИСКА РЕСТЕНОЗИРОВАНИЯ В СТЕНТЕ

Background: In recent years more attention is paid to the methods of interventional treatment of coronary artery disease. However, despite the numerous clinical studies the problem of stent restenosis after interventional procedures remains an important one. The studies of the molecular mechanisms of restenosis of coronary arteries and findings for new genetically determined predictors of restenosis after stenting become vital and essential. The NO-synthase influence on the development of endothelial dysfunction is practically assured, but the studies on the NOS genes' polymorphism effect on the incidence rate of in-stent restenosis are isolated and based on a limited number of clinical observations. The determined facts demonstrate the relevance of the conducted study, the results of which formed a new understanding of the role of NO-synthase genes in the predisposition to hyper-proliferative stents in patients with coronary artery disease. Aims: Set association between the eNOS gene polymorphisms and the risk of restenosis in patients with coronary artery disease hospitalized for coronary restenosis.Materials and methods: We examined 484 patients with the verified diagnosis of the ischemic heart disease who underwent treatment at the unit of atherosclerosis and chronic coronary heart disease of «Cardiology Research Institute». Stenting of coronary arteries was performed in 210 people. The group of a restenosis enrolled 60 patients and the group without restenosis — 150. Genotyping was performed by non-enzymatic technique for isolation of genomic DNA from the venous blood of the surveyed, NOS genes' polymorphisms were detected by polymerase chain reaction (PCR). Results: The established development of in-stent restenosis was associated with the following eNOS gene polymorphisms: VNTR ― in homozygotes for the minor allele (genotype aa) and heterozygotes (genotype ab); 894G/T ― in heterozygotes (the GT genotype) and homozygotes (TT genotype).Conclusions: VNTR and 894G/T polymorphisms of eNOS gene are associated with risk for restenosis and can serve as additional markers for risk of restenosis after coronary stenting.Обоснование. В последние годы все больше внимания уделяется интервенционным способам лечения ишемической болезни сердца (ИБС). Однако, несмотря на многочисленные клинические исследования, остается нерешенным вопрос рестенозирования стентов после интервенционных вмешательств. На сегодняшний день становятся актуальными изучение молекулярных механизмов рестенозирования коронарных артерий, а также поиск новых генетически обусловленных предикторов развития рестеноза после стентирования. Воздействие синтаз оксида азота (NO-синтазы) на развитие дисфункции эндотелия не вызывает сомнения, в то же время исследования по изучению влияния полиморфизма генов NOS на вероятность рестенозирования в стенте единичны и основаны на небольшом количестве клинических наблюдений. Вышесказанное свидетельствует об актуальности данного исследования, результаты которого сформировали новые представления о роли генов NO-синтаз в формировании предрасположенности к гиперпролиферации стентов у больных ИБС.Цель исследования: установить ассоциацию полиморфизмов гена eNOS с риском рестенозирования у пациентов с ИБС, госпитализированных по поводу рестеноза коронарных артерий.Методы. В основу данной работы положены результаты целенаправленного обследования 484 пациентов с верифицированным диагнозом ИБС, находившихся на лечении в отделении атеросклероза и хронической ишемической болезни сердца ФГБНУ «Научно-исследовательский институт кариологии» СО РАМН. Стентирование коронарных артерий было проведено у 210 пациентов: в группе рестеноза ― у 60 человек, в группе без рестеноза ― у 150. Исследование генотипа проводили путем выделения геномной ДНК из цельной венозной крови обследуемых по стандартной неэнзиматической методике, а также изучения полиморфизмов генов NOS методом полимеразной цепной реакции.Результаты. Установлено, что развитие рестеноза в стенте ассоциировано со следующими полиморфизмами гена eNOS: VNTR ― у гомозигот по минорному а-аллелю (генотип аа) и гетерозигот (генотип аb); 894G/T ― у гетерозигот (генотип GT) и гомозигот (генотип ТТ). Заключение. Полиморфизмы VNTR и 894G/T гена eNOS ассоциированы с риском развития рестеноза и могут применяться как дополнительные маркеры риска развития рестеноза после стентирования коронарных артерий

ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ (ММП-2, ММП-9, ТИМП-1) ПРИ ЮВЕНИЛЬНЫХ АРТРИТАХ У ДЕТЕЙ

One of the perspectives of modern rheumatology is the study of  matrix metalloproteinases (MMP) in juvenile arthritis - enzymes that play a key role in the process of joint destruction. Aim. To analyse the content of matrix MMP-2 and MMP-9 and their tissue inhibitor (TIMP-1) in blood serum and synovial fluid in various embodiments of juvenile arthritis in children. Patients and Methods.The study involved 82 children with juvenile arthritis, and 20 healthy children. The level of MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 were determined in serum and synovial fluid by ELISA. Results. It was found out that with any form of arthritis serum concentrations of MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 was significantly higher than control values, but the level of MMP-2 in a subset of enthesitis-related arthritis, didn’t differ from the control. Studied parameters in the synovial fluid were much higher than the serum level. With the development of uveitis TIMP-1 in blood serum was lower than in the absence of eye damage. On treatment of patients significant changes in the studied enzymes weren’t established. On a good response to therapy the level of MMP-9 in serum decreased, on the lack of effectiveness – increased. Conclusions. The analysis results  confirm the involvement of MMP-2, MMP-9 and TIMP-1 in the processes of inflammatory changes of the joints in juvenile idiopathic arthritis (JIA) and reactive arthritis, regardless the patients’sex or age. Одним из перспективных направлений современной ревматологии является изучение системы матриксных металлопротеиназ (ММП) при ювенильных артритах — ферментов, играющих ключевую роль в процессах суставной деструкции. Цель: оценить содержание ММП-2 и ММП-9 и их тканевого ингибитора (ТИМП-1) в сыворотке крови и синовиальной жидкости при различных вариантах ювенильного артрита у детей. Пациенты и методы. В исследовании приняли участие 82 ребенка с ювенильными артритам и 20 здоровых детей. Уровень ММП-2, ММП-9 и ТИМП-1 определяли в сыворотке крови и синовиальной жидкости методом ИФА. Результаты. Установлено, что при любой форме артрита сывороточная концентрация ММП-2, ММП-9 и ТИМП-1 достоверно превышала контрольные значения, однако уровень ММП-2 в подгруппе артрита, ассоциированного с энтезитом, не отличался от контрольного. Изучаемые показатели в синовиальной жидкости значительно превышали сывороточный уровень. При развитии увеитов ТИМП-1 в сыворотке крови был ниже, чем при отсутствии поражения глаз. В процессе лечения пациентов достоверных изменений изучаемых ферментов установлено не было. При хорошем ответе на терапию уровень ММП-9 в сыворотке крови снижался, при недостаточной эффективности повышался. Выводы. Полученные данные подтверждают участие ММП-2, ММП-9 и ТИМП-1 в процессах воспалительных изменений суставов при ЮИА и реактивном артрите, независимо от пола и возраста пациентов.

ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК ПРИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭКСТРАКТОМ OPISTHORCHIS FELINEUS IN VITRO

This work shows comparative characteristics of immunogenic properties of the extract of Opisthorchis felineus in different severity of asthma using antigen presenting dendritic cells in vitro. New data on the effect of Opisthorchis felineus on the expression of surface markers of dendritic cells (CD209, HLA-DR, CD83, CD86) were received. Pronounced expression of CD209, CD86 and HLA-DR on the surface of dendritic cells in mild and severe asthma compared with healthy individuals was shown. In the stimulation of dendritic cells with extract Opisthorchis felineus in vitro weakening of CD86 expression in mild and in severe asthma was found. CD86 molecule may be a regulatory factor in the co-stimulation of dendritic cells which allows us to consider it as a potential pharmacological target for the treatment of allergic diseases. Дана сравнительная характеристика иммуногенных свойств экстракта Opisthorchis felineus при бронхиальной астме различной степени тяжести с использованием антигенпрезентирующих дендритных клеток in vitro. Получены новые данные о влиянии Opisthorchis felineus на экспрессию поверхностных маркеров дендритных клеток (CD209, HLA-DR, CD83, CD86). Выявлена более выраженная экспрессия молекул CD209, CD86 и HLA-DR на поверхности дендритных клеток при легкой и тяжелой астме по сравнению с показателями здоровых лиц. В условиях стимуляции дендритных клеток экстрактом Opisthorchis felineus in vitro установлено ослабление экспрессии CD86 как при легкой, так и при тяжелой астме. Молекула CD86 может быть регуляторным фактором в костимуляции дендритных клеток, что позволяет рассматривать ее в качестве возможной фармакологической мишени для терапии аллергических болезней

СОСТАВ СООБЩЕСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ В ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЯХ У ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

This review summarizes the results of studies on the composition of microbial communities in the airways of healthy individuals and patients with asthma. Modern molecular genetic technology of the microbial identification, which are based on a sequence determination of encoding proteins genes conserved regions. These regions form the 16s-subunit ribosomal RNA in microorganisms of different species. These genes are detected by sequencing markers characteristic of individual microorganisms and their phylogenetic groups, and allow to perform a deep analysis of the microbiota in healthy volunteers and patients with chronic bronchoobstructive diseases. So, apparently healthy human bronchial tree is characterized by low bacterial contamination (most typical representatives here are the genera Pseudomonas, Streptococcus, Prevotella, Fusobacteria and Veilonella, much less potentially pathogenic Haemophilus and Neisseria are represented). In bronchial asthma patients the lower respiratory tract microbiota undergoes a qualitative transformation: as compared to healthy individuals the number of Proteobacteria increases and the number of Bacteroidetes decreases. Severe asthma in children is associated with significant respiratory tract Staphylococcus spp. insemination. Association between the asthma developing higher risk in young children and organisms such as Haemophilus, Moraxella and Neisseria spp. It is of considerable interest to determine the role of the microbiome in the development of human diseases of the bronchopulmonary system, and to understand the impact of the microbes communities as a course of disease and the important factor for the development of resistance to therapy.В обзоре обобщены результаты исследований по изучению состава сообщества микроорганизмов в дыхательных путях здоровых лиц и пациентов с бронхиальной астмой. Современные технологии молекулярно-генетической идентификации микроорганизмов основаны на определении последовательности консервативных участков генов, кодирующих белки, которые формируют 16s-субъединицу рибосомальной рибонуклеиновой кислоты микроорганизмов различных видов. Данные гены имеют выявляемые секвенированием маркеры, характерные для отдельных микроорганизмов и их филогенетических групп, и позволяют выполнить глубокий анализ микробиома как у здоровых добровольцев, так и у больных хроническими бронхообструктивными заболеваниями. Так, у практически здорового человека бронхиальное дерево характеризуется низкой бактериальной обсемененностью (наиболее типичными являются представители родов Pseudomonas, Streptococcus, Prevotella, Fusobacteria и Veilonella, значительно реже представлены потенциально патогенные Haemophilus и Neisseria). У больных брон-хиальной астмой микробиота нижних дыхательных путей подвергается качественной трансформации: по сравнению со здоровыми инди-видуумами количество Proteobacteria увеличивается, а Bacteroidetes — уменьшается. Тяжелая бронхиальная астма у детей ассоциирована со значимой обсемененностью дыхательных путей Staphylococcus spp. Также обнаружена ассоциация более высокого риска развития аст-мы у детей раннего возраста и такими микроорганизмами, как Haemophilus, Moraxella и Neisseria spp. Полученные данные представляют значительный интерес как для определения роли микробиома в развитии заболеваний бронхолегочной системы человека, так и для понимания влияния микробиотических сообществ на особенности течения болезни и формирование резистентности к терапии.

Прогностическое значение коморбидной патологии в прогрессировании хронической обструктивной болезни легких в зависимости от фенотипических особенностей заболевания

Background: Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by progressive limitation of airflow rate, hyperergic inflammatory response of the respiratory tract, and systemic manifestations. Prognosis of the disease depends on the severity of these pathogenetic components. FEV1 which characterizes the speed limit airflow do not allow predicting the rate of COPD progression. Aims: comparison of the prognostic significance of such clinical parameters as frequency of exacerbations and the development of comorbid diseases to assess the nature of COPD progression by using different classification approaches. Materials and methods: The prospective comparative study included 98 patients with COPD. In the framework of the study protocol, 2 visits were required when a practitioner recruited patients who met inclusion/exclusion criteria, obtained the signed informed consent, collected the anamnestic data, and performed basic procedures of the study: spirometry, 6-minute stepper test, assessment of dyspnea on questionnaire mMRC, body plethysmography, lung diffusion capacity study, dopplerechocardiography, tomography of the chest. Visit 2 was conducted in 12 months after the first one to assess the dynamics of the disease. The dynamics of the disease was considered negative if, upon repeated examination, the patient was referred to the group with more severe COPD. Results: Our study demonstrates that comprehensive assessment of such factors as the frequency of COPD exacerbations in the preceding 12 months and the presence of comorbid diseases in a patient is reasonable for assessment of disease severity and determination of disease prognosis. At the same time the frequency of COPD exacerbations as one of the evaluated factors is most strongly associated with disease progression. Conclusions: Thus, a practitioner is recommended to use the proposed additional clinical criteria to assess the severity and degree of progression of COPD.Обоснование. Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) — хроническое заболевание с прогрессирующим ограничением скорости воздушного потока, гиперергическим воспалительным ответом дыхательных путей и системными проявлениями. От степени выраженности этих патогенетических компонентов зависит прогноз течения заболевания. Показано, что характеристика ограничения скорости воздушного потока (объем форсированного выдоха за первую секунду) не позволяет с высокой вероятностью предсказать скорость прогрессирования ХОБЛ.Цель исследования: сравнение прогностической значимости таких клинических показателей, как частота обострений и развитие коморбидных заболеваний, для оценки характера прогрессирования ХОБЛ при использовании различных классификационных подходов.Методы. На основании единого протокола в проспективное сравнительное исследование включены 98 больных ХОБЛ. В рамках протокола предусмотрено 2 визита, включающих оценку соответствия пациента критериям включения/исключения, подписание информированного согласия, сбор анамнестических данных и выполнение основных процедур исследования (оценка функции внешнего дыхания, 6-минутный шаговый тест, оценка одышки по опроснику mMRC, бодиплетизмография, исследование диффузионной способности легких, допплерэхокардиография, компьютерная томография органов грудной клетки). Второй визит проводился через 12 мес после первого с целью оценки динамики заболевания, которая считалась отрицательной, если по прошествии одного года наблюдения пациента переводили в группу ХОБЛ с более тяжелым течением. Коморбидными заболеваниями считались снижение индекса массы тела менее 21, наличие остеопороза, анемии, сердечно-сосудистых заболеваний, язвенной болезни желудка, сахарного диабета 2-го типа.Результаты. Проведенное нами исследование свидетельствует о целесообразности комплексной оценки таких факторов, как частота обострений ХОБЛ за предшествующие 12 мес и наличие коморбидных заболеваний у больного при оценке текущей тяжести течения заболевания и определении его прогноза. При этом частота обострений ХОБЛ среди оцениваемых факторов наиболее сильно связана с прогрессированием заболевания.Заключение. Таким образом, практическому врачу предложены дополнительные клинические критерии для комплексной оценки тяжести и степени прогрессирования ХОБЛ

Сравнительный анализ орофарингеальной микробиоты у больных хронической обструктивной болезнью легких и бронхиальной астмой различной степени тяжести

Backgraund: The result of comparative study of oropharyngeal microbiota taxonomic composition in patients with different severity level of bronchial asthma (BA) and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is presented in this paper. Aims: To compare oropharyngeal microbiota composition in case of bronchial asthma and chronic obstructive pulmonary disease in different severity levels. Metods: 138 patients, 50 with BA and 88 with COPD were studied. For each patient was collected anamnesis vitae, swab from the back of the throat and performed physical examination. High-throughput 16S ribosomal RNA gene sequencing and bioinformatic analysis was employed to characterize the microbial communities. Results: As a result of the study was found a number of differences on various taxonomic levels in microbiota’s composition within group of patients with different severity level of BA and group of patients with different severity level of COPD and between those groups. COPD patients with GOLD 1–2 in comparison with GOLD 3–4 patiens are marked by prevalence of species Brevibacterium aureum, genus Scardovia, Coprococcus, Haemophilus, Moryella, Dialister, Paludibacter and decrease of Prevotella melaninogenica species. BA patients with severe uncontrolled asthma in comparison with patients which have mild persistent asthma are marked by decrease of Prevotella and increase of species Bifidobacterium longum, Prevotella nanceiensis, Neisseria cinerea, Aggregatibacter segnis and genus Odoribacter, Alloiococcus, Lactobacillus, Megasphaera, Parvimonas, Sneathia. Patient’s microbiota in BA group in comparison with COPD group is characterized by the prevalence of Prevotella melaninogenica and genus Selenomonas, Granulicatella и Gemella, and decrease of Prevotella nigrescens, Haemophilus influenza and genus Aggregatibacter, Alloiococcus, Catonella, Mycoplasma, Peptoniphilus и Sediminibacterium. There are no differences between microbiota composition in case of severe uncontrolled BA and very severe COPD. Conclusion: Lack of differences in oropharyngeal microbiota taxonomic composition between patients with severe uncontrolled BA and very severe COPD allow us to suggest a similarity of bronchopulmonary system condition in case of diseases' severe stages.Обоснование. Характеристика орофарингеальной микробиоты при хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и бронхиальной астме (БА) в зависимости от тяжести течения заболеваний является актуальной задачей, решение которой позволит уточнить роль микробиоты в их патогенезе. Цель исследования: сравнительный анализ состава орофарингеальной микробиоты при ХОБЛ и БА разной степени выраженности симптомов. Методы. В исследование включены 138 больных, из них 88 с ХОБЛ, 50 — с БА. Для каждого пациента был собран анамнез жизни, проведено физикальное исследование и получен мазок из орофарингеальной области. Определение таксономического состава проводилось секвенированием генов бактериальной 16S рРНК с последующим биоинформатическим и статистическим анализом. Результаты. При сравнительном анализе были найдены различия в представленности микроорганизмов. Для микробиоты больных ХОБЛ 1–2-й степени тяжести в сравнении с образцами ХОБЛ 3–4-й степени на фоне снижения представленностиPrevotella melaninogenica характерно более высокое содержание Brevibacterium aureum и представителей рода Scardovia, Coprococcus, Haemophilus, Moryella, Dialister и Paludibacter. Микробиота пациентов с тяжелой БА в сравнении с таковой при легкой персистирующей форме на фоне более низкого содержания бактерий рода Prevotella характеризуется более выраженным присутствием Bifidobacterium longum, Prevotella nanceiensis, Neisseria cinerea, Aggregatibacter segnis, а также представителей рода Odoribacter, Alloiococcus, Lactobacillus, Megasphaera, Parvimonas и Sneathia. При сравнении микробиоты больных БА и ХОБЛ для пациентов с БА отмечалась более высокая представленность P. melaninogenica и микроорганизмов рода Selenomonas, Granulicatella, Gemella, а также снижение Prevotella nigrescens, Haemophilus influenzae и Aggregatibacter, Alloiococcus, Catonella, Mycoplasma, Peptoniphilus, Sediminibacterium. При этом различия в составе орофарингеальной микробиоты у больных тяжелой неконтролируемой БА и ХОБЛ очень тяжелого течения не выявлены.Заключение. Отсутствие различий в бактериальной композиции орофарингеальной микробиоты у больных с тяжелыми формами ХОБЛ и БА позволяет высказать предположение о сходстве состояния бронхолегочной системы при тяжелых стадиях развития данных заболеваний

РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ПИЩЕВОЙ АЛЛЕРГИИ У ДЕТЕЙ В МИРОВОМ ОЧАГЕ ОПИСТОРХОЗА: ПЛАНИРОВАНИЕ И МЕТОДОЛОГИЯ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ EUROPREVALL

According to numerous surveys food allergy affects up to 2–6% of population in different countries and varies due to numerous factors including the prevalence of helminths infestation. The food allergy prevalence data in Russia are based on official medical statistics. The study was performed as part of «The Prevalence, Cost and Basis of Food Allergy Across Europe» (EU funded project № FP6-2006-TTC-TU-5 Proposal 045879 EuroPrevall). The aim is to create the concept of food allergy in children in opisthorchiasis endemic area based on epidemiological study of the prevalence, risk factors and clinical features. The main objective of the study will be the working out of the food safety regulations. This article describes the study design and its methodology. Согласно данным ряда исследователей, распространенность пищевой аллергии в мире составляет 2–6%, варьируя в зависимости от многочисленных факторов, включая пораженность населения гельминтными инвазиями. Сведения о распространенности пищевой аллергии в России основаны на данных официальной статистики. Настоящая работа выполнена в рамках «Исследования распространенности, социально-экономического значения и основ пищевой аллергии в Европе» («The Prevalence, Cost and Basis of Food Allergy Across Europe»; грант VI рамочной программы Евросоюза № FP6-2006-TTC-TU-5 Proposal 045879 EuroPrevall). Цель исследования состоит в формулировке новой концепции пищевой аллергии у детей в мировом очаге описторхоза на основании эпидемиологического исследования распространенности, факторов риска, клинических особенностей болезни, а также в создании научной базы для разработки регламентов безопасности продуктов питания. Статья посвящена вопросам планирования и методологии исследования.

Meta-analysis identifies seven susceptibility loci involved in the atopic March

Eczema often precedes the development of asthma in a disease course called the a 'atopic march'. To unravel the genes underlying this characteristic pattern of allergic disease, we conduct a multi-stage genome-wide association study on infantile eczema followed by childhood asthma in 12 populations including 2,428 cases and 17,034 controls. Here we report two novel loci specific for the combined eczema plus asthma phenotype, which are associated with allergic disease for the first time; rs9357733 located in EFHC1 on chromosome 6p12.3 (OR 1.27; P=2.1 × 10 a'8) and rs993226 between TMTC2 and SLC6A15 on chromosome 12q21.3 (OR 1.58; P=5.3 × 10 a'9). Additional susceptibility loci identified