Des lasers pour regarder nos cellules

Initialement conçus pour des besoins de télécommunication,de nombreux outils servant à produire, acheminer, canaliser ou traiter la lumière sont maintenant disponibles pour les biologistes. La biophotonique, nouvelle discipline en pleine effervescence, consiste à utiliser la lumière pour mieux comprendre le vivant, le laser en étant le principal outil. L'interaction entre laser et échantillon biologique permet notamment une analyse très fine de ce qui se produit au niveau moléculaire de la cellule. La collaboration entre biologistes, chimistes et physiciens revêt ainsi un enjeu sociétal (impact en matière de santé humaine et d'environnement), technologique (innovation au croisement des savoir-faire) et économique (création de nouvelles richesses). Dans cet exposé, seront présentés tout d'abord certains instruments développés au laboratoire XLIM pour les applications biologiques, qui reposent sur l'emploi de lasers, fibres optiques et autres composants électromagnétiques. Dans un second temps, seront abordées quelques techniques utilisées au sein de l'institut GEIST, permettant d'analyser, trier ou encore imager des cellules biologiques (cytométrie, microscopie...) et constituant par là même des outils effi cients pour la recherche en environnement, santé humaine ou bactériologi

Ambivalence de la réponse à la mort cellulaire programmée des lymphocytes B immortalisés par l'EBV (exemple de la molécule B7-H1 et des MAP kinases)

L EBV est le premier virus transformant identifié chez l homme. Il infecte environ 95% de la population adulte et persiste dans le compartiment B mémoire durant toute la vie de l individu. Lors de phases de réactivation, les cellules B infectées peuvent entrer en prolifération (latence III). Le virus exprime alors ses propres gènes. Les protéines de latence exprimées conduisent à l activation de voies de signalisation cellulaires impliquées dans des processus de transformation, de survie et de prolifération mais également d apoptose. Compte-tenu de de l ambivalence de voies de signalisation activées, le virus peut jouer sur l équilibre survie/apoptose de la cellule. Mon travail de thèse a porté sur deux aspects en lien avec le rôle modulateur de l EBV sur la réponse des cellules B à l apoptose : un rôle immuno-modulateur et un rôle pharmaco-modulateur. Dans un premier temps, nous nous sommes intéressés à la molécule immuno-inhibitrice de la synapse immunologique surexprimée chez les lymphocytes B en latence III de l EBV, B7-H1. Nous avons pu montrer qu elle réprime la réponse T/NK et que son expression transcriptionnelle est fortement réprimée par c-Myc (programme de transcription active par l EBV). Nous avons également mis en évidence que B7-H1 est stockée dans les lysosomes sécrétoires, dont le nombre et la fusion avec la membrane plasmiques sont augmentés par le programme de latence III de l EBV, tandis que c-Myc réprime le trafic vésiculaire par dépolymérisation des filaments d actine et empêche son expression membranaire. La surexpression membranaire de B7-H1 peut contribuer à l inhibition de la réponse apoptotique T anti-EBV et aux processus de lymphomagénèse. Dans la seconde partie du travail, nous nous sommes intéressés au traitement par les poisons du fuseau mitotique, en particulier du nouveau dérivé de la famille des combretastatines, l isoNH2CA-4. Nous avons pu montrer que l infection par l EBV permet de contourner la résistance à l apoptose de cellules B de lymphome de Burkitt mutées pour p53, lors du traitement par les poisons du fuseau. L induction de l apoptose intrinsèque est due à l activation par l EBV des voies MAP kinases p38 et JNK. Un inducteur chimique de ces voies, la sphingosine, conduit au même résultat, ce qui permet d envisager de nouvelles stratégies thérapeutiques pour le traitement des cellules mutées pour p53. L ensemble de mon travail contribue à montrer le rôle complexe et ambivalent de l EBV sur la balance survie/apoptose des cellules B en programme de latence III.LIMOGES-BU Médecine pharmacie (870852108) / SudocSudocFranceF

Both CD62 and CD162 antibodies prevent formation of CD36-dependent platelets, rosettes, and artefactual pseudoexpression of platelet markers on white blood cells: a study with ImageStream®.

International audienceFluorescent labeled monoclonal antibodies (mAbs) against CD36 are routinely used as monocyte, erythroid, or platelet markers in clinical cytometry. CD36 has recently been proposed by various authors as a valuable marker helping to enumerate leukocyte's subpopulations by flow cytometry. However, it is known that binding of CD36 may induce platelet activation and formation of platelet's rosettes on leukocytes, resulting in false expression of platelet markers on white blood cells. To study this phenomenon, we have combined classical flow cytometry and a new quantitative flow imaging technique with the ImageStream(®) analyzer. We show that CD36 ligation induces activation of platelets with CD62 expression and their adhesion on leukocytes due to CD62 and CD162 interactions. Preincubation of whole blood samples with either anti-CD62 or anti-CD162 antibodies could prevent formation of these rosettes. Our approach also emphasizes the fact that immunomorphological analysis of cell events with ImageStream technology is a useful tool to validate the specificity of marker's labeling or to elucidate incoherent results obtained with classical flow cytometry. We thus propose to prevent false platelet labeling on leukocytes by preincubation with either anti-CD62 or anti-CD162 antibodies when using CD36 mAbs

Four promoters direct expression of the calpastatin gene.

absen

Increased cyclooxygenase-2 and thromboxane synthase expression is implicated in diosgenin-induced megakaryocytic differentiation in human erythroleukemia cells.

International audienceDifferentiation induction as a therapeutic strategy has, so far, the greatest impact in hematopoietic malignancies, most notably leukemia. Diosgenin is a very interesting natural product because, depending on the specific dose used, its biological effect is very different in HEL (human erythroleukemia) cells. For example, at 10 microM, diosgenin induced megakaryocytic differentiation, in contrast to 40 microM diosgenin, which induced apoptosis in HEL cells previously demonstrated using sedimentation field-flow fractionation (SdFFF). The goal of this work focused on the correlation between cyclooxygenase-2 (COX-2) and thromboxane synthase (TxS) and megakaryocytic differentiation induced by diosgenin in HEL cells. Furthermore, the technique of SdFFF, having been validated in our models, was used in this new study as an analytical tool that provided us with more or less enriched differentiated cell fractions that could then be used for further analyses of enzyme protein expression and activity for the first time. In our study, we showed the implication of COX-2 and TxS in diosgenin-induced megakaryocytic differentiation in HEL cells. Furthermore, we showed that the analytical technique of SdFFF may be used as a tool to confirm our results as a function of the degree of cell differentiation

Correlation between bovine calpastatin mRNA transcripts and protein isoforms.

absen

Etude comparée des caractéristiques du sperme et du chondriome des spermatozoïdes chez les coqs des lignées R+ et R- sélectionnées de façon divergente sur la consommation alimentaire résiduelle

3 tables *INRA, Centre de Jouy-en-Josas (FRA) Diffusion du document : INRA, Centre de Jouy-en-Josas (FRA)Chantier qualité spécifique "Auteurs Externes" département de Génétique animale : uniquement liaison auteur au référentiel HR-Accessabsen

Associated effects of divergent selection for residual feed consumption on reproduction, sperm characteristics, and mitochondria of spermatozoa

3 tablesChantier qualité spécifique "Auteurs Externes" département de Génétique animale : uniquement liaison auteur au référentiel HR-Accessabsen

Reversion of apoptotic resistance of TP53-mutated Burkitt lymphoma B-cells to spindle poisons by exogenous activation of JNK and p38 MAP kinases.

International audienc