Гетерологическая экспрессия, выделение и физико-химические свойства рекомбинантного цитохрома CYP1B1 человека

In order to study the catalytic properties of CYP1B1 toward a number of steroid compounds, we have developed an effective system of heterologous expression of hemoprotein in E.coli and isolated the preparation of recombinant CYP1B1 «soluble» form in a highly purified state. The interaction parameters of the purified enzyme with steroid ligands have been determined.С целью изучения каталитических свойств СYP1B1 по отношению к ряду стероидных соединений нами разработана эффективная система гетерологической экспрессиии гемопротеида в E.coli и выделен в высокоочищенном состоянии «растворимый» препарат рекомбинантного CYP1B1. Установлены параметры взаимодействия данного фермермента с стероидными лигандами

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ВОССТАНОВЛЕНИЯ CYP124 M. TUBERCULOSIS РАЗЛИЧНЫМИ РЕДОКС-ПАРТНЕРАМИ

In order to determine the optimal redox partners of CYP124 M. tuberculosis in reconstituted in vitro system we carried out heterologous expression, isolation and purification of recombinant CYP124 Mycobacterium tuberculosis and candidate redox partners: Fdx, FdR, FprA, Adx, AdR, CPR, Arh1_A18G, Etpfd. CYP124 was shown to exhibit the highest catalytic activity in system with S. pombe mitochondrial electron transfer proteins: Etp1fd и Arh1_A18G.С целью определения оптимальных редокс-партнеров CYP124 M. tuberculosis в in vitro реконструированной системе осуществлена гетерологическая экспрессия, выделение и очистка рекомбинантных цитохрома CYP124 M. tuberculosis и потенциальных редокс-партнеров: Fdx, FdR, FprA, Adx, AdR, CPR, Arh1_A18G, Etpfd. Показано, что CYP124 проявляет наибольшую каталитическую активность в системе с митохондриальными электрон-транспортными белками S. pombe: Etp1fd и Arh1_A18G