Gene Expression Profiling of Preovulatory Follicle in the Buffalo Cow: Effects of Increased IGF-I Concentration on Periovulatory Events

The preovulatory follicle in response to gonadotropin surge undergoes dramatic biochemical, and morphological changes orchestrated by expression changes in hundreds of genes. Employing well characterized bovine preovulatory follicle model, granulosa cells (GCs) and follicle wall were collected from the preovulatory follicle before, 1, 10 and 22 h post peak LH surge. Microarray analysis performed on GCs revealed that 450 and 111 genes were differentially expressed at 1 and 22 h post peak LH surge, respectively. For validation, qPCR and immunocytochemistry analyses were carried out for some of the differentially expressed genes. Expression analysis of many of these genes showed distinct expression patterns in GCs and the follicle wall. To study molecular functions and genetic networks, microarray data was analyzed using Ingenuity Pathway Analysis which revealed majority of the differentially expressed genes to cluster within processes like steroidogenesis, cell survival and cell differentiation. In the ovarian follicle, IGF-I is established to be an important regulator of the above mentioned molecular functions. Thus, further experiments were conducted to verify the effects of increased intrafollicular IGF-I levels on the expression of genes associated with the above mentioned processes. For this purpose, buffalo cows were administered with exogenous bGH to transiently increase circulating and intrafollicular concentrations of IGF-I. The results indicated that increased intrafollicular concentrations of IGF-I caused changes in expression of genes associated with steroidogenesis (StAR, SRF) and apoptosis (BCL-2, FKHR, PAWR). These results taken together suggest that onset of gonadotropin surge triggers activation of various biological pathways and that the effects of growth factors and peptides on gonadotropin actions could be examined during preovulatory follicle development

Benzoato de estradiol en vaquillas sincronizadas con progesterona y prostaglandina-F2A

Se evaluó el efecto de adicionar benzoato de estradiol (BE) 24 h después de retirar el dispositivo intravaginal (CIDR) con progesterona (P4) y aplicar prostaglandina F2a (PGF2a), sobre la sincronización de celo (SE) y la fertilidad de 54 vaquillas Charolés. A todas se les colocó un CIDR y 2 mg de BE (d=0). El día 7, se retiró el CIDR y se aplicó 25 mg de PGF2a. El día 8, se asignaron al azar a tres lotes: lote I (testigo; n= 24), se aplicó solución salina; lote II (n= 15), se aplicó 0,5 mg de BE y lote III (n= 15), se aplicó 1,0 mg de BE; la inseminación artificial (IA) se realizó de 18 a 24 h del inicio del celo. Se tomó una ultrasonografía de ovarios, al momento de aplicar el CIDR, al retirar el CIDR, 24 h de retirar el CIDR y al momento de la IA. No hubo diferencia entre lotes con BE para el intervalo de retirada del CIDR al celo; pero, hubo diferencia (p<0,05) entre lotes con BE contra el testigo, reduciéndose el tiempo al celo hasta 12 h. El 100 p.100 de las vaquillas con BE, presentaron celo vs 81 p.100 del lote I. Para la fertilidad, no hubo diferencia entre lotes. A la IA, la dinámica folicular fue similar. De acuerdo con los resultados, adicionar BE mejoró la sincronía del celo, redujo el intervalo del retiro del CIDR al celo; sin embargo, no se observaron cambios en la dinámica folicular y no mejoró la fertilidad

Benzoato de estradiol en vaquillas sincronizadas con progesterona y prostaglandina-F2A

Se evaluó el efecto de adicionar benzoato de estradiol (BE) 24 h después de retirar el dispositivo intravaginal (CIDR) con progesterona (P4) y aplicar prostaglandina F2a (PGF2a), sobre la sincronización de celo (SE) y la fertilidad de 54 vaquillas Charolés. A todas se les colocó un CIDR y 2 mg de BE (d=0). El día 7, se retiró el CIDR y se aplicó 25 mg de PGF2a. El día 8, se asignaron al azar a tres lotes: lote I (testigo; n= 24), se aplicó solución salina; lote II (n= 15), se aplicó 0,5 mg de BE y lote III (n= 15), se aplicó 1,0 mg de BE; la inseminación artificial (IA) se realizó de 18 a 24 h del inicio del celo. Se tomó una ultrasonografía de ovarios, al momento de aplicar el CIDR, al retirar el CIDR, 24 h de retirar el CIDR y al momento de la IA. No hubo diferencia entre lotes con BE para el intervalo de retirada del CIDR al celo; pero, hubo diferencia (p<0,05) entre lotes con BE contra el testigo, reduciéndose el tiempo al celo hasta 12 h. El 100 p.100 de las vaquillas con BE, presentaron celo vs 81 p.100 del lote I. Para la fertilidad, no hubo diferencia entre lotes. A la IA, la dinámica folicular fue similar. De acuerdo con los resultados, adicionar BE mejoró la sincronía del celo, redujo el intervalo del retiro del CIDR al celo; sin embargo, no se observaron cambios en la dinámica folicular y no mejoró la fertilidad

Cystic ovarian follicles and thyroid activity in the dairy cow

Thyroid activity affects the functionality of the reproductive axis and thyroid dysfunction has been associated with ovarian hyperstimulation syndrome and polycystic ovarian syndrome, in human medicine. This study investigates serum17- &lt; beta&gt; estradiol, progesterone, thyrotropic and thyroid hormone levels, in cyclic dairy cows on heat (Group H) and in dairy cows with ovarian follicular cysts (Group FC). Both 17- &lt; beta&gt; estradiol and progesterone serum concentrations were statistically higher in cystic than in cyclic cows (estradiol: 8.51 ± 1.91 vs 6.32 ± 1 pg/mL) (progesterone: 0.49 ± 0.17 vs 0.13 ± 0.03 ng/mL), whereas TSH and fT4 serum concentrations were statistically lower in cows with cystic ovarian follicles (COF), compared to cyclic ones (TSH: 2.48 ± 1.31 vs 3.56 ± 1.03 ng/mL) (fT4: 5,86 ± 1.69 vs 8.63 ± 1.08). fT3 serum levels were similar, in both cystic and cyclic subjects (2.94 ± 0.65 vs 3.02 ± 0.9, respectively). Standing on these results, a look to the functioning of thyrotropic axis should be given in dairy cows with COF, just like it is routinely performed in human gynaecology, in case of ovarian diseases. If severe hypothyroidism should be found, a hormone replacement therapy could be attempted in cystic cows refractory to “ordinary” therapies