Effect of in vitro fecundation of prepubertal sheep oocytes with or without cumulus cells on cleavage and embryo development rate: a comparative study of bovine serum albumin and sheep serum added to the capacitation media

El objetivo de este estudio fue evaluar la albúmina sérica bovina (ASB) y el suero de oveja (SO), en los medios de capacitación seminal, en función de la tasa de división y desarrollo embrionario de ovocitos de corderas, madurados in vitro con (COCs) y sin células del cúmulus (ODs). El medio base de capacitación fue el fluido oviductal sintético con 2,38 mg/mL Hepes y 25 μg/mL Gentamicina, suplementado con 4 mg/mL ASB o 20% (v/v) SO. La fecundación se realizó con 1x106 espermatozoides/ mL, seleccionados mediante un gradiente por movimiento a la superficie. Las tasas de división y desarrollo embrionario fueron evaluadas a 48 y 168 hrs. post inseminación, no encontrándose diferencias estadísticas en función de los medios de capacitación (ASB vs SO): 21,5 vs 24,3% para COCs y 10,8 vs 8,0% para ODs si se trata de división, y en caso de desarrollo 16,7 vs 16,6% para COCs y 2,1 vs 8,8% para ODs. Sin embargo, considerando la presencia o ausencia de células del cúmulus en el ovocito, hubo diferencias altamente significativas (P<0,001) a favor de los COCs, quienes a su vez obtuvieron mejores resultados de maduración que los ODs: 69,5 vs 31,1%, respectivamente (P<0,001). Estos resultados confirman que la ASB y el SO son buenos agentes de capacitación para los protocolos de producción in vitro de embriones. Por otro lado se confirmó que, con la eliminación de las células del cúmulus previo a la maduración, ésta se reduce significativamente, lo mismo que las tasas de división y desarrollo embrionario. Sin embargo, puesto que parte de estos ovocitos consiguen desarrollarse a mórulas y blastocistos podrían ser utilizados en combinación con las nuevas técnicas reproductivas en clonación, producción de células madre, entre [email protected]@unizar.esBimestralThe aim of this work was to study the effect of Bovine Serum Albumin (BSA) and Sheep Serum (SS) on seminal capacitation medium in accordance with division rate and embryo development of female lamb in vitro maturated oocytes with (COCs) or without cumulus cells (ODs). The capacitation medium was synthetic oviductal fluid (SOF) supplemented with 2.38 mg/mL Hepes and 25 μg/mL Gentamicyne, with either 4 mg/mL BSA or 20% (v/v) SS. Sperms used for fecundation were isolated by swim up, with 1 x 106 sperms/mL concentration. Cleavage rate and embryo development were observed at 48 and 168 h post insemination, no finding any significant influence of the capacitation medium tested (BSA vs SS): 21.5 vs 24.3% for COCs and 10.8 vs 8% for ODs on cleavage rate, or on development 16.7 vs 16.6% for COCs and 2.1 vs 8.8% for ODs. Nevertheless, the oocyte type significantly influenced (P<0,001) the maturation rate, COCs oocytes got better maturation rates than ODs; 69.5 vs 31.1%, respectively. These results confirm that both BSA and SS are good capacitation agents for in vitro embryo production protocols. On the other side, it confirmed that removal of cumulus cells prior in vitro maturation reduces maturation, cleavage and embryo development rates. However, a part of these oocytes get develop to the morula stage, so it can´t be reject to be used in combination with new reproductive techniques

Effect of eCG dosage on estrus induction in crossbred goats after a short-term medroxiprogesterone treatment

El propósito del presente estudio fue evaluar el efecto de la dosis de gonadotropina coriónica equina (eCG) sobre la inducción del celo en cabras mestizas manejadas bajo condiciones tropicales. Las cabras (n = 32) fueron tratadas con una esponja intravaginal impregnada con 50 mg de acetato de medroxiprogesterona (MAP) durante seis días. Al momento del retiro de las esponjas, las cabras fueron divididas al azar en tres grupos: control (GC, n=11), no recibieron eCG; G250: (n=10) recibieron 250 UI de eCG vía intramuscular y G500: (n=11) recibieron 500 UI de eCG vía intramuscular. La eCG no afectó la tasa de expresión de celo, siendo 81,8% (9/11) para el GC y de 100% para los grupos G250 y G500 (P>0,05). El intervalo al celo fue significativamente más corto en el grupo G500 (32,54 ± 3,00 horas, P<0,05) que en los grupos G250 y GC (40,65 ± 3,27 y 42,20 ± 3,54 horas, respectivamente). La duración del celo no difirió entre los grupos (P>0,05). El porcentaje de cabras repitiendo celo, luego de un ciclo estrual de corta duración, varió según el grupo, siendo de 27,3% (3/11) en el grupo G500 y de 10% (1/10) en el grupo G250; mientras que ninguna cabra del grupo control repitió celo luego de un ciclo estrual corto; no se observaron diferencias significativas entre los grupos (P>0,05). En conclusión, la eCG no es necesaria para inducir el celo en cabras tratadas por seis días con una esponja intravaginal conteniendo MAP, sin embargo, la dosis de 500 UI de eCG fue necesaria para acortar el intervalo al [email protected] aim of this study was to evaluate the effect of dosage of equine chorionic gonadotrophin (eCG) dose on the estrus induction after a short-term medroxyprogesterone treatment in crossbred goat under tropical conditions. Goats (n = 32) received an intravaginal sponge containing 50 mg of medroxyprogesterone acetate (MAP) for six days, at time of sponge withdrawal goats were divided randomly in three groups: CG, control group (n=11), did not received eCG; the second group (G250, n=10), received 250 IU of eCG intramuscular and the third group (G500, n =11), received 500 IU of eCG IM. Treatment with eCG did not affect the rate of estrus presentation, being 81.8% (9/11) for GC group and 100% for groups G250 (10/10) and G500 (11/11), P>0.05. The interval to estrus was significantly shorter in group G500 (32.54 ± 3.00 hours, P<0.05) than GC and G250 (40.65 ± 3.27 y 42.20 ± 3.54 hours, respectively). Estrus duration was not affected by eCG treatment (P>0.05). A shorter interestrus interval was observed in 27.3% (3/11) of goats in G500 and 10% (1/10) of goats in G250, while no goats in GC had a shorter interestrus interval. In conclusion, eCG is not necessary to induce estrus in goats treated for six days with an intragavinal sponges containing MAP, however the dose of 500 IU was necessary to shortens the interval to the estrus

Comunicación breve: efecto de la administración postmonta de un progestágeno sobre la tasa de preñez en cabras mestizas luego de un celo inducido

Los celos inducidos por progesteronas o progestagenos son de menor fertilidad en comparación con los celos naturales. Sin embargo, la administración postmonta de progesterona ha sido reportada por incrementar el desarrollo embrionario y la tasa de preñez; por lo tanto, el propósito de este estudio fue evaluar el efecto de la administración postmonta de un progestageno sobre la tasa de preñez en cabras mestizas tropicales luego de un celo inducido con acetato de medroxiprogestrona (MAP) durante el periodo temprano postparto. La inducción del celo se inicio el día 31,3 ± 1,7 postparto mediante la utilización de esponjas intravaginales impregnadas con 60 mg de MAP durante 14 días y al momento del retiro de las esponjas se aplicaron 500 UI de eCG, vía intramuscular. El celo fue detectado cada seis horas a partir de 24 horas de retiradas las esponjas. El servicio se realizó por monta natural con machos enteros. Cinco días luego de la monta las cabras servidas fueron distribuidas de forma aleatoria en dos grupos, el grupo control (n=18), sin tratamiento; y el grupo MAP (n=18), que recibió una esponja con 60 mg de MAP por 14 días. El diágnostico ultrasonográfico de preñez se realizó a los 50 días postmonta. El tratamiento con MAP no afectó la tasa de preñez, con 44,4% (8/18) en el grupo MAP, mientras que en el grupo control fue de 55,5% (10/18), P>0,05. En conclusión, el tratamiento con una esponja impregnadas con 60 mg de MAP entre los 5 días y 19 postmonta no afectó la tasa de preñez luego de un celo inducido durante el periódo postparto temprano en cabras mestizas tropicales.578-581Estrus induced with progesterone or progestagens have low fertility compared to natural estrus. However, post-mating progesterone administration has been reported by increases embryo development and pregnancy rate; therefore the aim of this study was to evaluate the effect of post-mating progestagen administration on pregnancy rate after medroxyprogesterone acetate (MAP) induced estrus in crossbred goats. Estrus induction was started at 31.3 ± 1.7 days post-partum with intravaginal sponges impregnated with 60 mg of MAP during 14 days and at time of sponge removal were applied 500 IU of eCG intramuscular. Estrus was detected every 6 hours from 24 hours onwards after sponge withdrawal. Goats were naturally mated with two entry bucks. Five days post - mating, mated goat were randomly assorted into two groups, control group (n=18), without any treatment, and MAP for group (n=18), receiving a sponge with 60 mg of MAP for fourteen days. Ultrasonographyc diagnosis of pregnancy was performed at day 50 post-mating. MAP treatment, did not affect the pregnancy rate, with 44.4% (8/18) in MAP group, while in control group was 55.5% (10/18), P>0.05. In conclusion, MAP treatment with a sponge impregnated with 60 mg of MAP between days 5 and 19 post-mating did not affect the pregnancy rate after progestagen induced estrus during the early post-partum period in crossbred tropical goats