Relation protéolyse calcium-dépendante/caveolae au cours de la différenciation de la cellule musculaire

Les recherches effectuées ont pour but de comprendre les mécanismes d'action et de régulation des voies protéolytiques dans la cellule musculaire. Les calpaïnes qui sont des cystéines protéases calcium-dépendantes interviennent dans les phénomènes de fusion et de différenciation des myoblastes. Les caveolae qui sont des invaginations vésiculaires de la membrane plasmiques interviendraient dans les mêmes phénomènes. Caveolae et calpaïnes interviennent dans les mêmes maladies (diabète, maladie d'Alzheimer, dystrophies musculaires...). La PKC qui est un substrat privilégié des calpaïnes lors de la fusion est fortement représentée au niveau de ces vésicules. Nous nous sommes donc intéressés aux relations entre ces trois protagonistes

Relation protéolyse calcium-dépendante/caveolae au cours de la différenciation de la cellule musculaire

Soutenue le 9 juin 2006 Diplôme : Dr. d'Universit

Relation protéolyse calcium-dépendante/caveolae au cours de la différenciation de la cellule musculaire

Les calpaïnes sont des cystéines protéases calcium-dépendantes exprimées dans toutes les cellules de mammifères. Elles composent une large famille d'isoformes ubiquitaires ou tissus spécifiques. Les deux protéases ubiquitaires les plus étudiées sont les m- et m-calpaïnes. Nos résultats montrent que seule la m-calpaïne co-localise dans les caveolae de myoblastes. Ces invaginations vésiculaires de la membrane plasmique sont essentielles dans la fusion des myoblastes et la différenciation. En outre, nous montrons avec certitude, en utilisant un ionophore à calcium et un inhibiteur spécifique des calpaïnes, que la m-calpaïne diminue les taux de PKC alpha et MARCKS. L'utilisation de m-calpaïne purifiée engendre l'apparition du fragment catalytique PKM, sans aucun effet sur la MARCKS. L'addition de PMA, un activateur de PKC, induit la translocation de la PKCa vers les caveolae et la réduction simultanée de MARCKS au niveau des caveolae. Ce phénomène n'est pas observé quand un inhibiteur de PKC est ajouté préalablement. Nous concluons que la présence de m-calpaïne induit la translocation de la MARCKS vers le cytosol par l'intermédiaire de la PKCa. Ces événements semblent essentiels pour la fusion des myoblastes et la différenciation. En utilisant une approche protéomique couplée à un traitement antisens dirigé contre la m-calpaïne, nous démontrons que cette protéase serait impliquée dans différents réseaux de régulation caveolae-dépendant comme l'apoptose, le stress, la régulation de l'EGF et le transport vésiculaire.BORDEAUX1-BU Sciences-Talence (335222101) / SudocSudocFranceF

Calpains/caveolae interactions during muscle cell differentiation

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Relations calpaïnes/caveoles au cours de la différenciation musculaire: une approche protéomique prometteuse

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Implication de la protéolyse Ca²+ dépendante dans la différenciation de la cellule musculaire: étude d'une voie de régulation faisant intervenir la PKC alpha et les caveolae

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MARCKS is involved in myoblast fusion by PKCa phosphorylation and caplain proteolytic cleavage

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Study of milli-calpain biological functions at the level of skeletal muscle caveolae

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Convergence of the protein kinase C alpha and calpain networks in muscular cells

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Study of m-calpain functions in caveolae of fusing muscle cells using a differential proteomic approach

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