Leucemia linfoide crónica - B: Aspectos inmunitarios y moleculares Lymphoid leukemia. Inmiune and molecular aspects

La leucemia linfoide crónica-B representa la leucemia humana más común en los países occidentales y está caracterizada por la proliferación y acúmulo delinfocitos B monoclonales CD5 + en sangre periférica, médula ósea, ganglios linfáticos y órganos relacionados, que morfológicamente tienen apariencia madura, pero que son biológicamente inmaduros. El curso de la enfermedad está determinado por una profunda disregulación inmune con hipogammaglobulinemia progresiva y una disrupción en la interacción entre las células B y T, así como fenómenos de autoinmunidad. Es el prototipo de enfermedad maligna humana que involucra defectos de la muerte celular programada o apoptosis. En esta enfermedad las translocaciones cromosómicas son raras y las aberraciones genéticas más frecuentes son las deleciones 13q14,11q y la trisomía 12. A pesar de los avances logrados en las técnicas moleculares, aún no se ha podido identificar un oncogen asociado con la patogénesis de este tipo de leucemia, pero los hallazgos citogenéticos y moleculares suministran importante información diagnóstica, clínica y pronóstica, lo cual puede contribuir a decisiones en cuanto al tratamiento y seguimiento de los pacientes con esta enfermedad<br>Chronic B-lymphocytic leukemia represents the most common human leukemia in western countries and it is characterized by the proliferation and accumulation of monoclonal CD+5 B-lymphocytes in peripheral blood, bone marrow, ganglia lymphatica and related organs, that morphologically have a mature appearance, but are biologically inmature. The course of the disease is determined by a deep immune disregulation with progressive hypogammaglobulinemia and a disruption in the interaction between B and T cells, as well as by autoimmunity phenomena. It is the prototype of malignant human disease that involves defects of the programmed cell death or apoptosis. In this disease, the chromosomal translocations are rare and the most frequent genetic aberrations are 13q14,11q deletions and trisomy 12. In spite of the advances attained in the mollecular techniques, it has not been possible to identify an oncogene associated with the pathogenesis of this type of leukemia, but the cytogenetic and mollecular findings provide important diagnostic, clinical and prognostic information that can contribute to make decisions regarding the treatment and follow-up of the patients with this diseas

Aplicación del método inmunocitoquímico de la fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina para la clasificación inmunológica de las leucemias mieloides agudas Application of the alkaline phosphatase anti-alkaline phosphatase immunocytochemical method for the immunological classification of acute myeloid leukemias

Se realizó el inmunofenotipaje celular de 30 pacientes con el diagnóstico de leucemia mieloide aguda por el método inmunocitoquímico fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (APAAP) introducido en nuestro laboratorio. Los marcadores estudiados fueron: CD3, CD13, CD15, CD19, CD33 y CD41. Para el estudio se utilizaron extendidos de médula ósea o sangre periférica fijados en acetona pura e incubados con el respectivo anticuerpo monoclonal. Posteriormente se añadió la inmunoglobulina anti ratón obtenida en conejo ( Linking ) y por último, el complejo APAAP. Los períodos de incubación fueron de 30 minutos y se realizaron lavados con solución amortiguadora entre cada uno de los pasos. La lectura de las láminas se realizó en microscopio óptico y se consideró positivo cuando el número de células marcadas era mayor o igual a 20 %. De los pacientes estudiados, el 93,3 % y el 90 %, respectivamente, expresaron antígenos pan mieloides CD13 y CD33; 16 de ellos expresaron el CD15 (53,3 %); 3 el CD19 (10 %) y 2 el CD41 (6,6 %). Se concluyó que el método APAAP es rápido y de bajo costo y puede ser aplicado con confiabilidad en la clasificación inmunológica de las leucemias mieloides agudas<br>The cellular immunophenotyping of 30 patients with the diagnosis of acute myeloid leukemia was conducted by the alkaline phosphatase anti-alkaline phosphatase immunocytochemical method (APAAP) introduced in our laboratory. The markers studied were: CD3, CD13, CD15, CD19, CD33 y CD41. Specimens of bone marrow or peripheral blood fixed in pure acetone and incubated with the respective monoclonal antibody were used for the study. Later on, the anti-mouse immunoglobulin obtained in rabbit (Linking) was added and, finally, the APAAP complex. The incubation periods were of 30 minutes and lavages with buffer solution were carried out between one step and the other. The reading of the slides was performed on the optical microscope and it was considered positive when the number of marked cells was higher than or equal to 20 %. Of the studied patients, 93.3 % and 90 %, respectively, expressed panmyeloid antigens CD13 and CD33; 16 of them expressed the CD15 (53.3 %); 3 the CD19 (10 %); and 2 the CD41 (6.6 %). It was concluded that the APAAP method is rapid and inexpensive and that it may be reliably applied in the immunological classification of the acute myeloid leukemia

Linfomas B y T: Diagnóstico inmunofenotípico de los linfomas no hodgkinianos B-and T-lymphomas. Immunophenotypical diagnosis of non-Hodgkin lymphomas

Los linfomas no hodgkinianos son neoplasias linfoides que pueden presentar fenotipo de células B ó T; las de tipo B son más frecuentes, mientras que los linfomas de tipo T tienen peor pronóstico y por lo general son más agresivos. En el ámbito internacional, la sobrevida de estas enfermedades es de aproximadamente 5 años, y en nuestro país se encuentran entre las 10 primeras causas de cáncer en ambos sexos, con prevalencia ligeramente mayor en el sexo masculino (1,3:1). Se destaca además, entre algunos aspectos, la importancia del estudio inmunofenotípico para determinar la naturaleza de estos procesos neoplásicos y distinguir entre enfermedad de Hodgkin, linfomas no hodgkinianos e infiltraciones por otros procesos linfoides, también para poder establecer factores pronósticos y de progresión en estos desórdenes linfoproliferativosThe non-Hodgkin lymphomas are lymphoid neoplasias that may present phenotype of cells B or T. The B-lymphomas are more frequent, whereas the T-lymphomas have a worse prognosis and they are generally aggressive. The survival of these diseases is of approximately 5 years at the international level. In our country, it is among the first 10 causes of death in both sexes, with a slightly higher prevalence in males (1.3:1). It is also stressed, among some other aspects, the importance of the immunophenotypical study to determine the nature of these neoplastic processes and to distinguish between Hodgkin disease, non-Hodgkin lymphomas and infiltrations due to other lymphoid processes, and to establish prognostic and progression factors in these lymphoproliferative disorder

Efecto in vitro de la espirulina sobre la respuesta inmune Effect in vitro of Spirulina on the immune response

La espirulina es un alga cianofícea que es utilizada como aditivo alimentario y por sus propiedades medicinales. Se realizó este trabajo para evaluar el efecto in vitro de la espirulina (Spirel, Génix, Ciudad de La Habana, Cuba) en 14 donantes sanos del Instituto de Hematología e Inmunología mediante las pruebas de transformación linfoblástica con criterio de timidina tritiada; en la expresión de los antígenos de activación HLA-DR y CD-25 por el ultramicrométodo inmunocitoquímico (UMICIQ) y la formación de roseta activa. En la transformación blástica no se hallaron diferencias estadísticamente significativas entre las condiciones experimentales con y sin espirulina, mientras que se hallaron diferencias estadísticamente significativas al aplicar la t de Student para muestras pareadas entre las condiciones experimentales con y sin espirulina, tanto en la expresión de los antígenos de activación como en la formación de roseta activa. Se concluye que la espirulina de producción nacional influye in vitro en el proceso de activación de los linfocitos humanos<br>Spirulina is a Cyanophyceae alga used as a food additive and as a drug for its medicinal properties. This paper was carried out to evaluate the effect in vitro of Spirulina (Spirel, Génix, Ciudad Habana, Cuba) in 14 healthy donors of the Hematology and Immunology Institute by using lymphoblastic transformation tests with tritiated thymidine, expression of HLA-DR and CD-25 activation antigens by the immunocytochemical ultramicromethod and the formation of active rosette. In blastic transformation, there were no statistically significant differences under the experimental conditions with or without spirulina whereas statistically significant differences were found when applying Student´s t for paired samples under the experimental conditions with or withour spirulina, both in the expression of activation antigens and the formation of active rosette. It is concluded that spirulina produced at national level has an effect in vitro on the activation process of human lymphocyte

Efecto in vitro del VIMANG® sobre los linfocitos humanos EFFECT IN VITRO OF VIMANG® ON HUMAN LYMPHOCYTES

El VIMANG® es un producto desarrollado por el Centro de Química Farmacéutica de Ciudad de La Habana a partir de la corteza de ciertas variedades de árboles de mango (Mangifera indica Lin). Se estudió el efecto in vitro del VIMANG® sobre los linfocitos de 20 donantes voluntarios de sangre y de 20 enfermos con diagnóstico de inmunodeficiencia celular mediante la prueba de transformación linfoblástica, con el empleo de timidina tritiada y la técnica de roseta activa. Se hallaron diferencias estadísticamente significativas entre las condiciones experimentales sin VIMANG® (25mg/mL) y con diluciones de este (desde 1:2 hasta 1:2048) en la prueba de transformación blástica. En la roseta activa se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los linfocitos sin VIMANG® y los cultivados con la dilución (1:512), tanto en los donantes sanos como los enfermos<br>VIMANG® is a product from the bark of certain varieties of mango tress (Mangifera indica Lin), devised by the Pharmaceutic Chemistry Center in the City of Havana. The effect in vitro of VIMANG on lymphocytes from 20 blood donors and 20 patients diagnosed with cellular immunodeficiency was studied through the lymphoblastic transformation test with titrated thymidine and the active rosette technique. Statistically significant differences were found under experimental conditions without VIMANG®(25mg/ml) and with VIMANG® dilutions (from1:2 to1:2048) in the blastic transformation test. Likewise, statistically significant difference between lymphocytes without VIMANG® and those cultured with VIMANG® dilution (1:512) were found in both healthy donors and patients in the active rosette tes

Efecto in vitro de una solución de Zingiber officinale Rosc. (jengibre) sobre la respuesta de linfocitos humanos de donantes sanos y enfermos con inmunodeficiencia celular In vitro effect of a solution of Zingiber officinale Rosc. (Ginger) on the response of human lymphocytes from healthy donors and patients with cellular immunodeficiency

El Zingiber officinale Rosc. (jengibre) es una especie que se ha utilizado por el hombre con diversos fines. Se estudió el efecto in vitro de una solución acuosa del rizoma de esta planta sobre los linfocitos de 30 donantes voluntarios de sangre y de 30 enfermos con diagnóstico de inmunodeficiencia celular, mediante la prueba de transformación linfoblástica, con el empleo de timidina tritiada, la técnica de formación de roseta activa y el ultramicrométodo inmunocitoquímico (UMICIQ). No se hallaron diferencias estadísticamente significativas entre las condiciones experimentales sin jengibre y con jengibre, con diluciones de este desde 1:2 hasta 1:2048 en la prueba de transformación linfoblástica. En la roseta activa y en los marcadores de activación HLA-DR y CD25 no se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los linfocitos sin jengibre y los cultivados con la dilución 1:128, tanto en los donantes sanos como los enfermos.<br>The Zingiber officinale Rosc (ginger) is a species used by man to different purposes. The in vitro effect of a aqueous solution from the rhizome of this plant on the lymphocytes of 30 volunteer blood donors and of 30 patients diagnosed with cellular immunodeficiency was studied by the lymphoblastic transformation test using tritiated thymidine, the technique of the rosette active formation and the immunocytochemical ultramicromethod (UMICIQ). There were not statistically significant differences among the experimental conditions with and without ginger with dilutions from 1:2 to 1:128 in the lymphoblastic transformation test. In the active rosette and in markers of the HLA-DR and CD25 activation there weren't statistically significant differences among lymphocytes without ginger and those cultured with a dilution 1:128 for healthy donors and for the patients

Expresión de las moléculas de adhesión en la anemia drepanocítica Expression of adhesion molecules in cases of drepanocytemia

En enfermos con anemia drepanocítica (AD) en estado basal y con crisis vasooclusivas dolorosas (CVOD), se estudió la expresión, en células mononucleares (CMN) y neutrófilos, de las moléculas de adhesión LFA-1, VLA-4, L-selectina e ICAM-1; en sangre periférica (SP), las moléculas VCAM-1 y CD34 y en fracciones de hematíes con diferente densidad, las moléculas VLA-4 y Lutheran, con anticuerpos monoclonales específicos mediante inmunofluorescencia indirecta por citometría de flujo. En ambos grupos de enfermos se observó una disminución significativa en la expresión en las CMN de las moléculas LFA-1 y VLA-4, y de LFA-1 en los neutrófilos de los pacientes en estado basal; disminución de la expresión de la molécula L-selectina en CMN y neutrófilos de pacientes en estado basal. El aumento de las moléculas ICAM-1 (CD54), CD34 y VCAM-1(CD106) en las CMN y sangre periférica de pacientes basales, demuestra la presencia de un estado de activación leucocitario y endotelial permanente determinado por la continua inflamación subclínica. El incremento significativo de ICAM-1 en neutrófilos y CD34 y VCAM-1 en sangre periférica en ambos grupos de pacientes, con mayor aumento de VCAM-1 en los pacientes en crisis, refleja la activación de monocitos, linfocitos, neutrófilos y de células endoteliales durante las CVOD, y la liberación de estas últimas a la periferia. Se observó una mayor expresión de las moléculas LFA-1, L-selectina e ICAM-1 en los neutrófilos de los enfermos con CVOD e incremento significativo de la molécula CD18 en CMN de los pacientes con CVOD, que puede explicarse por la activación de los monocitos en el fenómeno vasooclusivo.In patients with drepanocytemia (DP) in basal state and with crises of painful vaso-occlusive (PVOC) authors studied the expression in mononuclear cells (MNC) and neutrophils, of LFA-1, VLA-4, L-selectine and ICAM-1; in peripheral blood (PB), VCAM-1 and CD34 molecules, and in red blood cells with different density, VLA-4 and Lutheran molecules, with specific monoclonal antibodies by indirect immunofluorescence by flux cytometry. In both groups there was a significant decrease in expression of LFA-1 and VLA-4 molecules MNC and of LFA-1 in neutrophils of patients basal state; decrease in L-selectine molecule expression in MNC and in patients in basal state. Increase of IACM-1 (CD54), CD34 and VCAM-1 (CD106) in MNC and in peripheral blood of basal patients shows the presence of a permanent leukocyte activation state determined by the continuous subclinical inflammation. The significant increase of ICAM-1 in neutrophils and CD34 and VCAM-1 in peripheral blood in both groups of patients with a higher increase of VCAM-1 in patients in crises, shows the monocyte, lymphocyte , neutrophils, and of endothelial cells during the PVOC and the release of these latter to periphery. We note a higher expression of LFA-1, L-selectine and ICAM-1 molecules in neutrophils of patients with PVOC and a significant increase of CD18 molecule in MNC of patients with PVOC that may be explained by monocyte activation in vaso-occlusive phenomenon

Efecto in vitro de un extracto de Calendula officinalis L: sobre linfocitos humanos Effect in vitro of Calendula Officinalis L: extract on human lymphocytes

La Calendula officinalis L. es una planta ornamental y medicinal a la que han atribuido propiedades inmunoestimulantes por la medicina tradicional herbolaria. Se estudió el efecto in vitro de un extracto de esta planta (100 mg/ mL) sobre los linfocitos de 30 donantes sanos y 30 enfermos, con diagnóstico de inmunodeficiencia celular mediante la transformación linfoblástica, con criterio de timidina tritiada y de roseta activa. No se hallaron diferencias estadísticamente significativas en las condiciones experimentales sin y con diluciones de Calendula officinalis L. (desde 1:2 hasta 1: 2048) en la prueba de trasformación blástica. En la roseta activa no se hallaron diferencias entre los linfocitos sin y con incubación de extracto (dilución 1: 64) durante las 24 horas previas a la formación de la roseta. Se concluye que el extracto de Calendula officinalis L. in vitro no produjo cambios en los linfocitos humanos, tanto de donantes sanos como de enfermos, con diagnóstico de inmunodeficiencia celularCalendula Officinalis L is an ornamental and medicinal plant to which many immunoestimulating properties are attributed by the traditional medicine. The effect in vitro of an extract from this plant(100 mg/ML) on human lymphocytes from 30 healthy donors and 30 patients diagnosed with cellular immunodeficiency was studied through lymphoblastic transformation following tritated thymidine and active rosette criteria. No statistically significant differences were found under experimental conditions without and with Calendula officinalis L. dilutions (from 1:2 to 1:2048) in blastic transformation test. As to active rosette test, there was no difference between lymphocytes without and with incubated extract (dilution rate: 1:64) during the 24 hours before the rosette formation. It is concluded that Calendula officinalis L extract in vitro does not bring about changes in human lymphocytes from both healthy donors and patients diagnosed with cellular immunodeficienc

Efecto in vitro de la espirulina sobre los linfocitos humanos de donantes sanos y pacientes con inmunodeficiencia celular In vitro effect of Spirulina on the human lymphocytes of healthy donors and patients with cellular immunodeficiency

La espirulina (Spirulina sp) es un alga cianofícea empleada como suplemento alimentario y por sus propiedades medicinales. Se realizó este trabajo para evaluar el efecto in vitro de la esprirulina (Spirel, Génix, Ciudad de La Habana, Cuba) en 30 pacientes con diagnóstico de inmunodeficiencia celular y en 20 donantes sanos del Instituto de Hematología e Inmunología mediante las pruebas de transformación linfoblástica con criterio de timidina tritiada; en la expresión de los antígenos de activación HLA-DR y CD25 por el ultramicrométodo inmunocitoquímico y la formación de roseta activa. En la transformación linfoblástica con criterio de timidina tritiada no se hallaron diferencias estadísticamente significativas entre las condiciones experimentales sin y con espirulina, tanto en los pacientes con inmunodeficiencias celulares como en los donantes sanos, mientras que se hallaron diferencias estadísticamente significativas (p£0,001) al aplicar la prueba t de Student para muestras pareadas entre las condiciones experimentales sin y con espirulina, tanto en la expresión de los antígenos de activación como en la formación de roseta activa en ambos grupos analizados. Se concluye que la espirulina de producción cubana influye positivamente en el proceso de activación de los linfocitos humanos.Spirulina (Spirulina spp) is a Cyanophyceae alga used as a dietary supplement and for its medicinal properties. This paper was aimed at evaluating the in vitro effect of spirulina (Spirel, Génix, Havana City, Cuba) on 30 patients with diagnosis of cellular immunodeficiency and on 20 healthy donors from the Institute of Hematology and Immunology by the lymphoblastic transformation tests with tritiated thymidine, expression of HLA-DR and CD25 activation antigens by the immunocytochemical ultramicromethod, and the formation of active rosette. In the lymphoblastic transformation with criterion of tritiated thymidine, no statistically significant differences were found under the experimental conditions with and without spirulina, both in patients with cellular immunodeficiencies and in sound donors. Statistically marked differences (p 0,001) were detected on applying the Student's t test for matched samples between the experimental conditions with and without spirulina in the expression of the activation antigens and in the rosette formation in the analyzed groups. It was concluded that spirulina produced in Cuba exerted a positive influence on the activation process of human lymphocytes

Hipogammaglobulinemia congénita asociada con trastornos de los granulocitos.: Presentación de un caso Congenital hypogammaglobulinemia associated with granulocyte disorders.: A case presentation

Se reporta el caso de un niño de 11 meses de edad con historia de sepsis generalizada por Pseudomona aeruginosa a los 5 meses, neutropenia, leucopenia, anemia asociada con la sepsis y desde entonces, infecciones respiratorias agudas recurrentes del tracto respiratorio superior, manifestaciones alérgicas y forunculosis por pseudomona. El estudio inmunológico realizado mostró cifra disminuida de IgG con ligero incremento de IgM y valores normales de IgA y de la población de células B CD19+, así como disminución de la subpoblación de células T cooperadoras CD4+. Se encontró, además, neutropenia y defecto marcado de la fagocitosis. Se estableció el diagnóstico de hipogammaglobulinemia congénita asociada con trastornos de los granulocitos. El paciente recibió tratamiento con gammaglobulina humana por vía intramuscular, factor de transferencia e inmunoferón, con mejoría clínica evidente.<br>This is the case of a child aged 11 months with a history of systemic sepsis from Pseudomona aeruginosa at 5 months, neutropenia, leucopenia, sepsis-associated anemia and from then, recurrent acute respiratory infections of the high respiratory tract, allergic manifestations and furunculosis from pseudomona. Immunologic study conducted showed a decreased figure of IgG with a light increase of CD4+ cooperative-IgM of T cells. Also, we found the presence of neutropenia and marked defect of phagocytosis. We made the diagnosis of granulocyte-associate congenital hypogammaglobulinemia. The patient was treated with human gamma globulin by intramuscular route, transference factor and immunoferon, with an obvious improvement