Evaluation of immunoblot-based assay for detecting epstein-barr virus viral capsid antibodies

Epstein-Barr virus (EBV) enfeksiyonlarının serolojik tanısında, immünofloresan (IFA) tekniklere alternatif olabilecek, uygulanması daha pratik ve değerlendirmesi daha objektif yeni alternatif yöntemler denenmektedir. Bu çalışmada, EBV viral kapsid antijenine karşı antikor varlığının (anti-VCA IgM ve anti-VCA IgG) saptanmasında immünoblot (IB) temelli bir testin, serolojik altın standart olarak kabul edilen IFA ile karşılaştırmalı performansının değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Çalışmaya, Ege Üniversitesi Hastanesi Seroloji Laboratuvarına EBV enfeksiyonu serolojik durumunun saptanması amacıyla gönderilen yaşları 3 ay ile 89 yıl (ortalama 28 yıl) arasında değişen 104 kadın, 173 erkek hastaya ait 277 serum örneği alınmıştır. Tüm örnekler, IB (Euroline IgM ve IgG; Euroimmun, Almanya) ve IFA (EBV-CA IgG ve IgM, Euroimmun, Almanya) testleri ile çalışılmış ve sonuçlar phi (?) ilişki katsayısı kullanılarak karşılaştırılmıştır. IB yön- temiyle VCA IgM pozitif bulunan 216 olgunun sadece 34 (%15.7)’ü IFA IgM ile doğrulanırken, 162 (%75)’si IFA ile negatif, 20 (%9.3)’si ise şüpheli olarak saptanmıştır (?= 0.167; düşük ilişki). Buna karşın IB yöntemiyle VCA IgG pozitif bulunan 85 olgunun 82 (%96.5)’si IFA IgG ile doğrulanmış, 2 (%2.3)’si negatif ve 1 (%1.2)’i şüpheli olarak tespit edilmiş; IB ile negatif bulunan olguların %33.3 (6/18)’ü IFA IgG ile de negatif sonuç vermiştir (?= 0.441; anlamlı ilişki). IFA ile alınan şüpheli sonuçlar değerlendirme dışı bırakıldığında; IB VCA IgG ile IFA IgG sonuçları arasındaki uyum %85.4 (88/103) ve IB VCA IgM ile IFA IgM sonuçları arasındaki uyum %27.3 (69/253) olarak hesaplanmıştır. IB VCA IgM yönteminde bantların reaksiyon şiddeti ile IFA IgM pozitifliği arasındaki ilişki incelendiğinde; IB testinde bant koyuluğu (1+’den 3+’e doğru) arttıkça IFA testindeki pozitiflik oranlarının da arttığı (p19 bandı için %9.9’dan %29.5’e; gp125 bandı için %24’ten %85.7) gözlenmiştir. IB VCA IgM testinde, 165 örnekte tek başına p19 bant pozitifliği belirlenmiş, bunlardan 135 (%81.8)’inin IFA ile negatif, 15 (%9.1)’inin pozitif ve 15 (%9.1)’inin şüpheli sonuç verdiği izlenmiştir. IB temelli testler otomatize platformları ve bir serum örneğinde farklı IgG panellerinin saptanabilmesi gibi özellikleri nedeniyle IFA‘ya alternatif olmakla beraber, çalışmamızda VCA IgM testinde yalancı pozitiflik oranının oldukça yüksek olduğu (%75) gözlenmiştir. Sonuç olarak, tarama testi olarak IB yönteminin kullanıldığı rutin laboratuvarlarda, VCA IgM testi ile pozitif sonuç (özellikle de tek başına p19 bandı pozitifliği) veren örnekler ile düşük şiddette bant oluşturan örneklerin IFA ile doğrulanması gerektiği kanısına varılmıştır.Various attempts have been made to improve Epstein-Barr virus (EBV) serodiagnosis by developing more practical and objective methods than immunofluorescence-based assays. In the present study, the performance of immunoblot-based assays were evaluated by comparing the results obtained by the gold standard immunofluorescence antibody (IFA) test for the detection of IgM and IgG antibodies against EBV viral capsid antigen (anti-VCA). Serum samples of 277 patients admitted to Ege University Hospital for routine EBV diagnosis were included in the study. The age range of the patients was 3 months-89 years (mean 28 years) and 104 of them were females and 173 were males. All the samples were assayed by commercial immunoblot (Euroline IgM and IgG; Euroimmun, Germany) and IFA (EBV-CA IgG and IgM, Euroimmun, Germany) methods. Crosstabulation, chi-square test and phi (Φ) measures in SPSS 16.0 statistical package programme were used for data analysis. Of the 216 samples that were interpreted as positive with immunoblot-based IgM assay, only 34 (15.7%) were confirmed as positive with IFA, whereas 162 (75%) were negative, and 20 (9.3%) were equivocal (Φ= 0.167; low correlation). Of the 85 samples that were anti-VCA IgG positive with immunoblot assay, 82 (96.5%) were positive, 2 (2.3%) were negative and 1 (1.2%) were equivocal with IFA (Φ= 0.441; significant correlation). When the indeterminate results obtained by IFA test were excluded from the evaluation, the correlation between immunoblot VCA IgG and IFA IgG was 85.4% (88/103) and between immunoblot VCA IgM and IFA IgM was 27.3% (69/253). When the intensities of bands were evaluated for IgM testing, it was noted that as the intensity of the bands increased (1+ to 3+), IFA VCA IgM reactivity rates increased (from 9.9% to 29.5% for p19 band; from 24% to 85.7% for gp125 band). For immunoblot VCA IgM testing, 165 samples were found to be positive only for VCA p19 band. Of these samples, 135 (81.8%) were negative, 15 (9.1%) were positive and 15 (9.1%) were equivocal with IFA. It is observed that even though immunoblot assays with automated blotting and scanning systems can be a convenient alternative to immunofluorescence assay, the rate of false positivity obtained for VCA IgM was high (75%). It was concluded that in laboratories which apply immunoblotting as a primary screening test for EBV serodiagnosis, the positive VCA IgM results (particularly isolated p19 band positivity) and the presence of low intensity bands, should be confirmed by IFA testing

Seroprevalence of HBsAg, Anti-HIV1/2 and Anti-HCV in Pregnancies at Ege University Medical Faculty Hospital

Giriş: Hepatit B virüsü (HBV), hepatit C virüsü (HCV) ve insan immünyetmezlik virüsü (HIV) infeksiyonlarında vertikal geçiş önemli bir bulaşma yoludur. Bu viral infeksiyon etkenlerinin gebelik döneminde belirlenmesi, anne ve bebek sağlığı açısından önemlidir. Bu çalışmada Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesine başvuran gebelerde, hepatit B yüzey antijeni (HBsAg), hepatit C antikoru (anti-HCV) ve HIV antikoru (anti-HIV1/2) pozitifliğinin araştırılması amaçlandı.Materyal ve Metod: Ocak 2014-Temmuz 2017 tarihleri arasında Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Gebe Polikliniğine başvuran ve Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Viroloji Laboratuvarında HBsAg, anti-HCV ve anti-HIV testleri Architect i2000SR (Abbott, ABD) sistemi ile çalışılan, yaşları 16-49 yıl arasında (yaş ortalaması 30.3 ± 5.9) olan gebelerin sonuçları değerlendirmeye alındı. Bulgular: Çalışmaya alınan 8967 gebenin 127 (%1.4)'sinde HBsAg pozitif, 8865 gebenin 34 (%0.4)'ünde anti-HCV pozitif, 8803 gebenin 12 (%0.1)'sinde anti-HIV1/2 pozitif olarak saptandı.Sonuç: Gebelik dönemi, HBV taşıyıcısı kişilerin saptanması ve yenidoğan infeksiyonlarının önlenmesi açısından çok önemlidir. Yine anneden bebeğe HIV bulaşında en önemli korunma, annedeki HIV infeksiyonunun erken saptanması ve etkin önlemlerin alınmasıdır. Diğer yandan, etkili önleyici yöntemlerin olmaması gebelerde HCV infeksiyonu açısından taramanın gereksiz olduğunu düşündürmekle birlikte gebenin HCV pozitif olduğunun bilinmesi kontamine kan ile bebeğin temasına neden olabilecek invaziv obstetrik girişimlerden kaçınmak açısından yararlı olabilir. Bu infeksiyon etkenlerinin gebelik döneminde taranması anne ve bebek sağlığı açısından yararlıdırIntroduction: Vertical transmission is an important route for hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus (HCV) and human immunodeficiency virus (HIV) infections in children. Determination of these viral infectious agents during pregnancy is important for both maternal and infant health. In this study, the prevalances of hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis C antibody (anti-HCV) and human immunodeficiency virus antibody (anti-HIV1/2) were determined in pregnant women admitted to Ege University Medical Faculty Hospital outpatient pregnancy clinic. Materials and Methods: Test records of pregnant women, aged between 16-49 years (mean 30.3 ± 5.9), who applied to Ege University Medical Faculty Hospital Obstetrics Outpatient Clinic between January 2014 and July 2017 were tested for HBsAg, anti-HCV and anti-HIV in the Virology Laboratory, and were evaluated. Samples were screened for viral markers using Architect i2000SR (Abbott, USA). Results: ELISA results demonstrated the existence of HBsAg in 127 (1.4%) among 8967; anti-HCV in 34 (0.4%) among 8865 and anti-HIV 1/2 in 12 (0.1%) among 8803 pregnant women. Conclusion: Since perinatal exposure is an important mode of HBV transmission resulting in chronic disease in infected infants and is preventable with immunoprophylaxis, it is important to determine the HBV infected mother. The same is true for HIV infection which can be prevented if it is detected during pregnancy. For HCV infection, even though definite effective preventive measures are lacking, invasive obstetric procedures favoring the contact with contaminated maternal blood could be avoided. Screening of these viral infectious agents during pregnancy is important for both maternal and infant healt

Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesinde Gebelerde HBsAg, Anti-HIV1/2 ve Anti-HCV Seroprevalansı

Introduction: Vertical transmission is an important route for hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus (HCV) and human immunodeficiency virus (HIV) infections in children. Determination of these viral infectious agents during pregnancy is important for both maternal and infant health. In this study, the prevalances of hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis C antibody (anti-HCV) and human immunodeficiency virus antibody (anti-HIV1/2) were determined in pregnant women admitted to Ege University Medical Faculty Hospital outpatient pregnancy clinic. Materials and Methods: Test records of pregnant women, aged between 16-49 years (mean 30.3 ± 5.9), who applied to Ege University Medical Faculty Hospital Obstetrics Outpatient Clinic between January 2014 and July 2017 were tested for HBsAg, anti-HCV and anti-HIV in the Virology Laboratory, and were evaluated. Samples were screened for viral markers using Architect i2000SR (Abbott, USA). Results: ELISA results demonstrated the existence of HBsAg in 127 (1.4%) among 8967; anti-HCV in 34 (0.4%) among 8865 and anti-HIV 1/2 in 12 (0.1%) among 8803 pregnant women. Conclusion: Since perinatal exposure is an important mode of HBV transmission resulting in chronic disease in infected infants and is preventable with immunoprophylaxis, it is important to determine the HBV infected mother. The same is true for HIV infection which can be prevented if it is detected during pregnancy. For HCV infection, even though definite effective preventive measures are lacking, invasive obstetric procedures favoring the contact with contaminated maternal blood could be avoided. Screening of these viral infectious agents during pregnancy is important for both maternal and infant healthGiriş: Hepatit B virüsü (HBV), hepatit C virüsü (HCV) ve insan immünyetmezlik virüsü (HIV) infeksiyonlarında vertikal geçiş önemli bir bulaşma yoludur. Bu viral infeksiyon etkenlerinin gebelik döneminde belirlenmesi, anne ve bebek sağlığı açısından önemlidir. Bu çalışmada Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesine başvuran gebelerde, hepatit B yüzey antijeni (HBsAg), hepatit C antikoru (anti-HCV) ve HIV antikoru (anti-HIV1/2) pozitifliğinin araştırılması amaçlandı.Materyal ve Metod: Ocak 2014-Temmuz 2017 tarihleri arasında Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Gebe Polikliniğine başvuran ve Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Viroloji Laboratuvarında HBsAg, anti-HCV ve anti-HIV testleri Architect i2000SR (Abbott, ABD) sistemi ile çalışılan, yaşları 16-49 yıl arasında (yaş ortalaması 30.3 ± 5.9) olan gebelerin sonuçları değerlendirmeye alındı. Bulgular: Çalışmaya alınan 8967 gebenin 127 (%1.4)'sinde HBsAg pozitif, 8865 gebenin 34 (%0.4)'ünde anti-HCV pozitif, 8803 gebenin 12 (%0.1)'sinde anti-HIV1/2 pozitif olarak saptandı.Sonuç: Gebelik dönemi, HBV taşıyıcısı kişilerin saptanması ve yenidoğan infeksiyonlarının önlenmesi açısından çok önemlidir. Yine anneden bebeğe HIV bulaşında en önemli korunma, annedeki HIV infeksiyonunun erken saptanması ve etkin önlemlerin alınmasıdır. Diğer yandan, etkili önleyici yöntemlerin olmaması gebelerde HCV infeksiyonu açısından taramanın gereksiz olduğunu düşündürmekle birlikte gebenin HCV pozitif olduğunun bilinmesi kontamine kan ile bebeğin temasına neden olabilecek invaziv obstetrik girişimlerden kaçınmak açısından yararlı olabilir. Bu infeksiyon etkenlerinin gebelik döneminde taranması anne ve bebek sağlığı açısından yararlıdı

Türkiye’de Son On Yılda Saptanan Santral Sinir Sistemi Enfeksiyonlarında Viral Etkenlerin Değerlendirilmesi ve Bibliyometrik Analizi*

Amaç: Santral sinir sistemi (SSS) enfeksiyonları, erken tanı/tedavinin kritik derecede önemli olduğu, ciddi sekellere neden olabilen bir klinik tablo olup virüsler, saptanan başlıca etkenler arasındadır. Santral sinir sistemi enfeksiyonlarının belirlenmesinde nükleik asit testleri altın standart olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, son on yılda Türkiye’de beyin-omurilik sıvısı (BOS) örneklerinden polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) yöntemiyle viral etkenlerin araştırıldığı çalışmalar değerlendirilmiştir ve bibliyometrik analizi yapılmıştır. Yöntem: 1.1.2010 ve 1.1.2020 tarihleri arasında iki ulusal (Ulakbim, Dergipark) ve dört uluslararası (PubMed, Google Scholar, Scopus, Web of Science) veri tabanına ek olarak iki ulusal ve iki uluslararası kongre bildirileri taranmıştır. Bulgular: Çalışmaya toplam 33 çalışmadan 12.669 BOS örneği dâhil edilmiştir. En fazla yayın yapan dergi dört çalışmayla Mikrobiyoloji Bülteni’dir. En çok BOS örneği İzmir’de toplanmış (n=5566), en fazla yayını dörder çalışmayla Ankara, Ege ve Hacettepe üniversiteleri yapmıştır. Yapılan çalışma sayısı yıllarla artış eğilimindedir. Çalışmalarda saptanan başlıca viral etkenlerin yüzdelerinin aritmetik ortalamaları enterovirüs, herpes simpleks virüs, insan herpesvirüs 6 ve 7, adenovirüs, Epstein-Barr virüs, sitomegalovirüs, varisella zoster virüs, insan parechovirüs ve parvovirüs B19 için sırasıyla %2.64, %2.58, %1.90, %0.41, %1.71, %1.57, %1.24, %0.83, %0.47 ve %0.05 olarak hesaplanmıştır. Sonuç: Yapılan bibliyometrik analiz ile Türkiye’deki viral SSS enfeksiyonları sıklığına dair yapılan araştırmaların son on yıldaki durumu incelenmiş ve saptanan etkenler değerlendirilmiştir. Elde edilen veriler konunun bilimsel literatürdeki yerinin tanımlanmasında ve moleküler yöntemlerin kullanımının arttığı, klinikle eşgüdümlü, yeni ve daha güvenilir epidemiyolojik verilerle karşılaştırılmasında yararlı olacaktır

Acute glomerulonephritis and myocarditis due to Coxsackie B

A young boy, who suffered from a febrile upper respiratory tract infection 10 days before admission, had symptoms of acute glomerulonephritis with decreased urine volume, swelling of the feet and dyspnea. Renal biopsy showed diffuse cellular proliferation of the glomeruli compatible with healing acute post infectious glomerulonephritis. The normal values ofASO tit¬ter and C degree suggested that the glomerulonephritis was non-streptococcal in origin. Although the symptoms of congestion has improved rapidly with therapy, the echocardiographic findings such as global hypokinesia, low ejection fraction and dilation of the right atrium, ST-T wave changes in the electrocardiography and elevated serum levels of CPK showed coexistence of myocarditis. Tests for neutralization showed a recent Coxsackie B2 or B3 virus infection.A young boy, who suffered from a febrile upper respiratory tract infection 10 days before admission, had symptoms of acute glomerulonephritis with decreased urine volume, swelling of the feet and dyspnea. Renal biopsy showed diffuse cellular proliferation of the glomeruli compatible with healing acute post infectious glomerulonephritis. The normal values ofASO tit¬ter and C degree suggested that the glomerulonephritis was non-streptococcal in origin. Although the symptoms of congestion has improved rapidly with therapy, the echocardiographic findings such as global hypokinesia, low ejection fraction and dilation of the right atrium, ST-T wave changes in the electrocardiography and elevated serum levels of CPK showed coexistence of myocarditis. Tests for neutralization showed a recent Coxsackie B2 or B3 virus infection

Alt solunum yolu infeksiyonu olan çocuklarda respiratuvar sinsityal virüs antijenlerinin araştırılması

The prevalence of Respiratory Syncytial Virus (RSV) in the etiology of lower respiratory tract infection in 2-24 month old hospitalized children is investigated. The nasopharyngeal lavage specimens were used to detect RSV antigen by enzyme linked immunofluorescent assay (ELFA) method. Thirty six percent of the patient group and none of the control group had RSV antigen; and the difference between these two groups was significant. It is concluded that RSV plays a very important role in the etiology of lower respiratory tract infections in infants and young children in the region, and the ELFA method used to determine RSV antigen is a practical, appropiate and fast method for routine laboratories.Alt solunum yolu infeksiyonu nedeniyle hastaneye yatırılan iki yaşın altındaki çocuklarda Respiratuvar Sinsityal Virus (RSV) infeksiyonunun rolünü görmek amacıyla nazofaringeal lavaj örnekleri alınarak "enzyme-linked fluorescent immunoassay" (ELFA) yöntemi ile RSV antijeni araştırıldı. Çalışmaya alınan 55 çocukta % 36.4 oranında RSV antijeni olumlu bulunurken, kontrol grubunun hiçbirinde antijen saptanmamıştır. Bu fark anlamlı düzeydedir. Çalışma sonucunda RSV'nin hastane, tedavisi gerektiren alt solunum yolu infeksiyonlarında önemli bir etken olduğu; ayrıca, RSV antijenini saptamak amacıyla kullanılan ELFA yönteminin rutin tanı laboratuvarları için uygun, kolay ve hızlı sonuç veren bir yöntem olduğu görülmüştür